书书书犐 犆 犛６ ７．０ ５ ０犆５ ３ 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜０ ４ ９ １—２ ０ １ ９ 代替Ｓ Ｎ／Ｔ０ ４ ９ １—１ ９ ９ ５ 出口植物源食品中苯氟磺胺残留量检测方法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犮 犺 犾 狅 犳 犾 狌 犪 狀 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 狉 犻犵犻 狀 犲 犱犳 狉 狅 犿 狆犾 犪 狀 狋 犳 狅 狉犲 狓 狆狅 狉 狋 ２ ０ １ ９１ ０２ ５发布 ２ ０ ２ ００ ５０ １实施 中华人民共和国海关总署 发 布书书书前　　言 　　本标准是按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９的要求进行编写 。本标准替代了 Ｓ Ｎ０ ４ ９ １ —１ ９ ９ ５《出口粮谷中抑菌灵残留量检验方法 》本标准与 Ｓ Ｎ０ ４ ９ １ —１ ９ ９ ５相比，主要技术变化如下 ： — — —本标准增加了大米 、小麦、大豆、玉米、梨、葡萄、番茄、黄瓜、马铃薯、蘑菇、干辣椒检验样品基质； — — —增加了气相色谱 质谱确证部分 ； — — —删除了抽样部分 ； — — —优化了前处理方法 ；请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口 。本标准起草单位 ：中华人民共和国石家庄海关本标准主要起草人 ：李玮、王敬、艾连峰、马育松、陈瑞春、郭春海、张海超本标准所代替标准的历次版本发布情况为 ： — — —Ｓ Ｎ０ ４ ９ １ —１ ９ ９ ５。 Ⅰ犛 犖／犜０ ４ ９ １—２ ０ １ ９出口植物源食品中苯氟磺胺残留量检测方法 １　范围 本标准规定了出口植物源食品中苯氟磺胺残留量的气相色谱检测方法和气相色谱 质谱确证方法 。本标准适用于大米 、小麦、大豆、玉米、糙米、梨、葡萄、马铃薯、番茄、黄瓜、蘑菇和干辣椒中苯氟磺胺残留量的测定 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　方法提要 样品中的分析物用乙腈提取 ，提取液浓缩后经硅胶固相萃取柱净化后 ，供气相色谱测定及气相色 谱质谱确证 ，外标法定量 。 ４　试剂和材料 除另有规定外 ，试剂均为分析纯 ，水为Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的一级水 。 ４．１　乙腈，高效液相色谱纯 。 ４．２　正己烷，高效液相色谱纯 。 ４．３　乙醚。 ４．４　丙酮，高效液相色谱纯 。 ４．５　无水硫酸钠 ：６ ５ ０℃烘烤４ｈ，在干燥器内冷却至室温 ，贮于密封瓶中备用 。 ４．６　正己烷乙醚（３＋４ ７，Ｖ／Ｖ） ：取３ ０ｍＬ正己烷（４． ２）和４ ７ ０ｍＬ 乙醚（４． ３） ，混合均匀 。 ４．７　正己烷乙醚（１＋１，Ｖ／Ｖ） ：取１ ０ ０ｍＬ 正己烷（４． ２）和１ ０ ０ｍＬ 乙醚（４． ３） ，混合均匀 。 ４．８　标准品：苯氟磺胺 （ｄ ｉ ｃ ｈ ｌ ｏ ｆ ｌ ｕ ａ ｎ ｉ ｄ ，Ｃ９Ｈ１ １Ｃ ｌ２Ｆ Ｎ２Ｏ２Ｓ２，ＣＡ ＳＮＯ． １ ０ ８ ５  ９ ８  ９ ） ，纯度大于等于 ９ ９％。 ４．９　标准储备液 ：精确称取适量标准品 （４． ８） ，用丙酮（４． ４）配制成１． ０ｍｇ／ｍＬ的标准储备液 ，４℃下避光保存，保存期为 １年。 ４．１ ０　标准中间工作液 ：取标准储备液 （４． ９）１． ０ ０ｍＬ 至１ ０ ０ｍＬ 容量瓶中 ，用丙酮（４． ４）定容至刻度 ，配制成标准中间工作液 ，浓度为１ ０． ０μｇ／ｍＬ，４℃下避光保存 ，保存期为 ３个月。 ４．１ １　标准工作溶液 ：根据实验需要吸取适量的标准中间溶液 （４． １ ０） ，用丙酮（４． ４）稀释成适当浓度的标准工作溶液 ，现用现配 。 ４．１ ２　硅胶固相萃取柱 ：５ ０ ０ｍｇ，６ｍＬ；或相当者 。 ４．１ ３　微孔滤膜 ：０． ２ ２μｍ，有机相型 。 １犛 犖／犜０ ４ ９ １—２ ０ １ ９５　仪器和设备 ５．１　气相色谱仪 ：配有电子捕获检测器 （Ｅ Ｃ Ｄ） 。 ５．２　气相色谱串联质谱仪 ：配有电子轰击电离源 （Ｅ Ｉ） 。 ５．３　组织捣碎机 。 ５．４　电子天平 ：感量分别为 ０． ０ １ｇ和０． １ｍｇ。 ５．５　离心机：转速不低于 ５０ ０ ０ｒ／ｍ ｎ。 ５．６　均质器：转速不低于 １ ５０ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ。 ５．７　氮吹仪。 ５．８　旋转蒸发仪 。 ５．９　固相萃取装置 。 ５．１ ０　聚丙烯离心管 ：５ ０ｍＬ和１ ５ｍＬ，具塞。 ５．１ １　１ ０ｍＬ玻璃刻度试管 。 ５．１ ２　鸡心瓶：１ ２ ０ｍＬ 。 ６　样品制备和保存 ６．１　制样要求 在制样的过程中 ，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 。 ６．２　试样制备 ６．２．１　梨、葡萄、马铃薯、番茄、黄瓜、蘑菇和干辣椒 取代表性样品 ５ ０ ０ｇ，梨、番茄、黄瓜和干辣椒取全果去柄 ；葡萄取全果 ：马铃薯和蘑菇取整颗 ，用捣碎机将样品加工成浆状 ，混匀。试样均分为两份 ，装入洁净的容器内 ，密封并标明标记 。于－１ ８℃以下冷冻保存 。 ６．２．２　大米、玉米、小麦、大豆和糙米 取有代表性样品 ５ ０ ０ｇ，取整粒，用粉碎机粉碎 ，混匀。试样均分为两份 ，装入洁净的容器内 ，密封并标明标记 。常温下保存 。 ７　测定步骤 ７．１　提取 ７．１．１　梨、葡萄、马铃薯、番茄、黄瓜和蘑菇 称取试样约 ５ｇ（精确到０． ０ １ｇ）于５ ０ｍＬ离心管中 ，加入１ ０ｇ无水硫酸钠 （４． ５） ，２ ０ｍＬ乙腈（４． １） ， １ ５０ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ均质提取 ２ｍ ｉ ｎ，４０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ离心１ ０ｍ ｉ ｎ，将上清液经装有 １ ０ｇ无水硫酸钠 （４． ５）的漏斗过滤至１ ２ ０ｍＬ 鸡心瓶中 。再用１ ５ｍＬ乙腈重复以上提取过程 ，合并提取液于同一鸡心瓶中 ，于４ ５℃水浴浓缩至干 ，待净化。 ７．１．