ICS 65.020.20 CCS B 05 3709 泰安市 地方标准 DB 3709/T 027—2023 泰山灵芝质量控制技术规范 Technical specification for quality control of Taishan Ganoderma lingzhi 2023 - 10 - 11发布 2023 - 11 - 11实施 泰安市市场监督管理局 发布 DB 3709/T 027 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由泰安市农业农村局提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：泰安市农业科学院、泰安市农业技术推广中心、肥城市现代农业发展服务中心、 岱岳区农业农村局 本文件主要起草人：孔怡、焦娟、兰玉菲、周波、王庆武、丛倩倩、于清伟、马成立、陈乐梅、蒋 永涛、崔晓、王梅、王丽晓、李秀梅、徐慧媛、唐丽娜、许庆国、窦强、张磊、胡凌云、何立宁。 DB 3709/T 027 —2023 1 泰山灵芝质量控制技术规范 1 范围 本文件规定了泰山灵芝（ Taishan Ganoderma lingzhi ）栽培环境条件、菌种制备、定位出芝管理、 病虫害防治、子实体采收、包装及贮运等质量控制技术要求。 本文件适用于人工栽培泰山灵芝的质量控制管理 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 191 包装储运图示标志 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4789.28 食品安全国家标准 食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求 GB 4806.7 食品国家安全标准 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 9683 复合食品包装袋卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 GB 14881 食品安全国家标准 食品生产通用卫生规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 NY/T 5010 无公害农产品 种植业产地环境条件 NY 5099 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 DB37/T 1984 泰山赤灵芝孢子粉采收加工技术规范 DB37/T 4252 灵芝菌种质量要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 泰山灵芝 Taishan Ganoderma lingzhi 又名泰山赤灵芝，源生于泰山，属于泰山独有的赤灵芝品种，为担子菌亚门（ Basidiomycotina ）、 层菌纲（ Hymenomycetes ）、非褶菌目（ Aphyllophorales ）、灵芝菌科（ Ganodermataceae ）、灵芝属 （Ganoderma ）真菌。 4 环境条件 DB 3709/T 027 —2023 2 菌种制备、菌包制作、栽培管理用水 应符合GB 5749的规定，空气质量 应符合GB 3095的规定，土壤 环境应符合NY/T 5010的规定。 5 菌种制备 菌种制备分为母种制备、 原种制备 （分为固体菌种和液体菌种） 和栽培种制备， 菌种制备应符合 NY/T 528和NY/T 1731的要求。 仪器设备 5.1 1000 mL三角烧瓶、玻璃试管 （规格18 mm×180 mm或20 mm×200 mm）、原种瓶、菌种取菌器、天平、 超净工作台、恒温摇床 、液体菌种发酵罐、高压蒸汽灭菌锅等 ，仪器设备等质量应 符合GB 4806.7、NY/T 528的要求。 培养基原辅料 5.2 培养基原辅材料来源要相对固定，应新鲜、 无污染、无虫无螨，农药残留和重金属 应符合NY 5099 的规定。培养基原辅材料实行定点、分类、分区、分批存放，标识明显，每批次抽检。 母种制备 5.3 5.3.1 培养基制备 培养基和试剂应符合 GB 4789.28 要求， 培养基配方选用 马铃薯200 g（去皮煮汁 ）、麦麸40 g（煮汁） 、 蔗糖或葡萄糖 20 g、磷酸二氢钾 3 g、硫酸镁 1.5 g、琼脂20 g、水1 L，pH自然。