ICS 65.020.01 CCS B 16 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 3036—2023 向日葵抗黑茎病 水平室内鉴定技术规程 Technical code of practice for indoor identification of sunflower resistance to sunflower black stem 2023-05-11发布 2023-06-11实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 3036 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。 本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（ SAM/TC 20 ）归口。 本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业技术推广中心、内蒙古自治区农牧业科学 院、内蒙古自治区农业标准化技术委员会。 本文件主要起草人： 张键、融晓君、张之为、张文兵、贾瑞芳、田晓燕、萨其仍贵、吕明举、张智 芳、赵素梅、王颖、高红宇、仇凯、孔祥久、曹春玲、邬雪瑞、张丽艳。 DB15/T 3036 —2023 1 向日葵抗黑茎病水平室内鉴定技术 规程 1 范围 本文件规定了室内向日葵黑茎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。 本文件适用于室内抗向日葵黑茎病品种水平鉴定。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引 用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 向日葵黑茎病 black stem of sunflower 由黑茎病菌（ Phoma macdonaldii ） 引起的向日葵真菌病害。 注： 向日葵黑斑病症状见附录 A。 4 病原菌制备 菌株选择 接种菌株选用当地向日葵主栽区发病株上分离到的优势病原菌（ Phoma macdonaldii ）菌株。 培养基 PDA培养基。 病原菌培养 将保存在甘油中的黑茎病菌菌丝体接种在 PDA平板上，置于 20 ℃培养箱中培养。待菌落形成后，在 菌落边缘打取直径为 4 mm菌丝块，接于新的 PDA培养基中央进行活化培养。待菌落长到培养皿直径的 80% 时，打取菌落边缘的菌丝块用于接种。 5 向日葵黑茎病抗性鉴定 对照品种 以向日葵品种 LD5009等感病品种作为对照品种。 DB15/T 3036 —2023 2 向日葵种植 将向日葵种子播种在装有无菌土 13 cm×13 cm的营养钵中，每个品种播种 5钵，每钵播种 5粒，25 ℃ ±2 ℃，16 h光照/8 h黑暗条件下培养，待向日葵有 4片真叶时开始进行茎杆接种。 接种方法 幼苗4片真叶时，在幼茎离地 5 cm处，用牙签划一伤口，取黑茎病菌菌落边缘菌块（约 0.5 cm）覆 盖于伤口， 用保鲜膜缠绕接种处保湿， 每个品种接种 20株， 以接种 PDA培养基的作为对照。 25 ℃±2 ℃， 16 h光照/8 h黑暗条件下培养， 接种后第 15 d测量茎秆上病斑长度。 向日葵品种对黑茎病抗性的鉴定 标准 基于被鉴定品种病斑长度， 按照以下公式计算相对抗性指数， 以相对抗性指数评定品种的抗性级别， 抗性划分标准见表 1。 K=Ly-Lck X=1-K 式中： K ——相对抗性指数； Ly ——鉴定品种平均病斑长度； Lck——对照品种平均病斑长度； X ——相对抗性指数。 表1 向日葵品种抗黑斑病级别的划分标准 抗病型 相对抗性指数 免疫（I） X = 1 高抗（HR） 0.8≤ X＜1 中抗（MR） 0.4≤ X ＜0.8 中感（MS） 0.2≤ X ＜0.4 高感（HS） X ＜0.2