ICS 67.250 C 53 GP 中华人民共和国国家标准 GB/T 23296.16—2009 食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中2,2-二（4-羟基苯基） 丙烷（双酚A)的测定 高效液相色谱法 Food contact materialsPolymer- Determination of 2,2-bis (4-hydroxyphenyl) propane (bisphenol A) in food simulants-High performance liquid chromatography 2009-03-31发布 2009-09-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T23296.16—2009 前言 本标准参照欧盟技术规范CEN/TS13130-13：2005《食品接触材料及其制品 塑料中受限物 质第13部分：食品模拟物中2,2-二（4-羟基苯基）丙烷（双酚A）的测定》（英文版）制定 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出 本标准由全国进出口食品安全检测标准化技术委员会（SAC/TC445）归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共 和国湖北出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检疫局 本标准主要起草人：陈志锋、孙忠松、孙利、崔海容、李波平、周明辉、李全忠 GB/T23296.16—2009 食品接触材料高分子材料 食品模拟物中2，2-二（4-羟基苯基） 丙烷（双酚A）的测定高效液相色谱法 1范围 本标准规定了食品模拟物中双酚A的测定方法 双酚A含量的测定 限为0.03mg/L,橄榄油中双酚A的测定低限为0.3mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682一2008，ISO3696：1987，MOD） GB/T23296.1一2009食品接触材料塑料中受限物质塑料中物质向食品及食品模拟物特定 迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南 3原理 食品模拟物中的双酚A通过高效液相色谱柱进行分离，采用荧光检测器进行检测。水基食品模拟 物直接进样，橄榄油模拟物通过甲醇溶液萃取后进样。采用外标法定量 4试剂和材料 除另有规定外，水为GB/T6682规定的一级水，试剂均为分析纯 4.1双酚A(C15H16O2，CAS号：80-05-7）：纯度大于99%。 4.2冰乙酸。 4.3无水乙醇。 SZAC 4.4精制橄榄油。 4.5正已烷：色谱纯。 4.6甲醇：色谱纯。 4.73%（质量浓度）乙酸溶液：称取30g（精确至0.1g）冰乙酸（4.2）于1L容量瓶中，用水定容 4.810%（体积分数）乙醇溶液：量取100mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，用水定容。 4.9甲醇-水混合液（1十1）：量取100mL甲醇（4.6）和100mL水，混匀。 4.10双酚A储备液（375mg/L）：准确称取37.5mg双酚A（精确至0.1mg）（4.1)至100mL容量瓶 稳定。 4.11双酚A标准中间液（37.5mg/L）：取10mL双酚A储备液（4.10）于100mL容量瓶中，用甲醇 （4.6）定容。 1 GB/T23296.16—2009 5仪器与设备 5.1高效液相色谱仪：配置荧光检测器。 5.2涡旋振荡器。 5.3微量注射器：10μL、50μL、1000μL 5.4具塞试管：10mL。 5.5分析天平：感量0.0001g、0.01g。 6试液的制备 6.1标准工作溶液的制备 6.1.1水基食品模拟物标准工作溶液 用微量注射器分别准确量取0μL、20μL、40μL、100uL、200uL、500μL双酚A标准中间液 （4.11)于6个25mL容量瓶中，用水定容，得到水中双酚A浓度分别为0.00mg/L、0.03mg/L、 0.06mg/L、0.15mg/L、0.30mg/L、0.75mg/L的标准工作液。采用同样方式，分别用3%（质量浓度） 6.1.2橄榄油标准工作溶液 分别准确称取1g（精确至0.01g）橄榄油至6个具塞试管中，用微量注射器分别移取0μL、8μL、 再加人3mL正已烷（4.5），混匀，加入2ml甲醇-水混合液（4.9），涡旋振荡2min，静置分层。用注射 器吸取下层水溶液，通过0.2um滤膜过滤后供高效液相色谱进样。 6.2食品模拟物试液的制备 6.2.1总则 食品模拟物试液应按照GB/T23296.1一2009的要求从迁移试验中获取，在4℃冰箱中避光保存。 6.2.2水基食品模拟物 准确量取迁移试验中得到的水基食品模拟物约1mL，通过0.2um滤膜过滤后供高效液相色谱进 样。平行制样两份。 6.2.3橄榄油 准确称取迁移试验中得到的橄榄油模拟物1g土0.01g于试管中，加入3mL正已烷（4.5），充分 混合，加人2mL甲醇-水混合液（4.9），涡旋振荡2min，静置分层。用移液器吸取下层水溶液，通过 0.2um滤膜过滤后供高效液相色谱进样。平行制样两份。 6.3空白试液的制备 按照6.2的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物。 7测定 7.1测定条件 a){ 色谱柱：Cis柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒度5μm，或性能类似的分析柱； b) 流动相：甲醇-水（70+30）； c) 流速：1mL/min; d) 柱温：室温； e） 荧光检测器：激发波长227nm，发射波长313nm。 2 GB/T 23296.16—2009 7.2绘制标准工作曲线 按照7.1所列测定条件，对标准工作溶液（6.1）进行检测。以食品模拟物标准工作曲线中双酚A 浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性方程。标准溶液色谱图参见附 录A。 按式(1)计算回归参数： y=axr+b ...(1) 式中: y一食品模拟物标准工作溶液中双酚A的峰面积； 回归曲线的斜率； 食品模拟物标准工作溶液中双酚A浓度，单位为毫克每升或毫克每千克（mg/L或mg/kg）； r 一回归曲线的截距。 7.3试液测定 8结果计算 8.1食品模拟物试液中双酚A浓度的计算 食物模拟物试液中双酚A的浓度c按式（2)计算。 C=-6 .(2) a 式中： 食品模拟物试液中双酚A的浓度，单位为毫克每升或毫克每千克（mg/L或mg/kg）； y——食品模拟物试液中双酚A的峰面积； b—一回归曲线的截距； 回归曲线的斜率。 8.2双酚A特定迁移量的转化计算 由8.1得到的食品模拟物试液中双酚A浓度，根据迁移试验中所使用的食品模拟物的体积和测试 试样与食品模拟物接触面积，通过数学换算计算出双酚A的特定迁移量，单位以"mg/kg或mg/dm²” 表示。详见GB/T23296.1—2009的第13章， 计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留两位有效数字。 重复性 SZIC 9 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 3