２　大米、玉米、小麦、大豆、糙米和干辣椒 称取干辣椒试样约 ２ｇ、大米、玉米、小麦、大豆和糙米试样约 ５ｇ（精确到０． ０ １ｇ）于５ ０ｍＬ离心管 ２犛 犖／犜０ ４ ９ １—２ ０ １ ９中，加１ ０ｍＬ水润湿样品 ，混匀２ｍ ｉ ｎ，静置３ ０ｍ ｉ ｎ 后加入１ ０ｇ无水硫酸钠 （４． ５） ，２ ０ｍＬ乙腈（４． １） ， １ ５０ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ均质提取 ２ｍ ｉ ｎ，４０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ离心１ ０ｍ ｉ ｎ，将上清液经装有 １ ０ｇ无水硫酸钠 （４． ５）的漏斗过滤至１ ２ ０ｍＬ 鸡心瓶中 。再用１ ５ｍＬ乙腈重复以上提取过程 ，合并提取液于同一鸡心瓶中 ，于４ ５℃水浴浓缩至干 ，待净化。 ７．２　净化 用５ｍＬ正己烷（４． ２）溶解７． １步骤中所获得的浓缩液 。用５ｍＬ正己烷（４． ２）预淋洗硅胶固相萃取 柱（４． １ ２） ，将样品提取液通过固相萃取柱 ，用６ｍＬ正己烷乙醚（４． ６）溶液淋洗固相萃取柱 ，弃去全部流出液，再用２ｍＬ正己烷乙醚（４． ７）溶液洗脱 ，收集全部流出液 ，于４ ５℃氮气吹干 。用２． ０ｍＬ 正己烷 （４． ２）溶解，过０． ２ ２μｍ有机相微孔滤膜后 ，供气相色谱测定和气相色谱 质谱确证 。 ７．３　气相色谱测定 ７．３．１　气相色谱参考条件 气相色谱条件如下 ： ａ）　色谱柱：Ｄ Ｂ  １ ７ ０ １ 石英毛细管柱 ，３ ０ｍ×０． ２ ５ｍｍ （ｉ ． ｄ） ，０． ２ ５μｍ，或相当者 ； ｂ）　色谱柱升温程序 ：８ ０℃（２ｍ ｉ ｎ）３ ０℃／→   ｍ ｉ ｎ２ ０ ０℃５℃／→   ｍ ｉ ｎ２ ５ ０℃（３ｍ ｉ ｎ） ； ｃ）　进样口温度 ：２ ５ ０℃； ｄ）　检测器温度 ：３ ０ ０℃； ｅ）　载气：氮气，纯度９ ９． ９ ９％ ，流速：恒流模式 ３ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｆ）　进样方式 ：不分流； ｇ）　进样量：２． ０μＬ。 ７．３．２　气相色谱测定 在仪器最佳工作条件下 ，气相色谱采用外标法定量 。根据样液中被测物残留的含量情况 ，选定峰面 积相近的标准工作溶液 。标准工作溶液和样液中被测物的响应值应在仪器的线性范围内 ，若其响应值超过线性范围 ，用正己烷 （４． ２）稀释到合适浓度后分析 。对标准工作溶液和样液等体积参差进样测定 。上述色谱条件下 ，苯氟磺胺的参考保留时间约为 １ ２． ０ ７ｍ ｉ ｎ ，气相色谱图参见附录 Ａ图Ａ． １。 ７．４　气相色谱 质谱确证 ７．４．１　气相色谱 质谱参考条件 气相色谱 质谱条件如下 ： ａ）　色谱柱：Ｄ Ｂ  ５ＭＳ （３ ０ｍ×０． ２ ５ｍｍ×０． ２ ５ μｍ）石英毛细管柱 ，或相当者 ； ｂ）　色谱柱温度程序 ：６ ０℃保持２ｍ ｉ ｎ，然后以３ ０℃／ｍ ｉ ｎ程序升温至 ２ ２ ０℃，再以５℃／ｍ ｉ ｎ升温至２ ５ ０℃，保持５ｍ ｉ ｎ； ｃ）　进样口温度 ：２ ５ ０℃； ｄ）　色谱质谱接口温度 ：２ ８ ０℃； ｅ）　离子源温度 ：２ ３ ０℃； ｆ）　载气：氦气，纯度≥９ ９． ９ ９ ９％ ，流速１． ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｇ）　进样方式 ：不分流进样 ，１． ０ｍ ｉ ｎ 后打开分流阀和隔垫吹扫阀 ； ｈ）　电离方式 ：电子轰击源 （Ｅ Ｉ） ； ｉ）　进样量：１μＬ； ３犛 犖／犜０ ４