SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2404—2009 玩具中防腐剂2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮 及其衍生物的测定 Determination of 2-methyl-4-isothiazolin-3-one and its derivatives in toys 2009-09-02发布 2010-03-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2404—2009 前 言 本标准参考了EN71-10:2005《有机化合物样品制备和提取》（英文版）中章节8.2.3、8.5.3、 8.7.3、8.9.3和EN71-11:2005《有机化合物分析方法》（英文版)中章节5.7。 本标准附录A、附录B、附录C均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国扬州出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：白桦、郑建国、陈伟、董益阳、陈娟。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T2404—2009 玩具中防腐剂2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮 及其衍生物的测定 1范围 本标准规定了玩具中可接触液体以及皮革、造型粘土、带粘合剂的贴纸类玩具中防腐剂的液相色谱 测定方法。 本标准适用于玩具中可接触液体以及皮革、造型粘主、带粘合剂的贴纸类等玩具材料中防腐剂的 测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 以去离子水作为模拟物提取玩具中的防腐剂（参见附录A)，提取液经离心过滤后，用高效液相色谱 法进行测定。根据其保留时间定性，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，试验用水应符合6B/T6682一级水的标准。 4.1甲醇：色谱纯。 4.2无水乙酸。 4.3乙酸溶液：移取乙酸配制成0.4%(体积分数)乙酸溶液 4.41,2-苯并异噻唑啉-3-酮标准物质：纯度大于等97% 4.52-甲基-4-异噻唑啉-3-酮标准物质：纯度大于等于99%。 4.65-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(1.2%)/2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(0.3%)标准物质。 注：5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮的含量及~2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮的纯度由供应商与批次决定。 4.7苯酚标准物质：纯度大于等于99%。 4.81,2-苯并异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量1,2-苯并异噻唑啉-3-酮标准物质（精确到 0.1mg），以乙酸溶液（4.3)配制成浓度为100mg/L的标准储备溶液。 0.1mg），以乙酸溶液（4.3)配制成浓度为100mg/L的标准储备溶液。 唑啉-3-酮标准物质（精确到0.1mg），以乙酸溶液（4.3)配制成浓度为120mg/L的标准储备溶液。 4.11苯酚标准储备溶液：准确称取适量5-氯代-2-甲基-4-异噻唑-3-酮标准物质（精确到0.1mg），以 乙酸溶液（4.3)配制成浓度为1000mg/L的标准储备溶液。 5仪器与设备 5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 SN/T2404—2009 5.2分析天平：感量为0.0001g。 5.3微量进样器：20μL。 5.4超声波提取器：工作频率40kHz。 5.5离心机：大于5000r/min。 5.60.45μm水系过滤膜。 5.7溶剂过滤器。 6测定步骤 6.1试样处理 6.1.1可接触液体样品 从不同颜色可接触液体样品中选取代表性试样。称取试样约2g（精确到0.0001g），置于25mL 比色管中，加水至15mL，在超声波提取器中超声提取20min，提取液经滤膜（5.6)过滤，所得滤液供液 相色谱测定。 6.1.2带粘合剂的贴纸类样品 从贴纸样品中取不同颜色代表性试样。剪成各边长小于3mm的小片，混匀。称取试样约2g（精 确到0.0001g），置于50mL具塞锥形瓶中，准确加人15mL水，在超声波提取器中超声提取20min，经 滤膜（5.6)过滤，所得滤液供液相色谱测定。 6.1.3造型粘土样品 称取造型粘土试样约2g（精确到0.0001g），置于50mL具塞锥形瓶中，准确加入15mL水，在超 声波提取器中超声提取20min，取部分溶液于离心管中，离心10min，取上清液经滤膜（5.6)过滤，所得 滤液供液相色谱测定。 6.1.4皮革样品 从不同颠色或不同部位皮革样品选取代表性试样，试样面积不小于10cm²。试样剪成各边长小于 3mm的小片，混匀。称取试样约2g（精确到0.0001g），置于50mL具塞锥形瓶中，准确加人15mL 水，在超声波提取器中超声提取20min，经滤膜（5.6)过滤，所得滤液供液相色谱测定。 6.2测定 6.2.1色谱条件 由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列操作条件已 被证明对测试是合适的。 a） 色谱柱：HypersilRPC18柱，250mmX4.6mm（内径），5μm（粒径），或相当者； 流动相：甲醇十0.4%乙酸溶液=20十80（体积比）； 流速：1.0mL/min； 检测波长：2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、苯酚：280nm;1,2-苯并异 噻唑-3-酮：320nm; e) 柱温：25℃； f) 进样量：20μL。 6.2.2标准工作曲线绘制 移取1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮及苯酚标准 储备溶液，以乙酸溶液（4.3）稀释成浓度分别为0.5mg/L，1.0mg/L，2.0mg/L，5.0mg/L，10.0mg/L 的2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮及5、10、20、50、 100mg/L苯酚的标准工作溶液，取20μL注人液相色谱仪，按色谱条件（6.2.1)进行测定，以色谱峰的 峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准溶液色谱图参见附录B。 2 SN/T2404—2009 6.2.3试样测定 用微量进样器准确吸取20μL试样溶液（6.1)注人液相色谱仪，按色谱条件（6.2.1)进行测定，记录 色谱峰的保留时间和峰面积。防腐剂含量高的试样可取适量用水稀释后进行测定。 6.3空白试验 除不称取试样外，均按步骤6.2.1~6.2.3进行。 结果计算 玩具中防腐剂的含量按式(1)计算： （1） m 式中： M 玩具中防腐剂的含量，单位为毫克每千克（mg/kg)； 扣除空白后从标准工作曲线上查出的试样溶液中异喹啉酮类及苯酚的浓度，单位为毫克每 升(mg/L); V- 试样定容体积，单位为升（L)； 样品质量，单位为克（g）。 u 检出限、回收率及精密度 8.1 检出限 本方法对1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮的检出 限为5mg/kg。 本方法对苯酚的检出限为10mg/kg。 8.2回收率和精密度 回收率和精密度参见附录C。 SN/T2404—2009 附录A (资料性附录) 防腐剂种类表 表A.1 防腐剂种类表 序号 中文名称 英文名称 CAS 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮 2-methyl-4-isothiazolin-3-one 2682-20-4 1 5-氯代-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one 26172-55-4 2 苯酚 pheno! 108-95-2 1.2-苯并异噻唑啉-3-酮 1,2-benzylisothiazolin-3-one 2634-33-5 SN/T2404—2009 附录B （资料性附录） 防腐剂标准品色谱图 492 mAU j 21 40- 30 20 o1 20 /min -2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮； -5-氯代-2-甲基-4-异噻唑琳-3-酮； 苯酚； —1,2-苯并异噻唑啉-3-酮。 图B.J 防腐剂标准品色谱图