SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3566—2013 滤膜抽滤核酸提取方法 Nucleic acid extraction method based on membrane filtration 行业标准信息服务平台 2013-03-01发布 2013-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3566—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：祁军、王馨、左锋、刘振宇、柴宏森、张霞、詹曦菁、魏永新、李智慧、尤其敏、胡林、 崔景柏。 行业标准信息服务平台 SN/T3566—2013 滤膜抽滤核酸提取方法 1范围 本标准规定了滤膜法核酸快速提取技术的操作方法。 本标准适用于检验检疫机构对病原体核酸的提取。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T2102.3食源性病原体PCR检测技术规范第3部分：定性检测方法样品制备要求 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid) RNA：核糖核酸（ribonucleicacid) EDTA:乙二胺四乙酸(eathylenediaminetetraacetic acid) Tris-HCl：三羟甲基氨基甲烷盐酸盐（trishydrochloride） 标准信息服 DEPC：焦碳酸二乙酯（diethypyrocarbonate） RNase：核糖核酸水解酶 RNasin：核糖核酸酶抑制剂 4生物安全措施 为了保护实验室人员的安全，按照GB19489中的有关规定，应由具备相关资格的工作人员进行实 验操作。所有废弃物也应按照GB19489中的有关规定执行。 5方法原理 滤膜法核酸快速提取技术提供厂一种从各种生物样本中快速提取核酸的方法。滤膜抽滤核酸提取 装置是利用滤膜可以特异性吸附核酸（DNA/RNA)的特点，在样品进行裂解后，利用装置对生物样品进 行过滤、吸附、清洗及洗脱，一次性提取核酸。本标准通过溶液的离子浓度和pH值来控制滤膜抽滤核 酸提取装置吸附和洗脱核酸的效率。 本方法适用于食品、食品接触面（包括人员手、设备、器具等食品直接接触表面）和生物样品中病原 体核酸（DNA/RNA)的提取。在提取DNA/RNA时，滤膜抽滤核酸提取装置通用，但在提取RNA时， 使用的耗材和洗脱液需要经过特别处理，以消除或减少RNA酶对RNA的降解。由于对于可疑人境人 1