ICS 65.020.20 CCS B 30 41 河南省 地方标准 DB41/T 2392—2023 小麦抗茎基腐病评价技术规范 2023 - 03 - 07发布 2023 - 06 - 06实施 河南省市场监督管理局 发布 DB41/T 2392 —2023 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 病原物接种体 ................................ ................................ ....... 2 5 鉴定方法 ................................ ................................ ........... 2 6 病害调查 ................................ ................................ ........... 2 7 抗性评价 ................................ ................................ ........... 3 附录A（资料性） 小麦茎基腐病病原物的分离和鉴定 ................................ ....... 5 DB41/T 2392 —2023 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由 河南省农业农村厅 提出并归口。 本文件起草单位： 河南省农业科学院植物保护研究所，河南省植物保护检疫站 。 本文件主要起草人： 徐飞、张国彦、宋玉立、 杨共强、冯超红、王俊美、 张少伟、 白磊、金建猛 、 李世民、林艳丽、 石丽芬、刘娟娟、石瑞杰、韩自行。 DB41/T 2392 —2023 1 小麦抗茎基腐病评价技术规范 1 范围 本文件规定了 小麦茎基腐病接种体制备、 接种方法、病害调查及 抗性评价的技术 规范。 本文件适用于普通小麦 、野生小麦 和小麦近缘种等。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 小麦茎基腐病 主要由假禾谷镰孢（ Fusarium pseudograminearum ）、禾谷镰孢（ F. graminearum ）和黄色镰孢（ F. culmorum ）引起（我国黄淮海麦区优势病原菌为假禾谷镰孢） 。病菌侵染后，苗期发病叶鞘变褐，分蘖 减少，植株矮弱，成株期发病 茎基部1～3节变褐， 严重时形成枯白穗 。 3.2 接种体 通过人工培养能够 侵染寄主植物 引起病害的病原培养物 。 3.3 病情指数 衡量发病率与严重度的综合指标。 计算公式（ 1）：    n iin ii i SX SX DI 0max 0100) (/) ( .................. （1） 式中： DI ——病情指数； i ——病级数（ 0～n）； Xi ——i级的单元数； Si ——i级严重度的代表值； Smax ——严重度的最高级值。 3.4 相对病情指数 鉴定品种与对照品种病情指数的比值 。计算公式（2）： RDI = DIiv/DIcv .......................... （2） 式中： RDI ——相对病情指数； DB41/T 2392 —2023 2 DIcv ——对照品种（Control varieties ）的病情指数 ； DIiv ——鉴定品种（ Identification varieties ）的病情指数 。 4 病原物接种体 病原物的获取 4.1 组织分离得到的病原物， 经形态学和分子生物学 鉴定为假禾谷镰孢，进行致病力测定后选择强致病 力菌株。 也可选择保存于中国普通 微生物菌种保 藏管理中心 的假禾谷镰孢强致病力标准菌株 14LY24-2 或WZ-8A（保藏编号 分别为CGMCC3.20319 和ACCC 38068 ）作为接种体 培养的病原菌 。 