版权所有 禁止翻制、 电子传阅 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1683—2005 蜜蜂微孢子虫病诊断方法 Protocolofdiagnosisfornosemosisofbees 2005-09-30发布 2006-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 禁止翻制、电子传阅、友售 版权所有 SN/T1683—2005 前言 本标准参考了世界动物卫生组织（OIE)制定的《陆生动物诊断试验和疫苗标准手册》（2004版）。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。 本标准起草人：张兆平、王小丽、黄少康。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 I 禁止翻制、电子传阅、友售 版权所有 SN/T1683—2005 蜜蜂微孢子虫病诊断方法 1范围 本标准规定了蜜蜂微孢子虫病的诊断及鉴别方法。 本标准适用于蜜蜂和蜂蜜的微孢子虫（Nosemaapis)的检测。 2原理 蜜蜂微孢子虫病是由蜜蜂微孢子虫（NosemaapisZander，19o9)引起的蜜蜂成蜂的原虫病。 对蜜蜂检验时，蜂微孢子虫孢子常与真菌孢子、脂肪球、花粉粒相混淆，须进行鉴别诊断。 3设备、材料和试剂 3.1设备 3.1.1普通光学显微镜。 3.1.2普通低速离心机。 3.1.3电子天平（0.001g）。 3.1.4普通冰箱。 3.2材料 3.2.1镊子。 3.2.2 解剖剪。 3.2.3 酒精灯。 3.2.4 打火机。 3.2.5 记号笔。 3.2.6 50mL烧杯。 3.2.7 胶头滴管。 3.2.8 研钵。 3.2. 9 直径9cm培养皿。 3.2.10 长1m，粗约5cm的木棒。 3.2.11 离心管。 3.2. 12 载玻片。 3.2.13 盖玻片。 3.3试剂 3.3.1无水乙醇（化学纯）。 3.3.2 乙醚（化学纯）。 3.3.3浓盐酸（~37%，化学纯）。 3.3.4苏丹Ⅲ染色液。 4采样 4.1蜂王 4.1.1采样比例 一批蜂王数量小于或等于10只时全部采样。一批蜂王数量为10只100只时，以10只采样量为 1 版权所有 禁正止翻制、电子传阅、友售 SN/T1683—2005 基础，每增加10只，采样量增加1只。一批蜂王数量大于100只时，按每批总蜂王数的30%采样。 4.1.2采样方法 对蜂王采用活体采样法。即抓取待检蜂王，将其放入培养皿内，立即用烧杯扣上，作好标记，待排出 呈无色透明的粪便后，将蜂王放回原群，用盖玻片直接刮取粪便，倒扣在载玻片上制成涂片。 4.2生产蜂群 4.2.1采样比例 根据生产蜂群数量决定采样比例。100群蜂以下按蜂群数的15%～20%采样，101200群蜂按蜂 群数的10%~15%采样，201~300群蜂按蜂群数的10%采样，300群蜂以上按蜂群数的5%采样。 4.2.2采样方法 从待检蜂群中随机采取活工蜂或死工蜂20只，放入烧杯内盖好，记录群号。检验前先将活蜂用乙 醚处死或置于冰箱冷冻室内冷冻10min。 4.3蜂蜜 4.3.1采样比例 一批蜂蜜重量小于等于10t，应从总件数中采取7个样，每个样50g；一批蜂蜜重量为11t50t， 应从总件数中采取8个样，每个样50g；一批蜂蜜重量大于50t，应从总件数中采取9个样（最多10个 样)，每个样50g。 4.3.2采样方法 取样前先用木棒搅匀待检蜂蜜，再称取样品50g，标记待检。 5实验室诊断 5.1对蜂王的检验 取蜂王粪便涂片，置于400×～600×光学显微镜下观察。 5.2对生产蜂群的检验 5.2.1对处死后的活体蜂样品，拉取其中肠放人研钵中，加2mL3mL蒸馏水研磨成悬浮液，取一滴 滴于载玻片上，盖上盖玻片，置于400X～600×光学显微镜下观察。 5.3对蜂蜜的检验 5.3.1直接涂片检验法 取待检蜂蜜1份，用蒸馏水稀释一倍，涂片镜检。 