(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210333702.6 (22)申请日 2022.03.30 (71)申请人 东南大学 地址 210096 江苏省南京市玄武区新 街口 街道四牌楼 2号 (72)发明人 吴国球　范小波　肖枫　 (74)专利代理 机构 北京同辉知识产权代理事务 所(普通合伙) 11357 专利代理师 张恩慧 (51)Int.Cl. C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/682(2018.01) C12Q 1/6804(2018.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种检测解脲脲原体核酸的DNA探针及其应 用 (57)摘要 本发明公开一种检测解脲脲原体核酸的DNA 探针及其应用， 所述DNA探针包括探针H1和探针 H2， DNA探针与目标序列混合进行催化发夹自组 装反应， DNA探针H1的序列如SEQIDNO.2所示， DNA 探针H2的序列如SEQIDNO.3所示， 探针H1的5 ’端 由地高辛修饰， 探针H2 的5’端由生物素修饰。 本 发明利用DNA 探针与目标序列混合催化发夹自组 装反应结合免疫层析试纸条， 在等温无酶扩增环 境下即可快速、 高灵敏度、 高特异性地检测解脲 脲原体。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 114703176 A 2022.07.05 CN 114703176 A 1.一种检测解脲脲原体核酸的DNA探针， 其特征在于， 所述DNA探针包括探针H1和探针 H2， DNA探针与目标序列混合进行催化发夹自组装反应； DNA探针H1的序列如SEQ  ID NO.2所示； DNA探针H2的序列如SEQ  ID NO.3所示。 2.根据权利要求1所述的检测解脲脲原体核酸的DNA探针， 其特征在于， 所述H1的5 ’端 修饰有地高辛， H2的5 ’端修饰有生物素。 3.根据权利 要求1所述的检测解脲脲原体核酸的DNA探针， 其特征在于， 所述DNA探针以 序列如SEQ  ID NO.1所示的基因作为检测靶标。 4.一种如权利要求1 ‑4任一项所述DNA探针在 在制备检测解脲 脲原体产品中的应用。 5.一种解脲 脲原体核酸的检测方法， 其特 征在于， 包括以下检测步骤： (1)取阴道分泌物， 并将拭子 头浸入含细胞保存液的取样管中； (2)取200 μL上述的待测标本， 加入到含有H1和H2冻干粉的试管中； 充分混匀后， 至于35 ℃水浴锅中， 水浴 反应15分钟； (3)水浴后， 取80μL上述反应液分别滴加在免疫分析试纸条的加样孔中， 5 ‑10分钟后， 将分析试纸条插 入荧光检测仪， 读取检测线和质控线的荧 光值。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114703176 A 2一种检测解脲 脲原体核酸 的DNA探针及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及核酸检测技术领域， 具体 的是一种检测解脲脲原体核酸的DNA探针及 其应用。 背景技术 [0002]解脲脲原体(Ureaplasma  urealyticum)属于支原体科中的脲原体属， 与男女性生 殖道炎症、 HIV感染、 不孕不育、 不良妊娠结局以及新生儿疾病等有关。 目前 临床上检测解脲 脲原体的方法主要有培养法、 免疫法和聚合酶链式反应(polymerase  chain reaction， PCR)法。 [0003]培养法检测解脲脲原体是传统的病原学检测方法， 但由于检测耗时， 并且易受标 本取材多少， 送检时间等因素影响导致假阴性。 免疫法操作简单， 耗时较短， 但是特异性和 敏感性却不够理想。 P CR法灵敏度高， 特异 性强， 但是需要专门的技术人员， 对仪器也有 特定 的要求， 在基层单位和偏远地区不能普及开 来。 发明内容 [0004]为解决上述背景技术中提到的不足， 本发明的目的在于提供一种检测解脲脲原体 核酸的DNA探针及其应用， 可 快速、 廉价、 高灵敏度地检测解脲 脲原体。 [0005]本发明的目的可以通过以下技 术方案实现： [0006]一种检测解脲脲原体核酸的DNA探针， 所述DNA探针包括探针H1和探针H2， DNA探针 与目标序列混合进行催化发夹自组装反应； [0007]DNA探针H1的序列如SEQ  ID NO.2所示； [0008]DNA探针H2的序列如SEQ  ID NO.3所示。 [0009]进一步优选地， H1的5 ’端修饰有地高辛， H2的5 ’端修饰有生物素。 [0010]进一步优选地， DNA探针以序列如SEQ  ID NO.1所示的基因作为检测靶标。 [0011]一种DNA探针在 在制备检测解脲 脲原体产品中的应用。 [0012]一种解脲 脲原体核酸的检测方法， 包括以下检测步骤： [0013](1)取阴道分泌物， 并将拭子 头浸入含细胞保存液的取样管中； [0014](2)取200 μL上述的待测标本， 加入到含有H1和H2冻干粉的试管中； 充分混匀后， 至 于35℃水浴锅中， 水浴 反应15分钟； [0015](3)水浴后， 取80 μL上述反应液分别滴加在免疫分析试纸条的加样 孔中， 5‑10分钟 后， 将分析 试纸条插 入荧光检测仪， 读取检测线和质控线的荧 光值。 [0016]本发明的有益效果： [0017]本发明所提供的等温无酶信号放大系统联合免疫分析试纸条的解脲脲原体核酸 检测方法准确率高、 操作简单， 所需时间短。 与PCR不同， 由于本发明是无酶信号扩增系统， 故无需用到成本较高的DNA聚合酶， 故能明显降低检测成本， 可适用于大规模的筛查和即时 检测， 可满足未配备PCR仪器的基层医院进行 快速检测。说　明　书 1/4 页 3 CN 114703176 A 3