SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2181—2008 一代繁殖毒性试验 One-generation reproduction toxicity study 2009-03-16实施 2008-09-04发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 豆丁网：国内外标准大全 http:/www.docin.com/kmust 1. SN/T 2181—2008 前 言 本标准修改采用联合国经济合作与发展组织（OECD)化学品测试方法No.415《一代繁殖毒性试 验》（1983）。 本标准与OECD化学品测试方法No.415相比，存在以下差异： -对OECD化学品测试方法No.415进行了编辑性修改； 一增加了前言部分； 增加了大鼠染毒时间和程序； 一增加了繁殖指数的计算公式。 本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。 本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所、江南大学、天津市检验检疫科学院。 本标准主要起草人：张园、昌吕刚、赵琢、于智睿、周磊、李学洋。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 I 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1. SN/T2181—2008 一代繁殖毒性试验 1范围 本标准规定了动物一代繁殖毒性试验的术语和定义、试验动物、剂量水平、试验步骤、结果评价、试 验报告及试验结果的解释。 本标准适用于检测化学品的繁殖毒性。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准 GB14925实验动物环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 繁殖毒性reproductivetoxicity 由化学品引起的雌性或雄性生殖功能的损伤或生殖能力的降低，如繁殖率的下降；或引起子代的非 遗传性不良效应，如生长发育毒性，包括致畸性和哺乳期中的健康损害效应。 4试验动物 4.1种类和品系的选择 首选健康的成年大鼠或小鼠。最常使用断乳，7周～8周龄，至少经过5d适应期的动物来进行繁 殖毒性试验。雌性动物必须是未产过仔的。 4.2动物数目 雄性和雌性动物通常按1：1或1：2的比例合笼交配。交配的动物数应保证每个剂量组及对照组 都能获得20只左右的孕鼠。 4.3饲养环境 试验动物的饲养和环境设施应符合GB14924.1和GB14925的要求。本试验动物采用自由饮食。 孕鼠临近分娩时，应单笼饲养在分娩笼中，需要时笼中放置造窝垫料。 5剂量水平 试验至少设三个剂量组和一个对照组。最高剂量应使亲代动物出现明显的毒性反应，但不引起动 物死亡；中间剂量可引起轻微的毒性反应；低剂量应不引起动物及其子代的任何毒性反应。如果受试样 品的毒性较低，剂量达到1000mg/kg时，仍未对繁殖过程产生任何毒作用，则可以采用限量试验，即试 验不需要设其他剂量组。若高剂量的预试验观察到明显的母体毒性作用，但对生育无影响，也可以采用 预试验的高剂量进行限量试验。 6试验步骤 6.1分组和对照 染毒前将动物按体重随机分为剂量组和对照组。如果受试样品使用赋形剂，对照组应采用赋形剂 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust1 SN/T2181—2008 的最大使用量进行平行染毒。如果受试样品引起动物食物摄入量和利用率的下降时，那么对照组动物 需要与试验组动物配对喂饲。 6.2染毒剂量 如果受试样品是通过灌胃或胶囊染毒时，给样量应按每只动物的体重来确定，且每周进行调整。对 于妊娠期的母鼠，染毒量应按妊娠的第0天或第6天的体重计算。 6.3染毒时间和程序（以大鼠为例） 大鼠的染毒时间和程序见表1。 表1大鼠染毒程序和时间 试验周期 亲代(P) 子代(Fi) 第1周始～第8周末 给予雄性与雌性亲代动物受试样品 第9周始～第11周末 交配（染毒），交配后处死雄性亲代动物 第12周始～第14周末 雌性亲代动物继续染毒（妊娠及分娩） Fi出生 第15周始～第17周末 哺乳结束后，停止染毒并处死雌性亲代动物 断乳后处死Fi 6.4交配程序 6.4.1雄性和雌性动物按1：1或1：2的比例进行交配。 阴栓的当天计为雌鼠妊娠的第0天（判为交配成功动物）。 6.5窝的规格 出生后的第4天，应将仔鼠数尽量随机调整到每窝4雌和4雄。若得不到4雌和4雄时可作不均 等的调整（如5雄3雌）。