ICS07. 080 CCS A 40 团体标•准 T/FDSA 0049—2024 促进会 人源间充质干细胞外泌体制备与检验规范 Specifications: Production and Testing of Exosomes Derived from Human Mesenchymal_Stem Cel Is 中国食品药品企业厂 2024 -02-03 发布 2024-03-06实施 中国食品药品企业质量安全促进会 发布 T/FDSA 0049—2024 目 次 前言 III 1 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 4 缩略语 5人源间充质干细胞要求 6 技术要求 6.1外泌体制备 6.2关键质量属性 7检验方法 7. 1 形态 7. 2 数量、粒径、浓度 7. 3 标志蛋白 7. 4 蛋白含量 7. 5 颗粒蛋白比 7. 6 微生物 8检验规则 8.1 总原则 8.2 放行检验 8.3 留样 8. 4 复核检验 8. 5 判定规则 9 包装、储存和运输 9. 1 包装 9.2 标签 9.3 储存 9. 4 运输 10废弃物处理 附录A（资料性） 外泌体质量检验报告单 6 附录B（规范性） 外泌体形态检测（透射电镜观察法） 附录C（规范性） 外泌体颗粒浓度检测（纳米流式检测法） 附录D（规范性) 外泌体粒径检测（纳米流式检测法） 附录E（规范性） 外泌体数量及粒径检测（ZetaViewNTA检测法） 附录F（规范性） 外泌体数量及粒径检测（电阻感应脉冲检测法库尔特原理） 11 I T/FDSA 0049—2024 附录G（规范性） 外泌体蛋白含量检测（BCA检测法） .12 附录H（规范性） 外泌体表面标志蛋白检测（免疫印迹法） .13 参考文献.. .14 中国食品药品企业质量安全促进会 II T/FDSA0049—2024 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由青岛海尔生物科技有限公司提出。 本文件由中国食品药品企业质量安全促进会归口。 本文件起草单位：青岛海尔生物科技有限公司、北京大学深圳医院、北京吉中科生物技术有限公司、 苏州为度生物技术有限公司天津分公司、北京华生物科技有限公司、北京第一生物科技开发有限公司、 成都康景生物科技有限公司、山东芯超生物科技有限公司、中科睿极（海宁）生物科技有限公司、广东 先康达生物科技有限公司、赛睿泰（青岛）生物科技有限公司、山东思乐基医药科技有限公司、广东唯泰 生物科技有限公司、北京希诺赛尔健康科技推广有限公司、北京尧景基因技术有限公司、诺赛联合（北 京）生物医学科技有限公司、上海昭晗实业有限公司、朗姿赛尔生物科技（广州）有限公司、宁波希诺 赛生物科技有限公司、烟台旭智生物科技有限公司、上海揽微赛尔生物科技有限公司、赛浦生物科技（长 春）有限公司、苏州唯思尔康科技有限公司、大昌洋行（上海）有限公司、华域生物科技（天津）有限 公司、江西北正干细胞生物科技有限公司、瑞芯智造（深圳）科技有限公司、重庆市铂而斐细胞生物技 术有限公司、上海慧存医疗科技有限公司、上海交通大学医学院附属仁济医院、江苏育瑞康生物科技有 限公司、青岛瑞思德生物技术有限公司、海昇（湖州）生物医药技术有限公司、中科聚研干细胞有限公 司、上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司、青岛瑞源细胞生物科技开发有限公司、上海循源 生物科技有限公司、青岛大学、上海华盈生物医药科技有限公司、山东杰凯生物科技有限公司、深圳市 北科生物科技有限公司、厦门星际诺康细胞科技有限公司、山东省千佛山医院、北京全式金生物技术股 份有限公司、热休（厦门）细胞生物科技有限公司、磐升瑞祥（山东）生物工程股份有限公司、诺千健 康生物科技有限公司、杭州荣泽生物科技集团有限公司、广东冠驰干细胞医疗科技有限公司、广东艾万 生物科技有限公司、四川康克俞生物科技有限公司、广东赛尔生物科技有限公司、安龄（上海）生物科 技有限公司、广州暨大美塑生物科技有限公司、上海宇玫博生物科技有限公司、三代康年（上海）医疗 科技有限公司、江苏为真生物医药技术股份有限公司、北京国卫生物科技有限公司、保信亚太生物科技 （深圳）有限公司、重庆市华雅干细胞技术有限公司、浙江生创精准医疗科技有限公司、山东天互生物 科技有限公司、北昊干细胞与再生医学研究院有限公司、山东水发生命科学研究有限公司、艾可泰科（浙 江）控股有限公司、呈诺再生医学科技（北京）有限公司、陕西贝芮雅生物科技有限公司、河南道特尔 医药科技股份有限公司、青岛市妇女儿童医院、中科细胞工程（苏州）有限公司、时力生物科技（北 京）有限公司、滨州医学院、麦纳安生物技术（苏州）有限公司、西安东澳生物科技有限公司、湖南联 合创美医药生物科技有限公司、山东大学齐鲁医院（青岛）、深圳市茵冠生物科技有限公司、河北水熊 基因科技有限公司、山东灵犀生物科技有限公司、四川天府亨特生命科技有限公司、优牙生物科技（上 海）有限公司。 