(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210337375.1 (22)申请日 2022.03.31 (71)申请人 聚点 （重庆） 生物医学研究有限公司 地址 400000 重庆市渝中区高新区虎溪街 道大学城中路61号重庆医科大学缙云 校区兰苑楼SQ0 010 (72)发明人 马辰凯　李进　王虹燕　 (74)专利代理 机构 北京和信华成知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11390 专利代理师 颜思文 (51)Int.Cl. C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/01(2006.01)C12R 1/145(2006.01) (54)发明名称 一种辅助诊断结直肠癌高危人群的生物标 志物及方法 (57)摘要 本申请公开了一种辅助诊断结直肠癌高危 人群的生物标志物及方法， 与现有技术相比， 通 过收集结直肠息肉患者的粪便样 本， 对粪便样本 进行粪便基因组DNA的提取， 采用辅助诊断结直 肠癌高危人群的试剂盒对粪便基因组DNA进行微 生物菌群探针法实时荧光定量PCR检测， 测定生 物标志物的含量， 根据测定的生物标志物的含量 辅助判断结直肠息肉患者的患结直肠癌风险。 本 申请提供的辅助诊断结直肠癌高危人群的生物 标志物及方法， 能快速诊断血液或粪便中是否含 有结直肠癌特征性微生物， 有助于结直肠癌的临 床诊疗。 权利要求书2页 说明书5页 序列表3页 附图1页 CN 114574604 A 2022.06.03 CN 114574604 A 1.一种辅助诊断结直肠癌高危人群的生物标志物， 其特征在于， 包括： 核梭桿菌 (Fusobacterium  nucleatum)、 双歧杆菌(Bifidobacterium)、 擬杆菌(Bacteroides   clarus)和梭狀芽孢杆菌(Cl ostridium hathewayi)中的一种或两种以上。 2.根据权利要求1所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的生物标志物， 其特征在于， 包括 血液微生物和/或粪便微 生物。 3.一种辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 所述检测试剂包含根据 权利要求1所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的生物标志 物。 4.根据权利要求3所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 还包 括： 检测核梭桿菌的引物与探针； 检测双 歧杆菌的引物与探针； 检测擬杆菌的引物与探针； 检测梭狀芽孢杆菌的引物与探针。 5.根据权利要求4所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 所述检 测核梭桿菌的引物序列为： 上游引物5 ′ ‑CAACCATTACTTTAACTCTACCATGTTCA‑3′； 下游引物5 ′ ‑GTTGACTTTACAGAAGGAGATTATGTAAAAATC‑3′， 所述检测核 梭桿菌的探针序列为： 探针GTTGACTTTACAGAAGGAGATTATGTAAAAATC。 6.根据权利要求5所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 所述检 测双歧杆菌的引物序列为： 上游引物5 ′ ‑CTCCTGGAAACGGGTGG‑3′； 下游引物5 ′ ‑GGTGTTCTTCCCGATATCTACA ‑3′， 所述检测双歧杆菌的探针序列为： 探针5′ ‑ATGCGAGGGCAA‑3′。 7.根据权利要求6所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 所述检 测擬杆菌的引物序列为： 上游引物TC CATCCGCAAGCCTTTACT； 下游引物GCT TCCGGTGCCATTGACTA， 所述检测擬杆菌的探针序列为： 探针TTCATCATCACAGC CGACAACGCA。 8.根据权利要求7所述的辅助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂， 其特征在于， 所述检 测梭狀芽孢杆菌的引物序列为： 上游引物G GGCTGCGGAAGCAACTTA； 下游引物GATGAC CTCGCCCTGATCAT， 所述检测梭狀芽孢杆菌的探针序列为： 探针ACCACCACACAGGACGGAAAGATTCTCC。 9.一种辅助诊断结直肠癌高危人群的试剂盒， 其特征在于， 包括： 权利要求8所述的辅 助诊断结直肠癌高危人群的检测试剂及PCR所需试剂。 10.一种结直肠癌高危人群的辅助诊断方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1、 收集结直肠息肉患者的粪便样本； S2、 对所述 步骤S1中的粪便样本进行粪便基因 组DNA的提取；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114574604 A 2S3、 采用权利要求9所述的辅助诊断结直肠癌 高危人群的试剂盒对所述步骤S2中的粪 便基因组DNA进行微 生物菌群探针法实时荧 光定量PCR检测， 测定所述 生物标志 物的含量； S4、 根据所述步骤S3测定的所述生物标志物的含量辅助判断结直肠息肉患者的患结直 肠癌风险。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114574604 A 3