ICS11.220 CCSB41 中华人民共和国国家标准 GB/T47218—2026 犬巴贝斯虫病诊断技术 Diagnostictechniquesforcaninebabesiosis 2026-02-27发布 2026-09-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 引言 Ⅳ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 缩略语 1 …………………………………………………………………………………………………… 5 临床诊断 1 ………………………………………………………………………………………………… 6 血涂片显微镜检测 2 ……………………………………………………………………………………… 7 PCR检测 3 ………………………………………………………………………………………………… 8 试纸条抗体检测 4 ………………………………………………………………………………………… 9 综合判定 5 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(资料性) 吉氏巴贝斯虫病典型症状及病理变化 6 ……………………………………………… 附录B(规范性) 试剂溶液的配制 7 ……………………………………………………………………… 附录C(资料性) 红细胞内典型虫体形态和PCR检测质控标准 8 ……………………………………… 附录D(规范性) 对照血清制备 9 ………………………………………………………………………… 附录E(资料性) 吉氏巴贝斯虫P47重组抗原的制备 10 ………………………………………………… 附录F(资料性) 抗体检测试纸条的制备 12 ……………………………………………………………… 附录G(资料性) 抗体检测试纸条检测结果示意图 14 …………………………………………………… ⅠGB/T47218—2026前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国农业农村部提出。 本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。 本文件起草单位:华中农业大学。 本文件主要起草人:贺兰、赵俊龙、李东方、王森、杨心如、陈方维。 ⅢGB/T47218—2026引 言 犬巴贝斯虫病(caninebabesiosis)是由巴贝斯科、巴贝斯属的巴贝斯虫寄生于犬的红细胞内所引起 的蜱传性血液原虫病,患病犬常出现溶血性贫血、发热、黄疸和血红蛋白尿等典型临床症状。该病多发 生于温暖潮湿的春夏季,在蜱虫活跃的区域广泛传播和流行。我国的犬巴贝斯虫病的主要病原是吉氏 巴贝斯虫(Babesiagibsoni)、犬巴贝斯虫(Babesiacanis)、韦氏巴贝斯虫(Babesiavogeli),其中吉氏巴 贝斯虫为我国大部分地区广泛流行的优势虫种。由于缺乏有效疫苗和治愈药物,宿主一旦感染长期带 虫,因此早诊断对该病的综合防控至关重要。目前国内兽医临床上急性病例的诊断多采用血液涂片显 微镜观察,隐性感染和既往感染需要结合核酸检测和抗体检测进行精准诊断。 为了提高巴贝斯虫检测的准确性,本文件从各检测方法的检测原理、敏感性和特异性等多方面综合 考虑,制定了一套适用于犬的巴贝斯虫病的多方法联合诊断方案。临床诊断初步判定患病犬感染巴贝 斯虫;血涂片显微镜检测方法用于从活体动物的外周血液中检测巴贝斯虫;聚合酶链式反应 (PolymeraseChainReaction,PCR)适用于巴贝斯虫核酸检测,用于检测当前感染;抗体检测试纸条适 用于检测血清样品中的巴贝斯虫抗体,用于实验室检测、流行病学调查和检验检疫等。 ⅣGB/T47218—2026犬巴贝斯虫病诊断技术 1 范围 本文件描述了由吉氏巴贝斯虫引起的犬巴贝斯虫病的临床诊断、血涂片显微镜检测、PCR检测核 酸、试纸条检测抗体等诊断方法。 本文件适用于犬巴贝斯虫病的诊断、流行病学调查以及检疫。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 bp:碱基对(Basepair) DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleicacid) DTT:二硫苏糖醇(1,4-Dithiothreitol) dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(Deoxyribonucleosidetriphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraaceticacid) IPTG:异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside) PBS:磷酸盐缓冲液(Phosphatebuffersaline) PCR:聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction) TAE:三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸(Tris-acetate-EDTA) Tris-Base:三羟甲基氨基甲烷[Tris(hydroxymethyl)aminomethane] 5 临床诊断 5.1 流行病学 5.1.1 传播途径:吉氏巴贝斯虫自然传播主要是通过蜱的叮咬传播,患病犬的发病大多数情况下与蜱 叮咬直接相关,也可能通过输血、受污染的设备或经胎盘传播,以及犬只互相撕咬期间咬伤,通过血液 传播。 5.1.2 传播媒介:长角血蜱、镰形扇头蜱和血红扇头蜱等种类的蜱虫是该病原的传播媒介,诊断巴贝斯 虫病需考虑犬只是否有蜱虫叮咬史。 5.1.3 易感动物:犬巴贝斯虫病的发生与动物的性别及年龄相关性不大,任何年龄的犬只均可能发病。 5.1.4 流行季节:犬巴贝斯虫病多发于4月至10月,分布和发病季节往往与蜱的分布和活动季节密切 1GB/T47218—2026相关。 5.2 临床症状 5.2.1 发热:高热稽留,体温升高至40℃~41℃,持续3d~5d后,转至正常,5d~7d后再次升高。 即呈不规则间歇热型。 5.2.2 贫血:渐进性贫血,可视黏膜苍白、黄染(见附录A中图A.1和图A.2)。 5.2.3 血红蛋白尿:尿液颜色深黄或橘红或似浓茶水样。 5.2.4 呕吐:部分病犬有呕吐症状。 5.3 病理变化 5.3.1 溶血:血液稀薄如水,凝固不良。 5.3.2 黄染:全身皮下脂肪黄染。 5.3.3 脾脏:肝脏和脾脏肿大易碎,体积约为正常犬的2倍~3倍,甚至3倍~4倍(见图A.3)。 5.3.4 肾脏:单侧或双侧肾脏肿大。 5.4 结果判定 符合5.1流行特点,犬出现5.2临床症状或者病死犬剖检时有5.3病理变化,判为疑似巴贝斯虫 病,确诊需进行实验室诊断。 6 血涂片显微镜检测 6.1 仪器设备 光学显微镜(含100×物镜)。 6.2 试剂材料 6.2.1 除特别规定外,在检测中使用的试剂均为分析纯。 6.2.2 姬姆萨染液,按照附录B中B.1方法配制。 6.2.3 甲醇。 6.2.4 香柏油。 6.2.5 载玻片。 6.3 血涂片制备 用剪毛剪剪去犬耳尖毛发,揉搓采血部位,使血流旺盛,针头刺破耳尖,挤取一滴耳尖静脉血于载玻 片上,用推片将血液推成薄血涂片,并迅速晾干。 6.4 血涂片固定 加甲醇于血涂片,使甲醇完全覆盖血涂层,待晾干后重复一次。 6.5 血涂片染色 加姬姆萨染液于已固定好的血涂片,使其完全覆盖血涂层。室温条件姬姆萨染色30min。染色结 束之后,用自来水冲掉染液。将血涂片自然晾干或者吹风机吹干。 2GB/T47218—2026