ICS67.050 CCSX04 GDFS 广东省林学会团体标准 T/GDFS15—2022 五指毛桃质量检测技术规程 CodeofpracticeonFicushirtaVahl.qualitydetermination （发布稿） 2022-06-06发布 2022-06-06实施 广东省林学会  发布 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由广东省林学会团体标准化技术委员会提出并归口。 本文件起草单位：广东省林业科学研究院、河源市金源绿色生命有限公司。 本文件主要起草人：徐巧林、王颂、曾雷、王志宏、陈颖乐、黄文妍、余玉娟、黄俊彬、陈楚镇。 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 1五指毛桃质量检测技术规程 1范围 本文件规定了五指毛桃(FicushirtaVahl.)检测指标、检测方法等技术要求。 本文件适用于五指毛桃的质量检测。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 广东省中药材标准第一册2004版五指毛桃 《中华人民共和国药典（2020版）》附录薄层色谱法 《中华人民共和国药典（2020版）》附录高效液相色谱法 《中华人民共和国药典（2020版）》附录水分测定法 《中华人民共和国药典（2020版）》附录灰分测定法 《中华人民共和国药典（2020版）》附录浸出物测定法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 五指毛桃FicushirtaVahl. 桑科（Moraceae）榕属（Ficus）粗叶榕（FicushirtaVahl.）植物干燥的根，主要产地为广东、 广西、云南、贵州、海南等地。 3.2 补骨脂素psoralen 五指毛桃一种药性成分，分子式：C11H6O3，分子量为186.16。 3.3 佛手柑内酯bergapten 五指毛桃一种药性成分，分子式：C12H8O4，分子量为216.19。 4检测指标 4.1外观指标 4.1.1颜色 表面呈灰黄色或或黄棕色，有红棕色斑纹及明显纵皱纹。无霉变现象。 4.1.2气味 气微香特异，味微甘。 4.1.3形状 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 2呈圆柱形，有分枝，常切成短段或块片，段长2cm～12cm，直径0.5cm～4.0cm，或片厚0.5cm～ 1.0cm。 4.1.4质地 质坚硬，不易折断。断面皮部薄而韧，易剥离，富含纤维；木部宽广，淡黄白色，可见细密的同心 环纹。如图1所示。 图1五指毛桃形态特征 4.2理化指标 五指毛桃理化指标见表1。 表1五指毛桃理化指标 项目 指标 水分 含水率（%） 总灰分 总灰分的含量（%） 酸不溶性灰分 酸不溶性灰分的含量（%） 醇溶性浸出物 醇溶性浸出物的含量（%） 主要特征成分TLC法：荧光斑点 HPLC法：保留时间、峰面积 5检测方法 5.1外观检测 取五指毛桃样品，目测外观和形状，用毫米刻度尺分别测量主根、直径或切片的尺寸，断开后观察 断面颜色与质地，鼻闻气味，口尝味道。 5.2理化检测 5.2.1水分 执行《中国药典》2020年版附录水分测定法规定的第一法测定。 5.2.2总灰分 执行《中国药典》2020年版附录灰分测定法规定的总灰分测定法测定。 5.2.3酸不溶性灰分 执行《中国药典》2020年版附录灰分测定法规定的酸不溶性灰分测定法测定。 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 35.2.4醇溶性浸出物 执行《中国药典》2020年版附录浸出物测定法规定的醇溶性浸出物测定法的热浸法测定，以95% 乙醇作为溶剂。 5.2.5主要特征成分 5.2.5.1TLC法 取本品粉末1.0g，加入乙醚40.0mL，在功率100W、频率40kHz超声条件下处理30分钟，过滤， 滤液经水浴氮吹仪吹干，加入1.0mL甲醇使其溶解，作为供试品溶液。另取五指毛桃对照品1.0g，同 法制成对照品溶液。参照《中华人民共和国药典》（2020年版）附录—薄层色谱法，吸取上述两种溶液 各2.0μL，分别落点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶5∶0.7）为 展开剂进行展开，取出并晾干，置于紫外灯下(365nm)检视，再喷以10%硫酸乙醇溶液，置于105℃加 热至斑点显色清晰。供试品的薄层色谱，在与对照品色谱相应位置上，显示相同颜色的荧光斑点。结果 图片见附件图A.1。 5.2.5.2HPLC法 5.2.5.2.1色谱参考条件 Poroshell120EC-C18柱（4.6×150mm，4μm）色谱柱；流动相为水（A）-甲醇（B），梯度洗脱： 流动相比例见表1；流速1.0mL/min；进样量10μL，柱温35℃，检测波长补骨脂素（245nm）、佛手 柑内酯（268nm）。混合标准品HPLC图见图B.1。 表2梯度洗脱时间表 时间（min） A（水） B（甲醇） 0:00 50 50 5:00 40 60 10:00 40 60 10:01 0 100 20:00 0 100 5.2.5.2.2标准品溶液制备 分别取补骨脂素、佛手柑内酯标准品适量，精密称定，置于10mL容量瓶中，加入适量甲醇，功率 100W，频率40kHz下超声使其溶解，冷却至室温，加入甲醇定容，摇匀，配制成补骨脂素质量浓度为 250μg/mL、佛手柑内酯为100μg/mL的混合标准品溶液，即得。 5.2.5.2.3五指毛桃供试品溶液制备 精密称定五指毛桃药材粗粉（过65目筛）0.5g，置于50mL具塞锥形瓶中，加入10.0mL甲醇， 称定质量，功率100W，频率40kHz下超声提取30min，冷却至室温后用甲醇补足所失质量，摇匀，经 0.22μm微孔滤膜滤过，取滤液作为供试品溶液，进样体积为10μL。五指毛桃药材HPLC图见图C.1。 5.2.5.2.4标准曲线绘制 取5.2.5.2.2制备的对照品储备液适量，用甲醇稀释后得到一系列不同质量浓度的混合标准品溶液， 按5.2.5.2.1色谱条件测定峰面积，以峰面积（Y）为纵坐标，以质量浓度（X）为横坐标绘制标准曲线， 分别得标准品回归方程及线性范围，补骨脂素Y＝14.0112X+4.7866，r为0.9999，线性范围0.025μg/mL～ 250.0μg/mL；佛手柑内酯Y＝44.8449X+2.5502，r为0.9998，线性范围0.01μg/mL～100.0μg/mL。 5.2.5.2.5样品测定 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 4分别取五指毛桃粗粉，按5.2.5.2.3的方法平行制备3份供试品溶液，按5.2.5.2.1的色谱条件进行 测定，利用5.2.5.2.4方法建立的标准曲线，计算五指毛桃药材中补骨脂素、佛手柑内酯的量。 6建档 建立五指毛桃质量检测技术与管理档案，包括检测材料外观照片、仪器设备、实验试剂和标准品信 息、人员、色谱条件、原始记录数据等，以纸质和电子文档形式保存。 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 5AA 附录A （资料性） 五指毛桃药材薄层层析色谱图 A-紫外灯（365nm） B-10%硫酸乙醇显色 b为补骨脂素标准品 f为佛手柑内酯标准品 1～8为五指毛桃药材，其中6号为对照品 图A.1五指毛桃药材TLC图 全国团体标准信息平台 T/GDFS15—2022 6BB 附录B （资料性） 补骨脂素、佛手柑内酯标准品HPLC分析图 图B.1补骨脂素、佛手柑内酯标准品HPLC图 全国团体标准信息平台