(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210230893.3 (22)申请日 2022.03.10 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114438231 A (43)申请公布日 2022.05.06 (73)专利权人 华南农业大 学 地址 510610 广东省广州市天河区五山 (72)发明人 聂庆华　周震　蔡柏林　蔡丹凤　 孔少芬　徐海平　马曼婷　张静　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 许佳 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (56)对比文件 CN 113913538 A,202 2.01.11 CN 102250889 A,201 1.11.23 anonymity.rs43 5111444. 《EMBL-EBI数据 库》 .2021, 温彦涛等.鸡MSTN基因多态性及其与屠体性 状的关联分析. 《中国家禽》 .2012,(第16期), 审查员 董旭婷 (54)发明名称 与鸡屠体性状相关的CRELD1基因分子标记 及应用 (57)摘要 本发明公开了与鸡屠体性状相关的CRELD1 基因分子标记及应用， 涉及生物技术领域。 所述 分子标记为SEQ  ID NO:1所示序列存在NC_ 052543.1:g.11683326G>A  SEQ IDNO:1所示序列 存在NC_0525 43.1:g.11683378G>A、 SEQ  ID NO:1 所示序列存在NC_052543.1:g.11683497T>C、 SEQ   ID NO:1所示序列存在NC_052543 .1: g.11683588A>G。 上述4个分子 标记均与鸡的屠体 性状呈显著相关。 因此， 本发明可 以准确鉴定鸡 屠体性状， 为分子标记辅助选择育种提供新的分 子标记。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图2页 CN 114438231 B 2022.09.23 CN 114438231 B 1.一种鉴别麻黄鸡屠体性状的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)以待测鸡基因组DNA为模板， 利用引物扩增目的片段， 获取扩增产物； 所述引物为如 SEQ ID NO:2所示上游引物和SEQ  ID NO:3所示下游引物； (2)对所得扩增产物测序， 检测相应单核苷酸多态性位点的基因型， 根据基因型判断鸡 屠体性状； 所述单核苷酸多态性位点包括SNP1、 SNP2、 SNP3、 SNP4， 所述SNP1为NC_052543.1: g.11683326G>A； 所述SNP2为NC_052543.1:g.11683378G>A； 所述SNP3为NC_052543.1: g.11683497T>C； 所述SNP4为NC_052543.1:g.11683588A>G； 所述屠体性状包括活体重、 胫 长、 泄殖腔皮肤黄度值、 胸肌 重、 屠体重、 胫围和半净膛率； NC_052543.1:g.11683326G>A位点与胸肌重、 活体重、 屠体重、 胫长、 胫围、 泄殖腔皮肤 黄度值存在显著相关； NC_052543.1:g.11683378G>A位点与半净膛率存在显著相关； NC_ 052543.1:g.11683497T>C位点与半净膛率存在显著相关； NC_052543.1:g.11683588A>G位 点与半净膛率和胫围存在显著相关。 2.根据权利要求1所述的鉴别麻黄鸡屠体性状的方法， 其特征在于， 反应程序为： 94℃ 预变性2min； 94℃变性30s， 58℃ 退火30s， 72℃延伸30s， 32个循环； 72℃最终延伸3min； 4℃ 保存。 3.根据权利要求1所述的方法在麻黄鸡屠体性状的选 育中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114438231 B 2与鸡屠体性状相关的CREL D1基因分子标记及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 特别是涉及与鸡屠体性状相关的C RELD1基因分子标记 及应用。 背景技术 [0002]单核苷酸多态性(Single  Nucleoti de Polymorphism， SNP)是指基因组水平上由 单个核苷酸的插入、 缺 失、 颠换和转换等而引起的基因组DNA序列的多态性。 SNP是动物可遗 传变异中最常见 的一种， 在动物基因组中广泛存在， 具有稳定遗传， 易于检测等特性。 在动 物生产实践中， SNP可用于分子标记辅助选 择(Molecu lar Mark‑assist Selection， MAS)从 而突破传统育种的瓶颈来 提高选种的准确性和目标性状的选 育效果。 [0003]表皮生长因子家族富含半胱氨酸蛋白结构域1基因(Cysteine  rich with EGF  like domains 1， CRELD1)是第一个发现的先天性心脏房室间隔缺损症发病相关基因， 其编 码的CRELD1蛋白是胚胎发育过程的重要调节因子。 CRELD1在胚胎发育过程的重要作用对成 年畜禽的屠体性状的表型也有一定的影响。 但是目前还没有CRELD1基因与禽类屠体性状相 关的SNP分子标记相关的报道。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供与鸡屠体性状相关的CRELD1基因分子标记及 应用， 以解决上 述现有技术存在的问题， 发现CRELD1基因序列的SNP位点， 并将其与鸡的屠体性状关联分 析， 为MAS提供新的SNP分子标记 [0005]为实现上述目的， 本发明提供了如下 方案： [0006]本发明提供与鸡屠体性状相关的分子标记， 所述分子标记为SNP1、 SNP2、 SNP3、 SNP4， 所述SNP1为SEQ  ID NO:1所示序列存在NC_052543.1:g.1168332 6G>A； 所述SNP2为SEQ   ID NO:1所示序列存在NC_052543.1:g.11683378 G>A； 所述SNP3为SEQ  ID NO:1所示序列存 在NC_052543.1:g.11683497T>C； 所述SNP4为SEQ  ID NO:1所示序列存在NC_052543.1: g.11683588A>G。 [0007]优选的是， 所述SNP1分为GG、 GA和AA基因型； 所述SNP2分为GG、 GA和AA基因型； 所述 SNP3分为T T、 TC和CC基因型； 所述SNP4分为A A、 AG和GG基因型。 [0008]本发明还提供一种扩增所述的分子标记的引物， 其为如SEQ  ID NO:2所示上游引 物和如SEQ  ID NO:3所示下游引物。 [0009]本发明还提供一种鉴别鸡屠体性状的试剂盒， 包 含所述的引物。 [0010]本发明还提供一种鉴别鸡屠体性状的方法， 包括以下步骤： [0011](1)以待测鸡基因 组DNA为模板， 利用所述的引物扩增目的片段， 获取扩增产物； [0012](2)对所得扩增 产物测序， 检测相应单核苷酸多态性位点的基因型， 根据基因型判 断鸡屠体性状。 [0013]优选的是， 扩增体系为： 模板DNA  2 μL、 2×Es Taq MasterMix(Dye)25 μL、 上游引物说　明　书 1/6 页 3 CN 114438231 B 3