ICS 65.020 CCS B 05 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 3382—2022 水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定技 术规程 Technical code of practice for identification of saline-sodic tolerance at germination period and seedling stage in rice 2022 - 06 - 23 发布 吉林省市场监督管理厅 2022 - 07 - 23 实施 发 布 DB22/T 3382—2022 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文由吉林省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：吉林省农业科学院。 本文件主要起草人：朴日花、张强、严永峰、赵亚东、金永梅、马艳、王金明、金京花、孟凡梅、 陈莫军、唐铭浩、付胜。 I DB22/T 3382—2022 水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定技术规程 1 范围 本文件确立了水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定技术的程序，规定了鉴定前准备、鉴定与评价、 等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。 本文件适用于水稻品种及品系的发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 发芽势 germination potential 在 3 d 内正常发芽籽粒数占供检籽粒数的百分比。 3.2 发芽率 germination rate 在 7 d 内正常发芽籽粒数占供检籽粒数的百分比。 3.3 耐苏打盐碱性 saline-sodic tolerance 在一定浓度盐类和 pH 值范围内忍受和抵抗苏打盐碱胁迫的能力。 4 水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定程序构成 水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定流程包括 3 个阶段，如图 1 所示。 图1 5 水稻发芽期和幼苗期耐苏打盐碱性鉴定流程图 鉴定前准备 1 DB22/T 3382—2022 5.1 试剂、材料及设备 3% 次氯酸钠溶液、Na2CO3 分析纯、滤纸、培养皿、pH 计、光照培养箱。 5.2 种子处理 5.2.1 5.2.2 a) b) 6 将种子置于 45 ℃ 恒温箱处理 48 h 打破休眠。 种子消毒按如下要求进行： 发芽期，随机挑选饱满种子 100 粒，用 3% 次氯酸钠溶液消毒 20 min，自来水冲洗 3 次； 幼苗期，随机挑选饱满种子 50 粒，用 3% 次氯酸钠溶液消毒 20 min，自来水冲洗 3 次。 鉴定与评价 6.1 发芽期 6.1.1 鉴定步骤 6.1.1.1 将消毒过种子分别均匀置于垫好滤纸的对照组和盐碱处理组培养皿中。 6.1.1.2 对照组培养皿加入 10 ml 去离子水，盐碱处理组培养皿里加入 10 ml 40 mM Na2CO3（pH9.8） 溶液浸泡，两组培养皿加盖后放入 30 ℃ 恒温箱中催芽。 6.1.1.3 对照组和盐碱处理组分别每天更换等体积去离子水和 40 mM Na2CO3（pH9.8）溶液 1 次。 6.1.1.4 以芽长达到种子长度的一半为发芽标准，分别计算对照组和盐碱处理组第 3 d 的发芽势和第 7 d 发芽率。 6.1.1.5 对照组和盐碱处理组均设 3 次重复，以平均值作为统计单元。 6.1.2 评价指标 以发芽期综合相对盐碱害率（CRADRge: combined of relative alkali damage rate at germination period）作为发芽期耐苏打盐碱评价标准： a) 发芽期综合相对盐碱害率（%）应按照公式(1)计算： CRADRge%   RADRgp  RADRgr ················································· (1) 2 式中：  CRADRge--发芽期综合相对盐碱害率（%）； RADRgp--发芽势相对盐碱害率(%)； RADRgr--发芽率相对盐碱害率(%)。 b) 发芽势相对盐碱害率（%）应按照公式(2)计算： RADRgp%   GPc  GPt  100 ······················································ (2) GPc 式中：  RADRgp-发芽势相对盐碱害率(%)； GPc-对照发芽势； GPt-处理发芽势。 c) 发芽率相对盐碱害率（%）应按照公式(3)计算： RADRgr %   2 GRc  GRt  100 ······················································ (3) GRc DB22/T 3382—2022 式中：  RADRgr-发芽率相对盐碱害率(%)； GRc-对照发芽率； GRt-处理发芽率。 6.1.3 评价标准 以发芽期综合相对盐碱害率作为评价指标，将发芽期耐苏打盐碱性分 1、3、5、7、9 级评价。评 价指标见表 1。 表1 级别 发芽期耐苏打盐碱性评价标准 发芽期综合相对碱害率 耐苏打盐碱性 % 6.2 1 RADRge≤20 极强 3 20＜RADRge≤40 强 5 40＜RADRge≤60 中 7 60＜RADRge≤80 弱 9 80＜RADRge≤100 极弱 幼苗期 6.2.1 鉴定步骤 6.2.1.1 将消毒过种子分别均匀置于垫好滤纸的对照组和盐碱处理组培养皿中。 6.2.1.2 对照组培养皿加入 10 ml 去离子水，盐碱处理组培养皿里加入 10 ml 20 mM Na2CO3（pH 8.9） 溶液浸泡，分别加盖后放入 30 ℃ 恒温箱中催芽 3 d，弃掉未发芽种子。 6.2.1.3 将装有发芽种子培养皿放置于阳光充足、温度为 25 ℃～30 ℃ 的环境处理 3 d。 6.2.1.4 对照组和盐碱处理组分别每天更换等体积去离子水和 20 mM Na2CO3（pH8.9）溶液 1 次。 6.2.1.5 处理完毕后随机选取 10 株，分别测量对照和盐碱处理组的根长、根数和苗高，以平均值作 为统计单元。 6.2.1.6 对照组和盐碱处理组均设 3 次重复。 6.2.2 评价指标 以幼苗期综合相对盐碱害率(CRADRss:combined of relative alkali damage rate at seedling stage)作为幼苗期耐苏打盐碱评价标准： a) 幼苗期综合相对盐碱害率（%）应按照公式(4)计算： CRADRss%   RADRrn  RADRrl  RADRsh ········································· (4) 3 式中：  CRADRss--幼苗期综合相对盐碱害率（%）； RADRrn--根数相对盐碱害率（%）； RADRrl--根长相对盐碱害率（%）； RADRsh--苗高相对盐碱害率（%）。 b) 根数相对盐碱害率（%）应按照公式(5)计算： 3 DB22/T 3382—2022 RADRrn(%)  RNc  RNt 100 ······················································ (5) RNc 式中：  RADRrn--根数相对盐碱害率（%）； RNc--对照根数； RNt--处理根数。 c) 根长相对盐碱害率（%）应按照公式(6)计算： RADRrl (%)  RLc  RLt 100 ······················································· (6) RLc 式中：  RADRrl--根数相对盐碱害率(%)； RLc--对照根数； RLt--处理根数。 d) 苗高相对盐碱害率（%）应按照公式(7)计算： RADRsh(%)  SHc  SHt  100 ······················································ (7) SHc 式中：  RADRsh=根数相对盐碱害率(%)； SHc=对照苗高； SHt=处理苗高。 6.2.3 评价标准 以幼苗期综合相对盐碱害率作为评价指标，将幼苗期耐苏打盐碱性分 1、3、5、7、9 级评价。评 价指标见表 2。 表2 级别 幼苗期耐苏打盐碱性评价标准 幼苗期综合相对碱害率 耐苏打盐碱性 % 7 1 CRADRss≤20 极强 3 20＜CRADRss≤40 强 5 40＜CRADRss≤60 中 7 60＜CRADRss≤80 弱 9 80＜CRADRss≤100 极弱 记录与档案 应对操作过程及时记录，并做到可追溯。并应及时存档，档案至少保存 2 年。 _________________________________ 4