(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210339718.8 (22)申请日 2022.04.01 (71)申请人 中南大学 地址 410083 湖南省长 沙市岳麓区麓山 南 路932号 (72)发明人 项荣　刘宇星　范亮亮　王芳　 赵美方　 (74)专利代理 机构 长沙正奇专利事务所有限责 任公司 431 13 专利代理师 郭立中　凡凤 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/573(2006.01) (54)发明名称 LPIN3蛋白或编码LPIN3蛋白的基因在作为 急性肾损伤的生物标志 物中的应用 (57)摘要 本发明为LPIN3蛋白或编码LPIN3蛋白的基 因在作为急性肾损伤的生物标志物中的应用， 涉 及LPIN3蛋白在评估肾毒副作用中的应用， 属于 生物医药领域。 本发明提供了LPIN3蛋白或编码 LPIN3蛋白的mRNA或编码LPIN3蛋白的基因在评 估肾毒性副作用中的新应用。 所述LPIN3蛋白的 氨基酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 所述编码LPIN3 蛋白的mRNA其序列如SEQ  ID NO.2所示。 所述编 码LPIN3蛋白的基因的CDS序列如SEQ  ID NO.3所 示。 本发明通过大量实验证明， LPIN3的表 达量的 降低， 个体使用顺铂或造影剂后肾毒性副作用反 应发生的可能性也就越大， 反之亦然。 因此， LPIN3蛋白的含量高低在一定程度上可以直接用 于评估个体使用顺铂或造影剂后肾毒性副作用 的严重程度进而对个体是否采用顺铂或造影剂 用药提供指导。 权利要求书1页 说明书9页 序列表7页 附图4页 CN 114875130 A 2022.08.09 CN 114875130 A 1.LPIN3蛋白或编码LPIN3蛋白的mRNA 或编码LPIN3蛋白的基因在作为急性肾损伤的生 物标志物中的应用， 其特 征在于， 所述 LPIN3蛋白的氨基酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述编码LPIN3蛋白的mRNA其序列如SEQ   ID NO.2所示。 3.根据权利 要求1所述的应用， 其特征在于， 所述编码LPIN3蛋白的基因的Ensembl编号 为ENSG00000132793， 该基因的CD S序列如SEQ  ID NO.3所示。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述急性肾损伤是由顺铂、 造影剂或肾毒 性抗生素造成。 5.一种急性肾损伤检测的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包含检测LPIN3蛋白或编码 LPIN3蛋白的mRNA或编码LPI N3蛋白的基因的试剂。 6.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述检测包括： 胶体金免疫层析法、 免疫 印迹法、 免疫组化、 免疫荧 光、 流式细胞术、 酶联免疫法、 核酸探针法或qPCR法。 7.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒中包括抗LPIN3蛋白的特异 性抗体、 用于扩增编码LPIN3蛋白的mRNA或基因的特异性引物、 用于检测编码LPIN3蛋白的 mRNA或基因的探针或芯片中的一种或几种。 8.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述用于扩增编码LPIN3蛋白的mRNA或 基因的特异性引物的序列如SEQ  ID NO.4和SEQ  ID NO.5所示。 9.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述用于扩增编码LPIN3蛋白的mRNA或 基因的特异性引物还包括内参基因GAPDH的PCR扩增特异性引物， 序列如SEQ  ID NO.6和SEQ   ID NO.7所示。 10.如权利要求5 ‑9任一项所述的试剂盒在制备急性肾损伤检测试剂中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114875130 A 2LPIN3蛋白或编码LPIN3蛋白的基因在作 为急性肾损伤的生物 标志物中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及LPIN3蛋白或编码LPIN3蛋白的基因在作为急性肾损伤的生物标志物 中的应用， 属于生物医药 领域。 背景技术 [0002]急性肾损伤(acute  kidney injury， AKI)是由各种原因引起的短时间内肌酐极速 上升， 肾功能快速减退为特征表现的急危重症。 脓毒血症、 缺血/再灌注和肾毒性药物的使 用均可导致AKI， 其中肾毒性药物(如顺铂、 造影剂、 肾毒性抗生素等)所致的药物相关性肾 损伤占所有AKI病例的25％， 是发生AKI的主要原因之一。 由于对AKI复杂的发生机制仍知之 甚少， 至今仍缺乏有效的预防和治疗措施， 导致其死亡率高且预后差。 据统计， 全球每年有 170万人死于AKI， 处于危重病死亡率前列， 存活的患者中约有20％将进展为慢 性肾脏病， 甚 至是终末期肾病而需要终身透析治疗， 给家庭和社会造成巨大的负担。 因此， 深入研究AKI 的病理生理机制， 寻找以发病机制为基础的新的AKI防治策 略， 对于提高AKI患者的生存水 平并阻止其进一 步进展意义重大。 [0003]顺铂是临床上药物性AKI的常见病因， 顺铂因可抑制肿瘤细胞增殖， 是一种强效的 化疗药物。 然而， 肾脏毒性是顺铂 最常见的副作用， 常常表现为AKI。 其机制复杂， 主要包括 脂毒性、 氧化应激、 炎症反应、 线粒体凋亡等， 具体还有待研究。 据统计， 约25％ ‑30％的患者 注射顺铂后会出现肾损伤。 随着现代造影技术的广泛开展， 造影剂为临床诊断带来便利的 同时， 其肾脏毒性同样引发了肾病工作者们 广泛的关注。 常用的造影剂一般均为高渗性， 其 含碘量高达37％， 在体内 以原形由肾小球滤过而不被肾小管吸收， 脱水时该药在肾内浓度 增高， 可致肾损 害而发生急性肾衰竭。 因此， 如 何缓解药物性所致AKI， 为AKI的防治提供新 的理论依据、 潜在诊断标志 物及干预靶点对临床治疗具有重要意 义。 [0004]肾小管上皮细胞是A KI发生的关键靶细胞， 肾小管上皮细胞损伤 是AKI的主要病理 学基础， 而细胞死亡是肾小管上皮细胞损伤的主要 形式。 经典的细胞死亡方式， 包括调节 性 的细胞凋亡和非调节性的细胞坏死已被证实存在并推动了AKI的发生与发展。 随着近年来 科研的进展， 多种新型细胞程序性死亡方式被发现， 其中包括细胞焦亡、 铁死亡等同样 被学 者证实在AKI的发生与 发展当中发挥着不同程度的重要作用。 然而鉴于AKI的病因繁多， 信 号通路错综复杂， 机制各有不同， 因此其分子调控机制尚未完全阐明。 [0005]脂素(LPIN)是近几年发现的一个蛋白家族， 主要参与维持身体脂代谢平衡， 该家 族在哺乳动物中共有三个成员LPIN 1、 LPIN2和LPIN3， 这些家族成员在细胞的各生理过程中 都发挥着重要的作用。 虽然LPIN1、 LPIN2和LPIN3属于同一家族， 但三者有较大的差异性， 尤 其LPIN3。 例如LPIN1、 LPIN2在人体肾组织中低表达， 而LPIN3则相对高表达(Donkor  J, Sariahmetoglu  M,Dewald  J,et al.Three  Mammalian  Lipins Act as Phosphatidate   Phosphatases  with Distinct  Tissue Expression  Patterns[J].Journal  of  Biological  Chemistry,2007,282(6):3450 ‑7.)。 通过比对LPIN 蛋白家族成员的蛋白结构说　明　书 1/9 页 3 CN 114875130 A 3