培养基分装量约为试管 总容积的 1/4～1/5，121℃高压蒸汽灭菌 30 min，待压力自然回零后开锅取出试管，趁热摆放斜面，斜 面顶端距离试管塞 40 mm～50 mm为宜。 5.3.2 接种及培养 待斜面培养基冷却至室温， 无菌条件下挑取边长 3 mm～5 mm的菌种块转接到斜面中部， 塞上试管塞， 置于25℃暗培养 8 d～10 d。待菌丝长满斜面后，选取无杂菌菌落，培养基不干缩、颜色均匀、无暗斑、 无色素，菌丝体洁白浓密、均匀、平整、无角变的斜面作为母种备用，母种质量应符合 NY/T 1742的要 求。 原种制备 5.4 5.4.1 固体菌种制备 5.4.1.1 培养基制备 培养基配方为棉籽壳 72%，阔叶树木屑 15%，麦麸10%，蔗糖1%，石灰1%，石膏1%。木屑提前 2 d预湿， 与其他原料按比例混合拌匀， 含水量控制在 62%~65%左右，堆放 2 h后装入原种瓶（使用容积小于 850 mL 的耐 126℃高温透明玻璃瓶或塑料瓶），培养基上表面距离瓶口 50 mm±5 mm，用封口膜或无棉盖体封住 瓶口，121℃高压蒸汽灭菌 3 h。 5.4.1.2 接种及培养 DB 3709/T 027 —2023 3 原种瓶冷却至室温，无菌条件下，接入边长 1.5 cm～2 cm的母种菌块，置于室温 24℃～26℃，空气 相对湿度 50%～70%的培养室中暗培养 30 d～35 d，使菌丝长满原种瓶。原种制备好以后，要求菌丝体洁 白浓密，生长健旺，无杂菌菌落、无拮抗现象和子实体原基；培养基应紧贴瓶壁，无干缩，无菌皮；闻 气味应有灵芝菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味 。 5.4.2 液体菌种制备 5.4.2.1 培养基配方 培养基配方为葡萄糖 20 g、蛋白胨 3 g、牛肉膏3 g、玉米粉 10 g、酵母膏3 g、磷酸二氢钾 1 g、硫酸 镁0.5 g、消泡剂 0.3 g、水1 L、pH自然。 5.4.2.2 摇瓶液体菌种制备 按上述配方配制培养 基， 装入摇瓶中， 混合均匀， 装液量为摇瓶容量的 60%， 聚丙烯薄膜封口。 121℃ 高压蒸汽灭菌 40 min。培养基冷却至室温，无菌条件下，挑取 5块～6块1 mm2～4 mm2母种块放入摇瓶内， 避光静置 24 h后置于旋转式恒温摇床上，温度 25℃～28℃、140 r/min～160 r/min培养4 d～6 d。摇瓶液 体菌种理化指标应符合 DB37/T 4252的规定。 5.4.2.3 发酵罐液体菌种 制备 无菌环境下，培养液 装液量为发酵罐容量的 70%～80%，接种量为装液量的 0.5%～1%，发酵罐持续通 入无菌空气，维持罐压 0.02 MPa～0.03 MPa，在25℃～28℃条件下培养 6 d～7 d，发酵罐液体菌种质量应 符合DB37/T 4252的要求。 栽培种（袋）制备 5.5 5.5.1 栽培种培养袋制备 使用耐高温的聚丙烯塑料袋， 规格为 17 cm×35 cm作为栽培种料袋。 栽培种培养料配方为棉籽壳 58%， 阔叶树木屑 15%，玉米芯 15%，麦麸10%，石灰1%，石膏1%，含水量控制在 65%左右，制备工艺流程与原种 相同，木屑、玉米芯应提前 2 d预湿。无菌条件下，固体菌种接种量为每袋 12 g～15 g，液体菌种接种量 为每袋15 mL～20 mL。 5.5.2 栽培种（袋）发菌 接种后将栽培种（袋）放在避 光、洁净的培养室或大棚内发菌培养，培养温度 24℃～26℃、空气相 对湿度50%～70%，每天通风 2 h，发菌期间翻袋 2次～3次，检查菌丝生长情况，及时处理污染菌袋。 6 栽培季节 根据泰山灵芝生物学特性，大棚栽培 6月上旬即可安排出芝，一般栽培一 批，在控温设施下 ，可栽 培2批～3批。 7 定位出芝管理 栽培袋摆放 7.1 DB 3709/T 027 —2023 4 将发满菌的栽培袋 整齐横摆在畦埂上，垛间距 70 cm～80 cm，码垛高 6层～8层。 开口 7.2 扎口菌袋， 采用两端开口法，用消毒刀片沿袋口扎绳内侧垂直割下，形成一个直径 2 cm的圆孔，切 口平整；封口菌袋，直接去掉封口物即可。 原基期 7.3 环境温度控制在 23℃～28℃，空气相对湿度 85%～90%，每天通风换气 ，芝棚内散射光照强度 500 Lux～2000 Lux。 人工修整 7.4 栽培袋开口 7 d左右长出原基，用消毒刀片 削掉生长 较弱、着生位置较差的多余原基，每个袋口只 留一个健