ICS 65.020.40 B 64 黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23 DB23/T 2324—2019 2019-03-19发布 2019-04-18实施 黑龙江省市场监督管理局　发 布山杨幼化技术规程 DB23/T 2324—2019 Ⅰ前 言 本标准依据 GB/T 1.1-2009的编写规则起草。 本标准由黑龙江省林业与草原局提出并归口。 本标准由黑龙江省林业科学研究所、黑龙江省森林植物园。 本标准主要起草人 ：卢慧颖、白卉、张妍妍、李静、田新华、谢雷、张建瑛、王艳敏、李正华、张 文达、李京、李长海、黎莉、赵明、于晓杰、于腊梅、黄俊杰、李念森、毛洪波。 DB23/T 2324—2019 1 山杨幼化技术规程 1　范围 本标准规定了山杨（ Populus davidiana ）的根萌幼化技术、组织培养幼化技术及生产档案 。 本标准适用于山杨幼化。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6001　育苗技术规程 LY/T 1000-2013 　容器育苗技术 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 DB23/T 961-2005 　山杨无性繁殖配套生产技术 3　根萌幼化技术 3.1　取材时间与材料选择 每年的春秋两季，植株停止生长之后、萌动前，采 集粗度为 3cm左右山杨树根 。 3.2　储存条件 山杨根应沙藏， 储藏温度为 0 ℃～5 ℃，湿度 60 %，应适时通风 。 3.3　埋根条件 土壤温度稳定在 10 ℃以上时进行埋根。 3.4　根萌基质及消毒 基质宜为草炭土， 厚度 10 cm～15 cm，基质装入规格 50 cm × 30 cm × 20 cm育苗盘后， 用800倍 的40%多菌灵可湿性粉剂喷淋灭菌。 3.5　灭菌处理 将山杨根用多菌灵清洗干净。 3.6　埋根方法 截取长度 15 cm～30 cm根段平放于草炭土表面，然后封土，达到完全覆盖根系即可。 3.7　幼化管理 DB23/T 2324—2019 2 封土后浇足水 ，敷上塑料薄膜 。待根萌苗长到 1 cm～2 cm，撤去塑料薄膜 ，苗期水分管理按照 GB/T 6001规定执行。 3.8　根萌苗移栽与管理 待根萌苗长出新根后，长到 5 cm～10 cm高，截断新根周围的老根，移栽至育苗容器中。容器苗期 栽培管理按照 LY/T 1000―2013中5.5执行。 4　组织培养幼化技术 4.1　外植体选择及保存 外植体应选择无病虫害生长健壮的枝条，采集时间为 每年的 12月至翌年 3月。贮存方式应为低温 封存。低温存放温度 为0℃以下，湿度 50 %～60 %。接种前 10 d～15 d将枝条常温水培，隔日换水， 待休眠芽萌动后，即可接种 。 4.2　诱导方式选择 选取腋芽或叶片诱导胚性愈伤， 待愈伤生成不定芽 1 cm～2 cm进行继代培养， 每25 d～30 d继代 一次，即可保证苗木的幼化。选取腋芽诱导方式，腋芽应培养出丛生芽， 应继代 3次～ 5次。 4.3　外植体消毒 按DB23/ T 961-2005 中5.2规定执行。 4.4　培养配制 按照 LY/T 1882的规定执行。 4.5　培养条件 按DB23/T 961-2005 中5.5规定执行。 4.6　无菌苗接种 4.6.1　叶片诱导不定芽 在超净工作台中 ，将灭菌处理的叶片 ，置于无菌滤纸上吸干水分 ,切成 1 cm2～1.5 cm2 的方形，平铺 于培养基表面，每瓶 3枚～ 5枚。接种培养基为以 NT＋6-BA1.0 mg/L+KT0.3 mg/L的初始诱导培养基。置 于培养室光照培养 10 d～20 d后形成不定芽。 4.6.2　腋芽诱导丛生芽 选取萌动后 2 cm左右的腋芽，在超净工作台中灭菌处理后，置于无菌滤纸上吸干水分 ,腋芽下部插 于培养基内 0.5 cm左右，每瓶 5个～ 8个芽，接种培养基为以 1/2MS为基本培养基，附加激素 6-BA1.0 mg/L的初始诱导培养基，在 10 d～20 d后形成丛生芽。 4.7　继代增殖培养 将丛生芽 ，转移至 1/2MS＋6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L的增殖培养基 。培养30d后，不定芽基部可 平均生长出 4.5个不定芽。 4.8　生根培养和植株再生