5.3.2沉集检验法 取待检蜂蜜1份，加蒸馏水9份，以800g离心6min，弃上清液，取沉集物涂片镜检。 5.4鉴别诊断 5.4.1酸处理 用以区分微孢子虫孢子和真菌孢子。在可能混有真菌孢子的涂片上小心滴加1滴浓盐酸，置30℃ 下静置20min～30min，则微孢子虫孢子外壳破裂，有时完全被酸溶解消失，而真菌孢子则保持原状 不变。 5.4.2酒精乙醚等量混合液处理 用以区分微孢子虫孢子和脂肪球。将可能混有脂肪球的涂片滴加几滴酒精乙醚等量混合液，待蒸 发干后，再加1滴蒸馏水，盖片镜检，则脂肪球消失，微孢子虫孢子尚存。 5.4.3苏丹Ⅲ染色液处理 用以区分微孢子虫孢子和真菌孢子、脂肪球及花粉粒。在可能混有脂肪球和花粉粒的涂片上加几 滴苏丹Ⅲ染色液染色5min，再滴加1滴蒸馏水，盖片镜检，结果为微孢子虫孢子不着色，真菌孢子呈浓 淡不等的红色，脂肪球橙黄色，花粉粒呈蓝黑色。 2 禁正翻制、电子传阅、发售 版权所有 SN/T1683—2005 5.4.4与马氏管变形虫区别 显微镜下蜂微孢子虫孢子与马氏管变形虫大小相似，直径约6μm～7μm。但形状不一致，马氏管 变形虫呈球形，蜂微孢子虫孢子呈椭圆形 6结果判定 6.1显微镜下看到长约5μm～7μm，宽约3μm4μm，边缘发暗的椭圆形粒子，综合鉴别诊断结果， 判定为蜜蜂微孢子虫病阳性。 6.2显微镜下没有看到6.1中所述孢子形态，判定为蜜蜂微孢子虫“未检出”。 禁止翻制、电子传阅、友售 版权所有 SN/T 1683—2005 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 蜜蜂微孢子虫病诊断方法 SN/T1683—2005 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.bzcbs.com 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张0.5字数6千字 2006年1月第一版 2006年1月第一次印刷 印数1—2000 * SN/T1683-2005 书号：155066·2-16607 7定价6.00元 Ruleof inspection ofsalted undariaforexport SH/T0439-1995 1主题内容与适用范围 本标准规定了出口盐渍裙带菜的检验场所、设备抽样及包装与标志、重量、品质、规格杂质的检验方法。 本标准适用于以裙带菜（undaria）为原料而加工的出口盐渍裙带检验。 2引用标准 SH/10376出口水产品检验抽样方法 3检验场所与设备 3.1检验场所 自然光线充足、温度适宜、通风良好、无异味、清洁卫生。 3.2设备 3.2.1操作台 不锈钢或白瓷砖操作台。 3.2.2衡器 台秤：经国家计量部门鉴定合格，最大称量值不大于被衡样品重量的5倍。 3.2.3量具、钢尺，分度为1mm 4抽祥 按报验批抽样，每批500箱以内抽取3箱，每增加500箱增抽1箱，增加数量不足500箱的也增抽1箱，或按SH／T0376规定抽样， 5 检验 5.1包装与标志检验 5.1.1包装 检验内外包装是否清洁、卫生、牢固，适合长途运输。 5.1.2标志 检验外包装上商品名称、牌号规格、重量、厂代号、批号及生产日期等文字和图案是否同内容物相符。标志是否清晰、齐全，唛头与合同、 信用证是否一致。 5.2重量 拆开包装将样品放在台秤上用直接称量法称取样品重量。 5.3品质 色泽是否具均匀的深绿色。有无枯叶、黄叶。 嘎其味是否具有裙带菜固有的清香味，有无腐败味及其他异味。 5.4杂质 检验样品中有无杂藻、贝壳、泥沙等杂质。 5.5规格 将样品置检验台上层平，用钢尺量其长（宽）度 6结果评定 将检验结果作好记录，依据标准或合同要求综合判断合格与否： 附加说明： 本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。 本标准由中华人民共和国山东进出口商品检验局负责起草。