(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210224821.8 (22)申请日 2022.03.07 (71)申请人 江汉大学 地址 430056 湖北省武汉市沌口经济技 术 开发区新江大路8号 (72)发明人 李论　彭海　陈利红　高利芬　 李甜甜　周俊飞　方治伟　万人静　 肖华锋　 (74)专利代理 机构 北京众达德权知识产权代理 有限公司 1 1570 专利代理师 刘杰 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6869(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种检测大豆转基因品系的引物对组合、 试 剂盒及检测方法 (57)摘要 本发明属于生物 技术领域， 特别涉及一种检 测大豆转基因品系的引物对组合、 试剂盒及检测 方法。 所述引物对组合包括核苷酸序列序列如 SEQ ID NO.1至SEQ  ID NO.40所示； 判断待测样 品中的转基因品系； 避免了传统基因芯片和数字 PCR技术进行扩增和检测成本高， 因此本申请 的 引物在进行检测时， 可以通过一次高通量测序和 分析， 得到转基因作物中多个基因或同时检测多 种转基因作物检测结果， 节省了成本， 便 于推广。 权利要求书2页 说明书15页 序列表7页 附图1页 CN 114807407 A 2022.07.29 CN 114807407 A 1.一种检测大豆转基因品系的引物对组合， 其特 征在于， 所述引物对组合包括： 特异性扩增MON87769的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1至SEQ  ID NO.4所示； 特 异性扩增GTS40 ‑3‑2的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.5至SEQ ID NO.8所示； 特异性扩增MON8978 8的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.9至SEQ  ID NO.12所示； 特异性扩增MON87 705的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.13至SEQ ID NO.14所示； 特异性扩增3 56043的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.15至SEQ ID NO16所示； 特异性扩增3 05423的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.17至SEQ  ID NO.18所示； 特异性扩增CV127的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.19至SEQ  ID NO.20所示； 特异性扩增MON87 708的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.21至SEQ  ID NO.22所示； 特异性扩增MON87 701的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.23至SEQ ID NO.24所示； 特异性扩增FG72的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.25至SEQ ID NO.26所示； 特异性扩增A 2704‑12的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.27至SEQ  ID NO.28所示； 特异性扩增A5 547‑127的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.29至SEQ ID NO.30所示； 特异性扩增DAS ‑68416‑4的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.31至SEQ  ID NO.32所 示； 特异性扩增DAS ‑81419‑2的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.33至SEQ  ID NO34所 示； 特异性扩增DAS ‑44406‑6的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.35至SEQ  ID NO.36所 示； 特异性扩增MON87 751的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.37至SEQ  ID NO.38所示； 和/或， 特异性扩增SYHT0H2的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.39至SEQ  ID NO.40 所示。 2.根据权利要求1所述的引物对组合， 其特征在于， 所述引物对组合还包括用于扩增大 豆内参基因G m_Lectin_control的引物对。 3.根据权利要求1所述的引物对组合， 其特征在于， 扩增大豆内参基因Gm_Lectin_ control的引物对的两对引物， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.41‑SEQ ID NO44所示。 4.根据权利要求1所述的引物对组合， 其特征在于， 所述引物对组合还包括： 特异性扩 增选自下组的大豆转基因品系特异性序列的引物对： MON87769、 GTS40 ‑3‑2、 MON89788、 MON87705、 356043、 305423、 CV127、 MON87708、 MON87701、 FG72、 A2704 ‑12、 A5547 ‑127、 DAS‑ 68416‑4、 DAS‑81419‑2、 DAS‑44406‑6、 MON87751、 SYHT0H2和ATcsr1 ‑2。 5.一种检测大豆转基因品系的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括权利要求1 ‑4任意 一项所述引物对组合。 6.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括第一容器， 所述第一容 器内含有所述引物对组合。 7.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特 征在于， 所述试剂盒还 包括多重PCR预混液。 8.权利要求1 ‑4任意一项所述的引物对组合或权利要求5 ‑7任意一项的述的试剂盒在 检测大豆转基因品系及其相关产品中的应用。 9.一种检测大豆转基因成分的方法， 其特 征在于， 所述方法包括以下步骤： 得到待测大豆的DNA和权利要求1 ‑4任意一项所述的引物对组合；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114807407 A 2以所述DNA为模板， 将所述引物对组合加入反应 体系中， 进行扩增反应， 得到扩增产物； 将所述扩增产物进行高通 量测序， 得到高通 量文库； 将所述高通 量文库中的基因序列进行分析， 得到检测大豆转品系的结果。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 反应体系包括： 总体系为30 ‑50μl； 引物 对： 2‑5 μl； 2×buffer： 15‑30ul； 多重扩增酶： 0.5 ‑1 μl； 余量为水。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114807407 A 3