(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210236801.2 (22)申请日 2022.03.11 (71)申请人 浙江省农业科 学院 地址 310022 浙江省杭州市石桥路198号 (72)发明人 单慧丽　姜俊芳　蒋永清　吴建良　 曹阳　 (74)专利代理 机构 杭州恒翌专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 33298 代理人 柯奇君 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 SNPs分子标记g.43756 G＞A及其在湖羊分 子标记辅助育种中的应用 (57)摘要 本发明属于湖羊分子标记辅助育种技术领 域， 具体涉及一种湖羊体长性状相关SNPs分子标 记g.43756  G＞A、 引物对、 试剂盒及其在湖羊分 子标记辅助育种中的应用。 其中， AA型个体的体 长显著高于GA型个体， GG型个体与GA， AA型个体 相比差异不显著。 通过本发明提供的分子标记及 其引物对和试剂盒， 采用相关检测方法， 能够筛 选出湖羊的体 长性状， 起到 辅助育种作用。 权利要求书1页 说明书12页 序列表1页 附图1页 CN 114381531 A 2022.04.22 CN 114381531 A 1.一种与湖羊体长性状显著相关的SNPs分子标记， 其特征在于， 该分子标记定位为 g.43756G＞A。 2.一种用于检测权利要求1中所述SNPs 分子标记的引物对。 3.权利要求2所述的引物对扩增获得的扩增产物， 该扩增产物的序列如SEQ  ID NO:1所 示。 4.一种用于扩增权利要求3所述的扩增产物的引物对。 5.根据权利要求4所述的引物对， 其特征在于， 所述引物对的序列如SEQ  ID NO:2和SEQ  ID NO:3所示。 6.一种包 含权利要求2或4或5所述引物对的试剂盒。 7.权利要求1所述的SNPs分子标记、 权利要求2或4或5所述的引物对和权利要求6所述 的试剂盒在筛选湖羊体长性状和湖羊分子标记育种中的应用； 其中， AA型个体的体长显著 高于GA型个 体， GG型个体与GA， A A型个体相比差异不显著。 8.一种筛选湖羊体重体尺性状的方法， 其特征在于， 该方法包括以下步骤： 提取湖羊外 周血基因组DNA， 采用权利要求2或4 或5所述的引物对进 行PCR扩增， 对扩增产物中权利要求 1所述的SNPs分子标记进行检测， 从而筛选出湖羊的湖羊体长性状； 其中， AA型个体的体长 显著高于GA型个 体， GG型个体与GA， A A型个体相比差异不显著。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特 征在于， 所述PCR扩增程序为： 94℃预变性， 2mi n； 98℃变性， 10sec， 53℃退火， 30sec， 68℃延伸， 30sec， 35个循环； 4℃保存， ∞； 所述PCR 扩增体系如下： 10.权利要求8或9所述方法在筛选湖羊体长性状和湖羊分子标记辅助育种中的应用； 其中， AA型个体的体长 显著高于GA型个 体， GG型个体与GA， A A型个体相比差异不显著。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114381531 A 2SNPs分子标记g.43756  G＞A及其在湖羊分子标记辅助育种中 的应用 技术领域 [0001]本发明属于湖羊分子标记辅助育种技术领域， 具体涉及一种湖羊体长性状相关 SNPs分子标记g.4375 6 G＞A、 引物对、 试剂盒及其在湖羊分子标记辅助育种中的应用。 背景技术 [0002]湖羊是我国著名的一个绵羊品种， 以繁殖力强、 早期生长速度快、 适应舍饲及高湿 高热环境等特点而出名。 但湖羊产在肉性能方面与杜泊羊、 德国美利奴羊等国外肉用绵羊 品种还存在较大差异。 因此， 非常有必要对湖羊生长性能进行选 育， 提高湖羊的产肉性能。 [0003]本申请人已有授权中国发明专利(公开号： CN109251986A、 CN109182553A、 CN109251987A、 CN1092 51985A、 CN109182554A和CN109 055579A)公开了利用GWAS技术筛选的 湖羊体尺性状候选功能基因及SNPs， 并通过SNPs 的群体验证， 获得了可用于分子标记辅助 育种的SNPs， 可用于湖羊肉用性状分子标记辅助育种和湖羊肉用系核心群个体的早期选 育。 [0004]ARHGAP24基因是Rho  GTP酶激活蛋白家族的成员， 可作为Rho  GTP酶的负调节剂， 并影响肌动 蛋白重塑、 细胞极性、 细胞迁移、 分化和 发育。 ARHGAP24(也称为p73 ‑RHOGAP或 FilGAP)位于细胞质和细胞 连接处， 在血 管生成过程中发挥重要的调节作用。 [0005]目前发现ARHGAP24基因参与肾脏中癌细胞的增殖、 细胞周期、 凋亡、 迁移和侵袭， 在该癌细胞中作用是由活化的ARF6诱导的乳 腺癌细胞造成伪足形成， 并且通过增加R ac1活 性促进胶质母细胞瘤的肿 瘤生长。 肺腺癌中出现ARHGAP24表达下调， 将会出现癌细胞的紫 杉醇耐药表型。 [0006]在哺乳动物中Rho  GTP家族与 多种细胞功能有 关， 包括肌动蛋白细胞骨架的重组， 细胞生长控制， 转录调控和膜运输， 在动物生长发育过程中还与肺发育， 呼吸系统发育， 血 管形态发生， 心脏发育和转录调控有关。 在关于杜洛克猪的生产性状的GWAS分析中已经发 现ARHGAP24与生产性状显著相关。 结合此前的研究， ARHGAP24中的突变可能与细胞生长调 控中的某些功能有关， 从而从一些 未知的通路调控进一 步影响了湖羊的生长特性。 发明内容 [0007]为了解决分子标记育种中现有技术的欠缺和现实需要求， 本发明的目的是提供一 种与湖羊体长性状显著相关的SNPs分子标记及其检测引物对和试剂盒， 并提供所述分子标 记的筛选方法和在湖羊分子标记育种中的应用。 [0008]为了实现上述的发明目的， 本申请采用了以下的技 术方案： [0009]一种与湖羊体长性状显著相关的SNPs 分子标记， 该分子标记定位 为g.4375 6G＞A。 [0010]进一步， 本申请提供了一种用于检测所述SNPs 分子标记的引物对。 [0011]进一步， 本申请提供了所述的引 物对扩增获得的扩增产物， 该扩增产物的序列如 SEQ ID NO:1所示。说　明　书 1/12 页 3 CN 114381531 A 3