ICS 65.020.20 CCS B 05 35 福建省地方标准 DB35/T 2139 —2023 白鹤芋组织培养育苗技术规程 Technical regulation for tissue culture seedlings of Spathiphyllum lanceifolium （Jacq.） Schott 2023 - 10 - 25 发布 2024 - 01 - 25 实施 福建省市场监督管理局 发布 DB35/T 2139 —2023 I 目次 前言 ............................................................ ..................... II 1 范围 ......................................................... ...................... 1 2 规范性引 用文件 .................................................... ................. 1 3 术语和定 义 ...................................................... ................... 1 4 组培设施 ....................................................... .................... 1 5 培养基 ........................................................ ..................... 1 6 诱导培养 ....................................................... .................... 2 7 继代增殖 培养 ..................................................... .................. 3 8 生根培养 ....................................................... .................... 3 9 移栽与苗 期管理 .................................................... ................. 4 10 苗木质量 ...................................................... .................... 5 11 档案管理 ...................................................... .................... 5 附录 A（资料性） 白鹤芋苗期主要病虫害防治方法 ......................................... 6 DB35/T 2139 —2023 II 前言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由福建省林业局提出并归口。 本文件起草单位：泉州市泉美生物科技有限公司、泉州市林木种苗站、泉州市林业行政执法支队、 福建农林大学、泉州市林业技术推广中心、泉州市国有林场发展中心、泉州市森林资源监测站。 本文件主要起草人：郑焙华、谢阿彬、李雪、陈发兴、简丽观、康清炳、黄大头、陈远生、胡晓波、 林清山、张莉萍、苏宝川、张春贵、彭金彬、汪国彬、郑建铃、朱志勇、柯贤石。 DB35/T 2139 —2023 1 白鹤芋组织培养育苗技术规程 1 范围 本文件规定了白鹤芋[ Spathiphyllum lanceifolium (Jacq.) Schott]组织培养育苗过程的培养基、 诱导培养、继代增殖培养、生根培养、移栽与苗期管理、苗木质量和档案管理的技术要求。 本文件适用于白鹤芋组织培养育苗生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 LY/T 2289 林木种苗生产经营档案 NY/T 2306— 2013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 NY/T 2306—2013界定的术语和定义适用于本文件。 4 组培设施 应符合NY/T 2306—2013中第4章的规定。 5 培养基 基本培养基 基本培养基为改良MS培养基。改良MS培养基是MS中KNO 3的含量为2 300 mg/L，NH 4NO3的含量为2 000 mg/L。 培养基配方 5.2.1 诱导培养基配方 改良MS＋6-BA 1.0 mg/L～4.0 mg/L＋NAA 0.01 mg/L～0.02 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂 粉5 g/L。 5.2.2 继代培养基配方 改良MS＋6-BA 0.5 mg/L～4.0 mg/L＋I BA 0.1 mg/L～3 m g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉5 g /L。 DB35/T 2139 —2023 2 5.2.3 生根培养基配方 改良MS＋NAA 0.1 mg/L～3 m g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉6 g/L。 培养基 pH值 用1 mol/L HCl或1 mol/L NaOH调节培养基pH值为6.0。 培养基配制 按照NY/T 2306—2013中第7章的规定执行。 培养基分装 将培养基用分装机分装广口组培瓶(宜用200 g，300 mL)，按60 mL定量分装，避免培养基沾到瓶口。 培养基分装好、加盖、封口后，贴好标签，标明名称、配制日期和配制人。 培养基灭菌 5.6.1 灭菌 采用高压蒸汽灭菌器进行湿热灭菌，灭菌压力0.10 Mpa～0.11 Mpa，温度121 ℃～122 ℃，灭菌时 间20 min～22 min。 5.6.2 冷却与储存 灭菌后的培养基置于无风、 洁净和避光的环境中冷却， 环境温度15 ℃～27 ℃、 空气相对湿度＜60％， 储存时间不超过15 d。 6 诱导培养 外植体的准备 选择性状优良、生长健壮植株的顶芽或根茎作为外植体。将选择好的植株放置于干净、通风良好的 环境，在采集外植体前4 d～7 d控水控肥，让植株呈轻度萎蔫状。 外植体处理 6.2.1 预处理 剥除植株的叶片，取顶芽以下10 mm～15 mm，基部干净平滑。 6.2.2 清洗 将切割好的外植体先用0.5％ （V/V）洗洁精清洗，再用自来水清洗2～3次后放置超净工作台晾干备用。 6.2.3 消毒 在超净工作台上根据外植体的大小分瓶，用0.1％（m/v）HgCl 2消毒8 min～12 min后，再使用无菌 水冲洗3次，沥干水分备用。 外植体接种 6.3.1 准备工作 DB35/T 2139 —2023 3 按照NY/T 2306—2013中10.1～10.3的规定准备。 6.3.2 物品灭菌 接种所需镊子、 手术刀置于电热灭菌器1 min～2 min后，置于无菌搁置架上晾置至室温。 毛巾用75％ （v/v）酒精浸泡25 min ～30 min后烘干备用或直接高压灭菌后冷却备用。将20 cm×25 cm、80 g牛皮 纸每100张一袋，整齐装于牛皮纸袋中，用透明胶封口，高压灭菌后烘干备用，灭菌压力0.10 Mpa～0.11 Mpa，灭菌温度121 ℃～122 ℃，灭菌时间30 min～40 min。 6.3.3 接种 将处理后的外植体置于灭菌牛皮纸上进行切割（顶芽8 mm～10 mm，茎段2 mm～3 mm），按1个外植 体∕瓶接种至诱导培养基上。 培养基与培养材料应接触良好， 分布均匀。 接种后盖好容器盖， 标记品种、 人员编号，并填写好生产总单。 6.3.4 培养条件 培养温度26 ℃～28 ℃， 光照强度1 800 lx～3 000 lx，光照时间12 h/d， 空气相对湿度40％～60％。 6.3.5 培养时间 外植体接种后，顶芽培养35 d～42 d形成芽团， 茎段培养56 d～60 d切口部位首先产生愈伤组织， 进而形成芽眼，并分化不定芽团。 7 继代增殖培养 继代接种 按照不定芽团块直径8 mm～10 mm进行切割，切割的团块保证大小均匀，并切除基部的老组织，切 除团块上的根、黄化、老叶及基部褐变、软腐组织，不伤芽。将切割好的团块按照10团/瓶的接种量均 匀地接种至继代培养基上培养。 培养条件 培养温度24 ℃～26 ℃， 光照强度2 100 lx～3 000 lx，光照时间12 h/d， 空气相对湿度40％～65％。 培养周期 继代周期30 d～35 d，参照7.1和7.2。 继代苗质量 叶形叶色正常、无畸形，茎叶无玻璃化。无真菌、细菌污染。继代增殖代数控制在1