(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210263625.1 (22)申请日 2022.03.17 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100093 北京市海淀区 圆明园西路2号 中国农业大 学西校区 (72)发明人 姜力　丁宁　张昱　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 李洋 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/87(2006.01) A01K 67/027(2006.01) (54)发明名称 circ-CREBBP在鉴定或调控猪精液品质中的 应用 (57)摘要 本发明提供了circ ‑CREBBP在鉴定或调控猪 精液品质中的应用。 本发明发现了影 响猪精液品 质的重要circRNA分子标记， 通过检测circ ‑ CREBBP表 达量可进行辅助育种， 用于公猪精液品 质鉴定和高精液品质公猪的早期筛选， 选留精液 品质优势 个体， 淘汰劣势 个体， 进而实现短时间、 低成本、 高准确性的选育精液品质优良的种公猪 群体； 通过调控circ ‑CREBBP表 达， 还可以调控猪 精子活力、 精子细胞内ATP 含量以及精子存活率， 进而实现提高猪精液品质。 同时猪作为人类疾病 研究的良好模型， circ ‑CREBBP还可以作为男性 繁殖疾病的重要分子靶点， 进一步应用于快速、 无创的男性繁殖疾病诊断和改善男性精子活力 的研究。 权利要求书2页 说明书11页 序列表2页 附图3页 CN 114891893 A 2022.08.12 CN 114891893 A 1.circ‑CREBBP或circ ‑CREBBP作为标记 物在如下A1)‑A8)任一种中的应用： A1)鉴定或辅助鉴定猪的精液品质； A2)筛选或辅助筛 选高精液品质的猪或低精液品质的猪； A3)筛选或辅助筛 选高品质猪精液或低品质猪精液； A4)调控猪的精液品质； A5)调控猪的精子活力； A6)调控猪的精子细胞内ATP含量； A7)调控猪的精子存活率或凋亡率； A8)猪育种。 2.检测circ ‑CREBBP表达量的物质在 如下B1)‑B6)任一种中的应用： B1)鉴定或辅助鉴定猪的精液品质； B2)制备鉴定或辅助鉴定猪的精液品质的产品； B3)筛选或辅助筛 选高精液品质的猪或低精液品质的猪； B4)制备筛 选或辅助筛 选高精液品质的猪或低精液品质的猪的产品； B5)筛选或辅助筛 选高品质猪精液或低品质猪精液； B6)制备筛 选或辅助筛 选高品质猪精液或低品质猪精液的产品。 3.一种用于鉴定或辅助鉴定猪精液品质的产品， 其包括检测circ ‑CREBBP表达量的物 质。 4.根据权利要求2所述的应用或权利要求3所述的产品， 其特征在于： 所述检测circ ‑ CREBBP表达量的物质为检测circ ‑CREBBP表达量的试剂和/或仪器。 5.根据权利要求4所述的应用或产品， 其特征在于： 所述检测circ ‑CREBBP表达量的试 剂包括由SEQ  ID No.1所示的单链DNA分子和SEQ  ID No.2所示的单链DNA分子组成的引物 对。 6.抑制circ ‑CREBBP表达的物质在 如下C1)‑C10)任一种中的应用： C1)降低猪的精液品质； C2)制备降低猪的精液品质的产品； C3)降低猪的精子活力； C4)制备降低猪的精子活力的产品； C5)降低猪的精子细胞内ATP含量； C6)制备降低猪的精子细胞内ATP含量的产品； C7)降低猪的精子存活率或提高猪的精子凋亡率； C8)制备降低猪的精子存活率或提高猪的精子凋亡率的产品； C9)培育低精液品质的猪； C10)制备培 育低精液品质的猪的产品。 7.一种用于调控猪精液品质的产品， 其包括调控circ ‑CREBBP表达量的物质。 8.根据权利要求6所述的应用或权利要求7所述的产品， 其特征在于： 所述抑制circ ‑ CREBBP表达的物质或调控circ ‑CREBBP表达量的物质为ssc ‑circ‑CREBBP， 所述ssc ‑circ‑ CREBBP正义链的核苷酸序列如SEQ  ID No.3所示， 所述 ssc‑circ‑CREBBP反义链的核苷酸序 列如SEQ ID No.4所示。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114891893 A 29.如下D1) ‑D6)任一种方法： D1)一种鉴定或辅助鉴定猪的精液品质的方法， 包括如下步骤： 检测待测猪的精浆胞外 囊泡或精子中的circ ‑CREBBP表达量， 根据circ ‑CREBBP表达量判断待测猪的精液品质： circ‑CREBBP表达量高的猪的精液品质高于 circ‑CREBBP表达量低的猪； D2)一种筛选或辅助筛选高精液品质的猪的方法， 包括如下步骤： 检测待测猪的精浆胞 外囊泡或精子中的circ ‑CREBBP表达量， 选择circ ‑CREBBP表达量高的猪； D3)一种筛选或辅助筛选低精液品质的猪的方法， 包括如下步骤： 检测待测猪的精浆胞 外囊泡或精子中的circ ‑CREBBP表达量， 选择circ ‑CREBBP表达量低的猪； D4)一种筛选或辅助筛选高品质猪精液的方法， 包括如下步骤： 按照D2)所述方法获得 高精液品质的猪， 从所述高精液品质的猪中获得高品质猪精液； D5)一种筛选或辅助筛选低品质猪精液的方法， 包括如下步骤： 按照D3)所述方法获得 低精液品质的猪， 从所述低精液品质的猪中获得低品质猪精液； D6)一种培育低精液品质的猪或降低猪精液品质或降低猪精子活力或降低猪精子细胞 内ATP含量 或降低猪精子存活率或提高猪的精子凋亡率的方法， 包括降低猪精子中的circ ‑ CREBBP表达量的步骤。 10.根据权利要求1或2所述的应用或权利要求3所述的产品或权利要求6所述的应用或 权利要求7 所述的产品或权利要求9所述的方法， 其特 征在于： 所述猪为大白公猪。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114891893 A 3