但每窝的幼仔数至少为8只。 6.6观察及检查 6.6.1临床观察 每日至少对动物进行一次仔细的观察。记录有无行为改变，难产或滞产以及所有的毒性反应（包括 死亡)。 6.6.2体重和食物摄入量 6.6.2.1在交配前和交配期，应测定每只动物每天的食物摄入量（交配期间雌、雄动物摄食量分别按交 配前一周平均值计算）。 6.6.2.2产仔后，每窝仔鼠需要称量体重时，母鼠的食物摄人量也应同时计算。 6.6.2.3如受试样品是添加到水中进行给样的，则还应记录水的摄入量。 6.6.2.4亲代动物应在给样的第1天进行称量，以后每周称量体重一次。 6.6.2.5妊娠周期应该从怀孕的第0天开始计算。生产下的仔鼠应尽早分辨性别，记录每窝的出生 数、活仔数以及幼仔外观有无异常和畸形。同时记录母鼠或仔鼠在生理上和行为上的异常表现。 6.6.2.6以窝为单位，对仔鼠于出生的当天上午、第4天、第7天、第14天和第21天进行称量。 6.6.3大体解剖检查 死亡和到期处死的亲代动物都应解部进行大体检查，肉眼观察有无组织器官形态上的改变，特别是 生殖器官。死亡或濒临死亡的仔鼠也应接受检查，查看是否有外观或器官形态的缺陷 6.6.4病理组织学检查 保留上述剖检的所有亲代动物的卵巢、子宫、子宫颈、阴道、睾丸、附睾、精囊、前列腺、脑下垂体和靶 器官标本。先对最高剂量组和对照组的动物标本以及剖检中发现异常的标本进行组织病理学检查。如 最高剂量组没有发现有意义的病变，其他剂量组的标本可不必再进行病理检查。若最高剂量组发现有 意义的病理改变，则其他剂量组相关的标本也应作进一步的检查。 2 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust1. SN/T2181—2008 7试验结果评价 7.1繁殖指数 繁殖指数见式（1）～式（5）： 交配成功动物数 交配成功率= ( 1 ) 受孕动物数 受孕率= ·(2) 活产率一 （3) 受孕动物数 出生存活率= (4) 出生当时存活幼仔数 21d断奶时幼仔成活数 ×100% 哺育成活率 (5 ) 出生后4d幼仔存活数 7.2数据处理 7.2.1列表表示试验数据，表中应显示每组的试验动物数、交配的雄性动物数、受孕的雌性动物数、各 种毒性反应及其出现动物的百分数。 7.2.2应采用适当的统计方法对数据进行统计分析。 7.3结果评价 逐一比较剂量组动物与对照组动物繁殖指数是否有显著性差异，以评定受试样品有无繁殖毒性，同 时还可根据出现统计学差异的指标（如体重、观察指标、大体解剖和病理组织学检查结果等），进一步估 计繁殖毒性的损害作用特点。 8试验报告 试验报告应包括以下内容： 受试样品名称、理化特性、配制方法； 试验动物的种类、品系、性别、体重、数量和来源（注明合格证号和动物级别）； 试验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、合笼或单笼饲养、动物实验室合格证号； 试验方法：给样方法和期限，剂量分组； 亲代动物的食物摄人量和体重资料； 按性别和剂量组分别记录的毒性反应，包括繁殖、妊娠和发育能力的异常； 试验过程中，动物死亡的时间以及试验到期时是否还有存活的动物； 每窝仔鼠的体重和仔鼠的平均体重，以及试验后期单个仔鼠的体重； 任何有关繁殖、子鼠及其生长发育的毒性和其他健康损害效应； 观察到的各种异常症状的时间和持续过程； 大体解剖检查的结果； 详述病理组织学检查结果； 统计处理的结果； 结论。 9试验结果的解释 本试验可反映动物在多次接触某一受试样品后所产生的生殖毒性。在分析结果时，应将其与亚慢 性试验，致畸试验以及其他试验的结果相结合，进行综合分析。试验结果能提供无作用剂量水平和人体 安全接触水平，但试验结果外推到人仍存在着一定的局限性。 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1 SN/T 2181—2008 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 一代繁殖毒性试验 SN/T 21812008 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：68523946 68517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.5 字数7千字 2008年11月第一版 2008年11月第一次印刷 印数1—2000 * SN/T 2181-2008 书号：155066·2-19261 定价6.00元 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1 国内外标准大全