(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210450688.8 (22)申请日 2022.04.27 (71)申请人 深圳清华大 学研究院 地址 518000 广东省深圳市南 山区科技园 高新南七道19号清华研究院 申请人 安序源生物科技 （深圳） 有限公司 (72)发明人 张琦文　陈全友　陈丽伊　何筠　 高亚平　伊戈尔·伊万诺夫　田晖　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 专利代理师 刘燚 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/686(2018.01)C12Q 1/6837(2018.01) C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 一种检测多种呼吸道病毒的试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种检测多种呼吸道病毒的 试剂盒， 所述试剂盒包括引物对组， 所述引物对 组包括第一至第十六引物对中的至少两种， 其 中， 第一至第十 六引物对的序列如SEQ  IDNO.1～ 33所示。 本发明检测多种呼吸道病毒的方法中同 一靶标设计了两种不同探针(靶 标探针与 捕获探 针)， 因此获得了双重的特异性， 检测结果更准 确， 能够很好的避免假阳性和假阴性。 本发明设 计的捕获探针， 灵敏性和特异性都极高， 能实现 绝大部分都与PCR中的靶标探针相结合， 几乎不 会与非靶标探 针结合。 权利要求书3页 说明书21页 序列表6页 附图4页 CN 115011734 A 2022.09.06 CN 115011734 A 1.一种检测多种呼吸道病毒的引物对组， 其特征在于： 所述引物对组包括以下引物对 中的至少两种： 第一引物对： 所述第一引物对包括如SEQ  ID NO.1所示的正向引物和 如SEQ ID NO.2所 示的反向引物； 第二引物对： 所述第二引物对包括如SEQ  ID NO.3所示的正向引物和 如SEQ ID NO.4所 示的反向引物； 第三引物对： 所述第三引物对包括如SEQ  ID NO.5所示的正向引物和 如SEQ ID NO.6所 示的反向引物； 第四引物对： 所述第四引物对包括如SEQ  ID NO.7所示的正向引物和 如SEQ ID NO.8所 示的反向引物； 第五引物对： 所述第五引物对包括如SEQ  ID NO.9所示 的正向引物和如SEQ  ID NO.10 所示的反向引物； 第六引物对： 所述第六引物对包括如SEQ  ID NO.11所示的正向引物和 如SEQ ID NO.12 所示的反向引物； 第七引物对： 所述第 七引物对包括如SEQ  ID NO.13所示的正向引物和 如SEQ ID NO.14 所示的反向引物； 第八引物对： 所述第八引物对包括如SEQ  ID NO.15所示的正向引物和 如SEQ ID NO.16 所示的反向引物； 第九引物对： 所述第九引物对包括如SEQ  ID NO.17所示的正向引物和 如SEQ ID NO.18 所示的反向引物； 第十引物对： 所述第十引物对包括如SEQ  ID NO.19所示的正向引物和 如SEQ ID NO.20 所示的反向引物； 第十一引物对： 所述第十一引物对包括如SEQ  ID NO.21所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.22所示的反向引物； 第十二引物对： 所述第十二引物对包括如SEQ  ID NO.23所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.24所示的反向引物； 第十三引物对： 所述第十三引物对包括如SEQ  ID NO.25所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.26所示的第一反向引物或者如SEQ  ID NO.27所示的第二反向引物； 第十四引物对： 所述第十四引物对包括如SEQ  ID NO.28所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.29所示的反向引物； 第十五引物对： 所述第十五引物对包括如SEQ  ID NO.30所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.31所示的反向引物； 第十六引物对： 所述第十六引物对包括如SEQ  ID NO.32所示的正向引物和如SEQ  ID  NO.33所示的反向引物。 2.