SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2168—2008 危险品生殖毒性试验方法 Test method of reproduction toxicity for dangerous goods 2008-09-04发布 2009-03-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1. SN/T2168—2008 前言 本标准修改采用联合国经济合作与发展组织（OECD)化学品测试方法No.415《一代繁殖毒性试 验》（1983）、No.416《两代繁殖毒性试验》（2001）。 本标准与OECD化学品测试方法No.415、No.416相比，存在以下差异： 一对OECD化学品测试方法No.415、No.416进行了编辑性修改； 增加了前言部分 本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。 本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所、江南大学、天津市检验检疫科学技术研究院。 本标准主要起草人：李宁涛、张园、周磊、于智睿、熊中强、赵黎华。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 I 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust1 SN/T2168—2008 危险品生殖毒性试验方法 1范围 本标准适用于对危险化学品进行生殖毒性的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准 GB14925实验动物环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 生殖reproduction 人和哺乳动物繁衍种族的复杂的生理过程，包括两性生殖细胞或称配子的发生、配子的释放、性周 期和性行为、卵细胞受精、受精卵的卵裂、胚泡形成、着床、胚胎形成、胚胎发育、器官形成、胎儿发育、分 娩和哺乳、出生后发育直至性成熟并繁殖下一代的过程。 3. 2 生殖毒性reproductiontoxicity 化学毒物对生殖系统产生的不良效应，包括对父母双方和对胚胎、新生儿的损害。 4试验方法 4.1试验器材和试剂 4.1.1器材 灌胃针、注射器及针头、外科手术剪、手术刀、无齿镊、电子天平、动物体重秤。 4.1.2试剂 蒸馏水、生理盐水或二甲基亚砜等溶剂。 4.2试验动物 选用天鼠，每一剂量组至少20只雌鼠、10只雄鼠。试验动物饲养条件应符合GB14924.1和 GB14925有关规定 4.3剂量和分组 将试验动物随机至少分为两个剂量组和一个对照物。最高剂量应使亲代动物出现明显的毒性反 应，但不引起动物死亡；低剂量应不引起亲代及其子代动物的任何毒性反应。如果受试样品的毒性较 低，1000mg/kg体重的剂量仍未对繁殖过程有任何毒副作用，则可以采用限量试验，即试验不需要设 其他剂量组。若高剂量的预试验观察到明显的母体毒性作用，但对生育无影响，也可以采用限量试验。 豆丁网：国内外标滩大全 http://www.docin.com/kmust 1. SN/T2168—2008 4.4染毒方法 4.4.1一代繁殖试验 雄性动物：在交配前60d开始染毒，覆盖从精原细胞到精子的整个发育过程； 雌性动物：至少要在交配前16d染毒，染毒期要覆盖卵子发育期、怀孕期和哺乳期。 4.4.2 2二代繁殖试验 按照表1的程序进行染毒。 表1二代繁殖毒性试验染毒程序 时间/d Fo Fi 0 Fo出生 Fo离乳 40 F。开始染毒（连续染毒100d) 140 Fo交配 160 Fi出生 200 FI离乳F。染毒结束 Fi开始染毒（连续染毒120d) 320 Fi交配 340 F2出生 380 F2离乳 410 Fi染毒结束，病理解剖 注：F。为亲代，F1为子1代，F2为子2代。 4.4.3交配方法及妊娠检查 雄性和雌性动物按1：1或1：2的比例进行交配。雌鼠应始终与同剂量组的同一只，但不是同窝 所生的雄鼠合笼直至受孕，合笼最长时间可为3周。在交配过程中，每天早晨应对雌鼠进行检查，查看 有无阴栓或阴道中是否有精子。将检查到精子或阴栓的当天计为雌鼠妊娠的第0天。 4.4.4每窝新生幼鼠数量的调整 F1代出生后的第4天，应将仔鼠数尽量随机调整到每窝4雌和4雄。若得不到4雌和4雄时可作 不均等的调整（如5雄3雌）。每窝的幼仔数小于8只时，可不进行调整。F2子代按同样的方法进行 调整。 5试验结果 5.1观察记录 检查记录活仔数和死仔数、性别比和产生畸形活仔的雌性动物数。 5.1.1体重 参与繁殖的动物（亲代和F1子代)应在染毒的第1天进行称量，以后每周称量体重一次。数据应逐 只进行记录。产仔后，每窝仔鼠需要称量体重时，母鼠的食物摄入量也应同时计算。以每窝为单位，对 仔鼠于出生的当天上午、第4天、第7天、第14天和第21天进行称量。 5.1.2大体观察 每日至少对动物进行一次仔细的观察。记录有无行为改变、难产或滞产以及所有的毒性反应（包括 死亡）。在交配前和交配期，应计算每周的食物摄人量，在妊娠中可考虑逐日记录。交配结束时，采集亲 代雄鼠附辜的精子，显微镜下计数200个精子，观察其活动性、形状及数量。 5.1.3妊娠观察 妊娠周期应该从怀孕的第0天开始计算。生产下的仔鼠应尽早分辨性别，记录每窝的出生数、活仔 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1 SN/T2168—2008 数以及幼仔外观有无异常和畸形。同时记录母鼠或仔鼠在生理上和行为上的异常表现。 5.1.4大体解剖 死亡和到期处死的亲代和成年的F1子代动物都应解剖进行大体检查，肉眼观察有无组织器官形 态上的改变，特别是生殖器官。死亡或临死亡的仔鼠也应接受检查，查看是否有外观或器官形态的 缺陷。 5.1.5病理组织学检查 保留上述剖检的所有亲代和F1子代动物的卵巢、子宫、子宫颈、阴道、睾丸、附睾、精囊、前列腺、脑 下垂体和靶器官标本。先对最高剂量组和对照组的动物标本以及剖检中发现异常的标本进行组织病理 学检查。如最高剂量组没有发现有意义的病变，其他剂量组的标本可不必再进行病理检查。反之，若最 高剂量组发现有意义的病理改变，则其他剂量组相关的标本也应作进一步的检查。 5.2结果计算 5.2.1生育力指数 按式(1)计算： 妊娠雌鼠数 受孕率二 X100% ·(1 ) 交配雌鼠数 5.2.2受孕指数 按式（2)计算： 正常妊娠率=！ .(2) 妊娠雌鼠数 5.2.3存活力指数 按式（3)计算： 出生存活率三！ .(3) 出生当时存活幼仔数 5.2.4其他指标 交配指数（交配占发情周期的百分率）； 雌性生育力指数（妊娠雌鼠数占接触育龄雄鼠的雌鼠总数的百分率）； 一雌性生殖率指数（使雌鼠受孕的雄鼠数占与育龄未孕雌鼠接触的雄鼠总数的百分率）； 一生后24h、12d的存活指数。 5.3数据处理 数据可以用表格进行统计，表中应显示每组的试验动物数、交配的雄性动物数、受孕的雌性动物数、 各种毒性反应及其出现动物的百分数。 5.4结果评价 逐一比较剂量组动物与对照组动物繁殖指数是否有显著性差异，以评定受试样品有无生殖毒性，同 时还可根据统计学差异出现在哪个指标上（如体重、观察指标、大体解剖和病理组织学检查结果等），进 一步评价生殖毒性的损害作用特点。 豆丁网国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust1. SN/T 2168—2008 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 危险品生殖毒性试验方法 SN/T2168—2008 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.5 字数7千字 2008年11月第一版 2008年11月第一次印刷 印数1—2000 * 书号：155066·2-19248 SN/T2168-2008 定价6.00元 豆丁网：国内外标准大全 http://www.docin.com/kmust 1 国内外标准大全