(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210237597.6 (22)申请日 2022.03.10 (71)申请人 广东省农业科 学院植物保护研究所 地址 510640 广东省广州市五山 街道金颖 路7号农业科 学院植物保护研究所 (72)发明人 袁龙宇　雷浩霖　肖汉祥　李燕芳　 张振飞　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 专利代理师 肖云 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种基于SCAR-PCR技术在天敌肠道检测入 侵害虫稻水象甲 的方法 (57)摘要 本发明公开了一种基于SCAR ‑PCR技术在天 敌肠道检测入侵害虫稻水象 甲的方法， 涉及农业 技术领域。 本发 明的引物组包括核苷 酸序列分别 如SEQ ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示的SCAR引物 LO‑COI‑F和LO‑COI‑R。 该引物组具有较高的特异 性， 只针对稻水象甲的扩增出清晰、 单一的特异 性条带， 而对其他物种无扩增 效果， 且对稻水象 甲的幼虫和成虫均能有效鉴定， 可用于稻水象 甲 以及稻水象甲天敌的检测与甄别。 权利要求书2页 说明书7页 序列表1页 附图1页 CN 114717327 A 2022.07.08 CN 114717327 A 1.一组用于检测稻水象甲的引物组， 其特征在于， 包括核苷酸序列分别如SEQ  ID NO.1 和SEQ ID NO.2所示的SCAR引物LO ‑COI‑F和LO‑COI‑R。 2.一种试剂， 其特 征在于， 所述试剂含有权利要求1所述的引物组。 3.权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂在制备检测稻水象甲的产品中的 应用。 4.一种检测稻水象甲入侵情况的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1： 提取待测物种样品的基因 组DNA； S2： 利用权利要求1所述的SCAR引物对LO ‑COI‑F/R， 对所述基因组DNA进行SCAR ‑PCR反 应， 即得反应产物1； S3： 利用权利要求1所述 的SCAR引物对LO ‑COI‑F/R， 对所述步骤S2中的所述反应产物1 进行SCAR ‑PCR反应， 即得反应产物 2； S4： 取5 μL所述步骤S3中的所述反应产物2在琼脂糖凝胶中进行电泳， 并分析电泳结果， 判断稻水象甲 的入侵情况； 所述待测物种为稻水象甲 的天敌。 5.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤S1中， 所述待测物种样品为所述待测 物种的腹部组织或整头所述待测物种； 优选为该物种的腹部组织。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 所述腹部组织的前处理方法为： 保持在液 氮环境中研磨所述腹部组织。 7.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤S2中， 所述SCAR ‑PCR反应的反应体系 为： 8.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤S2中， 所述SCAR ‑PCR反应的扩增程序 为： 94℃5mi n； 94℃30s， 60℃30s， 72℃3 0s， 30个循环； 72℃5mi n。 9.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤S3中， 所述SCAR ‑PCR反应的反应体系 为： 10.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤S4中， 所述电泳结果的分析方法为： 如果显示有大小约为246bp的条带， 则判断有稻水象甲入侵； 如果没有大小约为246bp的条权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114717327 A 2带， 则判断没有稻水象甲入侵 。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114717327 A 3