根据权利要求1所述的引物对组， 其特征在于： 所述呼吸道病毒包括新型冠状病毒、 流感病毒甲型、 副流感病毒III型、 冠状病毒HCoVOC43、 副流感病毒IV型、 冠状病毒、 流感病 毒乙型、 人偏肺病毒、 呼吸道 合胞病毒A型、 呼吸道 合胞病毒B型、 副流 感病毒II型、 冠状病毒 HCoV‑229E、 博卡病毒、 冠状病毒H CoV‑NL63、 人腺病毒和副流感病毒I型中的至少两种。 3.一种检测多种呼吸道病毒的信号探针， 其特征在于： 所述信号探针包括以下信号探权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115011734 A 2针中的至少两种： IVA： 5’ ‑Fc‑ATCAAAGCTCTCA AACGCTCAC CGTGCCCAGTGAGCGA ‑3’； IVB： 5’ ‑Fc‑CAGTAATGGGCAGTATG GCCATCGGATCCTCAAYTCACTCT ‑3’； HCOV‑HKU1： 5’ ‑Fc‑GGCTGATACGACA ATGAGTGA AATAGTTATGTGTG GCGG‑3’； HCOV‑OC43： 5’ ‑Fc‑ACAGCGAGTCT TTTCCGCCTGGCACGGTACTCC‑3’； HCOV‑NL63： 5’ ‑Fc‑GTGCTCCGAACTATTGCCAAGGCTCCTAAACGTACAG GT‑3’； HCOV‑229E： 5’ ‑Fc‑CCAAGTCATTGACGCCCTGACGAC CACGTTGTGGTTC‑3’； RSVA： 5’ ‑Fc‑AACGATCTCT TGGGCTAGGAGCCATTGTGTCATGCTAT ‑3’； RSVB： 5’ ‑Fc‑ACTTATGGGACAACCTATGACATCA ACGACAACAGGAAATCATG‑3’； PIV1： 5’ ‑Fc‑ACTTATGGGACAACCTATGACATCA ACGACAACAGGAAATCATG‑3’； PIV2： 5’ ‑Fc‑ATAGGAGAACAAACATGGAATCAATCGCAAAAGCTGT‑3’； PIV3‑1： 5’ ‑Fc‑CAGTTTCGTGTAATTGGATGTTCAAGACCTCCATACCCGA‑3’； PIV3‑2： 5’ ‑Fc‑CAGTTTCGTGTAATTGGATGTTCAAGACCTCCATATCCGAG‑3’； PIV3‑3： 5’ ‑Fc‑CAGTTTCGTGTAATTGGGTGTTCAAGACCTCCATATCCGA‑3’； PIV4： 5’ ‑Fc‑ATATGCTC CGAACTTGGGCAAGCYTTATTYCCTGGACAATCTTT‑3’； HAdV： 5’ ‑Fc‑ATAATCGATTGACATTCGCCCGTGCAACAGACAC CT‑3’； HBoV： 5’ ‑Fc‑TACTCTATGT TCAGAACTCCACCCCATGCCTCTCGCTCA ‑3’； HMPV： 5’ ‑Fc‑AGACACAATCTGATATGT TGTGCGGCARTTTTCAGACAAT‑3’； SARS‑CoV‑2： 5’ ‑Fc‑ATGCAACGACATTACCGTCTGCG GTATGTGGAAAGGTTATGG‑3’； 其中， R＝A或者G， Y＝C或者T。 4.一种检测多种呼吸道病毒的捕获探针， 其特征在于： 所述捕获探针包括以下捕获探 针中的至少两种： CP‑IVB： 5`‑(SH)3‑TTTTTCTGCCCATTACTG‑3`； CP‑HKU1： 5`‑(SH)3‑TTTTTTCGCCATTGTATTA‑3`； CP‑NL63： 5`‑(SH)3‑TTTTTAAAGTTCCTTGGAT‑3`； CP‑229E： 5`‑(SH)3‑TTTTTGTTCTAAGCATCAT ‑3`； CP‑PIV4： 5`‑(SH)3‑TTTTTAGTTCGGAGCATAT ‑3`； CP‑PIV3： 5`‑(SH)3‑TTTTTATTACACGAAACTG‑3`； CP‑HBoV： 5`‑(SH)3‑TTTTTCTGAACATAGAGTA ‑3`； CP‑HMPV： 5`‑(SH)3‑TTTTTATCAGAT TGTGTCT‑3`； CP‑RSVA： 5`‑(SH)3‑TTTTTCAATCGCACAT TAT‑3`； CP‑RSVB： 5`‑(SH)3‑TTTTTTTGTCGTATCAGAT ‑3`； CP‑PIV2： 5`‑(SH)3‑TTTTTGTTTGTTCTCCTAT‑3`； CP‑IVA： 5`‑(SH)3‑TTTTTTTGAGAGCT TTGAT‑3`； CP‑SARS‑CoV‑2： 5`‑(SH)3‑TTTTTTAATGTCGTTGCAT‑3`； CP‑HAdV： 5`‑(SH)3‑TTTTTTGTCAATCGATTAT‑3`； CP‑PIV1： 5`‑(SH)3‑TTTTTTTGTCCCATAAGT‑3`； CP‑OC43： 5`‑(SH)3‑TTTTTTTATGGACCTGTTA‑3`。权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 115011734 A 3