分生孢子悬浮液的制备 4.2 将接种菌株活化后，在 PDA培养基平板上 25 ℃培养7 d，用直径为 0.5 cm打孔器把菌块均匀打碎后， 挑入4% 绿豆汤培养基中， 密封， 转入在 25 ℃振荡培养 72 h后， 过滤掉残渣， 吸取菌液到血球计数板上， 测定分生孢子悬浮液浓度，然后将浓度调节成 每毫升1×106个孢子的悬浮菌液 。 谷粒接种体的制备 4.3 将麦粒或粟粒浸泡12 h后，装入到 三角瓶或 聚乙烯塑料袋中， 放入灭菌锅 121 ℃灭菌60 min，放置 2 d后，再次灭菌 30 min， 冷却后使用。 将PDA平板上25 ℃条件下培养 3 d菌丝块均匀接入谷粒上。1周后， 在超净工作台中混合均匀， 2个星期后待菌丝布满整个 谷粒时，在通风背光处晾干备用 。 5 鉴定方法 苗期鉴定 5.1 苗期鉴定可采用 滴注法或菌土法 。滴注法 ：将直径为 7cm的塑料营养钵 装入灭菌土（沙子：蛭石： 大田土 = 1 : 1 : 1 均匀混合并 121 ℃灭菌1 h），浇水备用。将小麦种子催芽露白后种于营养钵中， 覆盖1 cm灭菌土，每个品种 4钵，每钵 10粒。出苗约 10 d后，使用移液器吸取 10 μL浓度为每毫升1×106 个的孢子悬浮液，在距离土壤表面约 0.5 cm的幼苗茎基部 滴上菌液。 菌土法：将粟粒接种体和灭菌土按 0.5%的比例混合制成菌土，待播种后覆盖 2 cm菌土。接种后将幼苗放置在温度为 25 ℃、湿度 90%培养箱 中，黑暗培养 48 h后，再转入温度 25 ℃、光照 12 h、湿度90%人工气候 箱或温室中正常管理 。 田间鉴定 5.2 鉴定圃应设置在人工营造的病圃或病害常发 田，具备利于发病的环境条件，地势平坦 和地力均匀 的 地块。鉴定圃不施用任何杀菌剂 。病圃内每个品种 6行，行长1.5 m～2.0 m，行距0.20 m～0.25 m。每20 个品种种植一组 高感对照品种。 重复3次。接种方法 ：播种后 覆2 cm的土，撒上谷粒接种体（种子与谷 粒接种体 质量比1:1方式接种 ），最后覆土（约 1 cm）压实。 6 病害调查 苗期调查方法 6.1 接菌30 d～35 d后将麦苗轻轻拔出，冲洗干净， 调查病级（表1），计算病情指数 。 DB41/T 2392 —2023 3 表1 小麦茎基腐病苗期严重度 分级及症状描述 严重度分级 症状 0 植株无病变 1 植株胚芽鞘或第 1叶鞘明显褐 变 3 植株第1叶鞘褐变且第1叶鞘下的根冠部分褐 变 5 植株第2叶鞘有明显褐 变且第2叶鞘下的根冠完全褐 变 7 植株第3叶鞘有明显褐 变且第3叶鞘下的根冠完全褐 变 9 整株枯死 成株期调查方法 6.2 在小麦乳熟至蜡熟期充分发病 后进行调查 。每个重复 5点取样，每点查 20茎，剥去叶鞘调查记载病 级（表2），计算病情指数和相对病情指数 。 表2 小麦茎基腐病 成株期严重度分级及症状描述 严重度分级 症状 0 茎基部无病变 1 茎基部褐变至第1节 2 茎基部褐变至第2节 3 茎基部褐变至第3节 4 茎基部褐变至第3节以上但未形成枯白穗 5 枯白穗或因病 未抽穗 7 抗性评价 鉴定有效性的判断 7.1 当高感对 照品种达到 相应的感病程度：苗期 病情指数 >45，成株期病情 指数 >30，该批次鉴定 视为 有效。建议使用 ‘矮抗58’或‘国麦301’为高感对照品种 。 抗性评价标准 7.2 7.2.1 苗期抗性鉴定标准 小麦茎基腐病 苗期抗病类型划分为 5个级别（表3）。 表3 小麦苗期茎基腐病抗 性评价标准 病情指数 抗性评价 DI=0 免疫 Immune (I) 0＜DI≤25 高抗 Highly Resistant ( HR) DB41/T 2392 —2023 4 表3 小麦苗期茎基腐病抗性评价标准 （续） 病情指数 抗性评价 25＜DI≤35 中抗 Moderately resistant (MR) 35＜DI≤45 中感Moderately Susceptible ( MS) DI＞45 高感 Highly susceptible (HS