(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210437262.9 (22)申请日 2022.04.20 (71)申请人 武汉大学 地址 430072 湖北省武汉市武昌区八一路 299号 (72)发明人 李枫　张蔚　樊冠兰　王凡　 陈雨柔　郑茜　熊洁　 (74)专利代理 机构 北京金智普华知识产权代理 有限公司 1 1401 专利代理师 张晓博 (51)Int.Cl. C07K 14/00(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C07K 19/00(2006.01) A61K 38/16(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (54)发明名称 靶向Akt PH功能域的肽 (57)摘要 本申请公开了靶向丝氨 酸苏氨酸激酶Akt蛋 白PH功能域的肽为(I)～(IV)中的至少一项， 能 够有效地抑制肿瘤细胞的Akt通路， 以显著抑制 了Akt激活的肿瘤细胞生长。 进而还公开了靶向 丝氨酸苏氨酸激酶Akt蛋白PH功能域的融合蛋 白， 其能与靶向Akt激酶活性区域的小分子抑制 剂联合使用， 并可有效降低Akt 的小分子抑制剂 所需的剂量， 在很大程度上减 轻了细胞毒性的副 作用。 权利要求书2页 说明书14页 序列表7页 附图2页 CN 114933637 A 2022.08.23 CN 114933637 A 1.一种肽， 其中所述肽为(I)～(IV)中的至少一项： (I)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列； (II)与(I)所述序列至少有90％同源性的序列； (III)具有与(I)或(II)所示的氨基酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个氨基酸序列 获得的氨基酸序列， 且与(I)或(I I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列； (IV)所述肽的肽缀 合物/螯合物分子、 衍 生物、 肽形成的盐。 2.根据权利要求1所述的肽， 其具有如SEQ  ID NO.2～10任一所示的氨基酸序列。 3.一种基因DNA， 其中所述基因DNA编码以下的肽， 所述肽为(I)～(IV)中的至少一项： (I)SEQ ID NO.1所示； (II)与(I)所述序列至少有90％同源性的序列； (III)具有与(I)或(II)所示的氨基酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个氨基酸序列 获得的氨基酸序列， 且与(I)或(I I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列； (IV)所述肽的肽缀 合物/螯合物分子、 衍 生物、 肽形成的盐。 4.一种DNA， 该DNA由SEQ  ID NO.2所示的碱基序列组成， 用于编码权利要求1所述的肽。 5.一种含有权利要求3或4所述的DNA的表达载体。 6.一种含有权利要求5所述的表达载体的宿主。 7.一种融合蛋白， 其中所述融合蛋白包 含权利要求1所述的肽序列。 8.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括权利要求1所述的肽序列和纯化 标签。 9.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括包括权利要求1所述的肽序列、 纯化标签以及连接在权利要求1所述的肽序列与所述纯化标签之间的第一连接肽， 所示第 一连接肽的氨基酸序列为G GGGSGGGGS。 10.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括权利要求1所述的肽序列、 连接 在权利要求1所述的肽序列一端的纯化标签以及连接在权利要求1所述的肽序列另一端的 HA标签。 11.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括权利要求1所述的肽序列、 连接 在权利要求 1所述的肽序列一端的纯化标签、 连接在权利要求 1所述的肽序列另一端的HA标 签、 连接在权利要求1所述的肽序列与所述纯化标签之 间的第一连接肽、 以及连接在权利要 求1所述的肽序列与HA标签之间的第二连接肽； 所示第一连接肽的氨基酸序列为 GGGGSGGGGS， 所述第二连接肽的氨基酸序列为GSG。 12.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括权利要求1所述的肽、 第 一辅助 靶向肽和第二辅助靶向肽， 其中， 第一辅助靶向肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO.11所示， 第二 辅助靶向肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO.12所示。 13.根据权利要求7所述的融合蛋白， 所述融合蛋白包括包括权利要求1所述的肽， 依次 连接在权利要求1所述的肽N端的第一辅助靶向肽、 纯化标签和第一连接肽， 以及依 次连接 在权利要求1所述的肽C端的第二连接肽、 HA标签和第二辅助靶向肽； 第一连接肽的氨基酸 序列为GGGGSGGGGS， 第二连接肽的氨基酸序列为GSG， 第一辅助靶向肽的氨基酸序列如SEQ   ID NO.11所示， 第二辅助靶向肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO.12所示。 14.根据权利 要求7所述的融合 蛋白， 其中所述融合蛋白具有SEQ  ID NO.15～19任一所权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114933637 A 2示的氨基酸序列。 15.一种药物制剂， 其包括权利要求1的肽、 和/或权利要求7～14任一所述的融合蛋白， 以及药学上可接受的辅料或者载体。 16.一种药物组合物， 其包括权利要求14所述的药物制剂， Akt 的小分子抑制剂以及其 他靶向肿瘤 细胞的单抗。 17.权利要求1或2的肽在制备靶向Akt激活的癌症细胞Akt蛋白的药物中的应用， 所述 癌症选自脑胶质癌、 结肠癌、 宫颈癌、 乳腺癌、 肺癌、 前列腺癌、 卵巢癌、 白血病和淋巴癌中的 至少一种。 18.权利要求7～14任一项所述的融合蛋白在制备靶向Akt激活的癌症细胞Akt蛋白的 药物中的应用， 所述癌症选自脑胶质癌、 结肠癌、 宫颈癌、 乳腺癌、 肺癌、 前列腺癌、 卵巢癌、 白血病和淋巴癌中的至少一种。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114933637 A 3