本文件主要起草人：曹启龙、陈俊辉、李慧、李云霄、金惊、雷欣华、廖晓龙、刘红芹、刘伟、鄢 晓君、孙彦淘、刘秀丽、王瑾、侯艳、寇大莲、程威、范传文、邹新峰、丰玫玫、张智勇、谢委翰、薛 卫巍、谢海涛、安维玲、窦效伟、付强、孙宇、许峻荣、陈智聪、韩之海、杨曦蕊、高琦、张旭辉、元 爱杰、李少波、吕政庭、王立新、陈忠平、程远星、陈则姜、黄莹之、方攀峰、赵谦、卢海源、李丁、 吕贯廷、王伟、马杰、翟艳华、杨诗逸、严秀英、李亚威、牟春琳、李政楠、燕舞、赵涌、王哲、柳可、 IHI T/FDSA 0049—2024 戴晓宇、甘元善、朱雪晶、冯蕾、俞卫锋、刘文明、王建波、陈梦梦、张炳强、邹伟、齐鹤理、王婧宁、 姜延明、张世冬、彭家伟、于亚平、王端贺、狄国虎、张庆华、赵凯、蔡车国、李柱、张磊升、马静、 吴建洪、王红丽、何世强、陈相波、郑景峰、傅子文、陈光风、王泰华、王健、夏黎明、高博、李海源、 何林富、时凯、李晓玉、岳云强、王欣、颜敏、许震宇、高恒亮、沈政、张百峰、蔡俊、石慧、王静、 闫永生、于宝东、闫美兴、张京钟、樊克兴、付强、刁建忠、白、王颖翠、张芸、吝宏、殷路、刘超 杨明嘉、叶青松。 本文件为首次发布。 中国食品药品企业质量安全促进会 IV T/FDSA 0049—2024 人源间充质干细胞外泌体制备与检验规范 1范围 本标准规定了人源间充质干细胞外泌体的鉴定方法、检验要求、检验规则、标签、包装、储存、运 输和废弃物处理要求。 本标准适用于人源间充质干细胞外泌体的制备与检验。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 WS 213丙型肝炎诊断 WS273梅毒诊断 WS293艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准 WS299乙型病毒性肝炎诊断标准 中华人民共和国药典（2020年版） 全国临床检验操作规程（第4版） 《药品生产质量管理规范》 T/CSCB0001-2020干细胞通用要求 T/CSCB 0003-2020人间充质干细胞 《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》 3术语和定义 3. 1 干细胞stemce// 干细胞是一类具有不同分化潜能，并在非分化状态下自我更新的细胞。 3. 2 人源间充质干细胞human mesenchyma/stemce// 一类存在于多种人体组织（如脐带组织、胎盘组织、脂肪组织等），具有多向分化潜力，非造血于 细胞的成体干细胞。这类干细胞贴壁培养后呈成纤维细胞样形态，具有向多种中胚层系列（如成骨、成 软骨及成脂肪细胞等）或非间充质系列细胞分化的潜能，并具有独特的细胞因子分泌功能。 3. 3 外泌体exosome 由活细胞经过“内吞、融合、释放”的一类具有磷脂双分子层，直径在30-150nm之间的细胞外囊泡。 注：外泌体携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等，广泛参与细胞间物质运输与信息传递，调控生理和病理过程 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 HBV 乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus） HCMV 一人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus） HCV -内型肝炎病毒（HepatitisCVirus） HEBV 一人类疱疹病毒（Human Epstein-BarrVirus） HIV - 一人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus） 1