(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210246276.2 (22)申请日 2022.03.14 (71)申请人 广东医科 大学附属医院 地址 524001 广东省湛江市霞山区人民大 道南57号 (72)发明人 蔡玉洁　崔理立　张丹丹　季瑶　 (74)专利代理 机构 成都行之智 信知识产权代理 有限公司 5125 6 专利代理师 李林 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于检测circRNAs标志物的引物、 检测产品 及应用 (57)摘要 本发明公开了用于检测circRNAs标志物的 引物、 检测产品及应用， 用于检测circRNAs标志 物的引物， 至少包括以下特异性引物对中的一 种， 第一特异性引物对、 第二特异性引物对、 第三 特异性引物对、 第四特异性引物对和第五特异性 引物对； 所述第一特异性引物对、 第二特异性引 物对、 第三特异性引物对、 第四特异性引物对和 第五特异性引物对分别用于检测circRNAs生物 标志物hsa_circ_0002473、 hsa_circ_0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0006010和hsa_ circ_0113010。 本发明所述引物能够用于检测 MDD诊断中的cir cRNAs标志物， 为MDD诊断提供客 观依据， 能够很好的辅助MD D诊断。 权利要求书1页 说明书5页 序列表4页 附图2页 CN 114457152 A 2022.05.10 CN 114457152 A 1.用于检测circRNAs标志物的引物， 其特征在于， 至少包括以下特异性引物对中的一 种， 第一特异性引物对、 第二特异性引物对、 第三特异性引物对、 第四特异性引物对和第五 特异性引物对； 所述第一特异性引物对、 第二特异性引物对、 第三特异性引物对、 第四特异 性引物对和第五特异性引物对分别用于检测circRNAs生物标志物hsa_circ_0002473、 hsa_ circ_0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0 006010和hsa_circ_01 13010。 2.根据权利 要求1所述的用于检测circRNAs标志物的引物， 其特征在于， 所述第一特异 性引物对的上游引物和下游引物的基因序列分别如SEQ  ID No:6和SEQ  ID No:7所示； 所述 第二特异性引物对的上游引物和下游引物的基因序列分别如SEQ  ID No:8和SEQ  ID No:9 所示； 所述第三特异性引物对的上游引物和下游引物的基因序列分别如SEQ  ID No:10和 SEQ ID No:11所示； 所述第四特异性引物对的上游引物和下游引物的基因序列分别如SEQ   ID No:12和SEQ  ID No:13所示； 所述第五特异性引物对的上游引物和下游引物的基因序列 分别如SEQ  ID No:14和SEQ  ID No:15所示。 3.根据权利要求1所述的用于检测circRNAs标志物的引物， 其特征在于， 所述hsa_ circ_0002473、 hsa_circ_0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0006010和hsa_circ_ 0113010的基因序列分别如SEQ  ID NO： 1、 SEQ  ID NO： 2、 SEQ  ID NO： 3、 SEQ  ID NO： 4和SEQ   ID NO： 5所示。 4.一种包括权利要求1 ‑3任一项所述引物的检测产品。 5.根据权利要求4所述的检测产品， 其特征在于， 所述检测产品的检测对象为全血或外 周血。 6.根据权利要求4所述的检测产品， 其特征在于， 所述检测产品为芯片、 试剂盒、 市值或 高通量测序平台。 7.根据权利要求4所述的检测产品， 其特征在于， 所述检测产品还包括 能够扩增生物标 志物hsa_circ_0002473、 hsa_circ_0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0006010和hsa_ circ_0113010的探针， 或者能够特异性结合生物标志物hsa_circ_0002473、 hsa_circ_ 0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0 006010和hsa_circ_01 13010的蛋白的抗体。 8.根据权利要求4所述的检测产品， 其特征在于， 所述检测产品还包括用于总RNA提取 的试剂、 反转录用试剂和荧 光定量测试用试剂。 9.如权利要求1 ‑3任一项所述引物或如权利要求4 ‑8任一项所述检测产品在制备诊断 MDD产品中的应用。 10.如权利要求1 ‑3任一项所述引物在制备MDD诊断中检测circRNAs生物标志物hsa_ circ_0002473、 hsa_circ_0079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0006010和hsa_circ_ 0113010试剂盒中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114457152 A 2用于检测circRNA s标志物的引物、 检测产品及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物检测技术领域， 具体涉及用于检测circRNAs标志物的引物、 检测 产品及应用。 背景技术 [0002]抑郁障碍(Depressive  disorder)以心境低落为主要特征的一组疾病， 全球大约 有2.64亿名抑郁障碍患者。 根据DSM ‑5， 抑郁障碍包括重性抑郁障碍(major  depressive   disorder,MDD)， 持续性抑 郁障碍(persi stent depressive disorder,PDD)， 经前期烦躁障 碍(premenstrual  dysphoric  disorder)， 破坏性心境失调(disruptive  mood  dysregulation  disorder),其他躯体疾病所致的抑 郁障碍(depressive  disorder due to  another medical condition)， 物质/药物所致的抑郁障碍(substance/medication   induced depressive  disorder)等。 其中， MDD是最常见的抑郁障碍， 临床上常表现为情绪 低落， 兴趣丧 失， 快感缺 失， 意志活动减退等症状， 具有反 复发作的倾向， 严重者可出现自杀 念头和行为。 目前MDD的诊断主要依据患者对症状的主观叙述以及医生对患者的精神状态 检测， 这受患者表达症状的能力和医生解读和评估这些症状的能力的影响， 因而缺 乏客观 性。 因此， 深入研究MDD的发病机制， 可以为 发现MDD可靠的生物学标志及新的治疗方法提供 坚实的理论基础。 [0003]CircRNAs是一类共价闭合的非编码RNA， 无多聚腺苷酸尾 或5’端帽子结， 具有高稳 定性， 广泛表达和组织/发育阶段特异性表达的特点， 且在血液和大脑中表达丰富。 CircRNAs的闭合环结构使其比线性RNA更稳定且半衰期更长， 并能抵抗RNA核酸外切酶R (Rnase R)降解； 与其他非编码RNA分子(如miRNAs和lncRNAs)相比， circRNAs具有更多理想 的疾病诊断生物标志物的特性。 已有研究表明circRNAs与MDD相关， 因此深入探索circRNAs 在MDD的作用将对MD D的诊断和治疗具有重大意 义。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供用于检测circ RNAs标志物的引物， 所述引物能够用于检测 MDD诊断中的circRNAs标志 物， 为MDD诊断提供客观 依据， 能够很好的辅助MD D诊断。 [0005]此外， 本发明还 包括由上述引物构成的检测产品及其应用。 [0006]本发明通过 下述技术方案实现： [0007]用于检测circRNAs标志 物的引物， 至少包括以下 特异性引物对中的一种， [0008]第一特异性引物对、 第二特异性引物对、 第三特异性引物对、 第四特异性引物对和 第五特异性引物对； 所述第一特异性引物对、 第二特异性引物对、 第三特异性引物对、 第四 特异性引物对和第五特异性引物对分别用于检测circRNAs生物标志物hsa_circ_0002473、 hsa_circ_0 079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0 006010和hsa_circ_01 13010。 [0009]本发明从MDD患者的血液中筛选除了五种生物 标志物， 分别为hsa_circ_0002473、 hsa_circ_0 079651、 hsa_circ_0137187、 hsa_circ_0 006010和hsa_circ_01 13010。说　明　书 1/5 页 3 CN 114457152 A 3