ICS 71.100.60 QB 分类号：Y41 备案号：39466-2013 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4416-2012 化妆品用原料 透明质酸钠 Cosmetic ingredients Sodium hyaluronate 2012-12-28 发布 2013-06-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4416-2012 前 本标准按GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准主要起草单位：华熙福瑞达生物医药有限公司、资生堂丽源化妆品有限公司、上海市日用化 学工业研究所。 本标准主要起草人：郭学平、郭风仙、穆淑娥、张昱、沈敏、康薇 QB/T4416-2012 化妆品用原料透明质酸钠 1范围 本标准规定了化妆品用原料透明质酸钠的要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存和 保质期。 本标准适用于由微生物（马链球菌兽疫亚种）发酵法制得的、作为化妆品原料应用的透明质酸钠（一 种黏多糖类物质）。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191-2008包装储运图示标志 GB/T6678一2003化工产品采样总则 卫监督发[2007]1号化妆品卫生规范 中国药典2010年版 3产品化学名称、INCI名称、中文名称、分子式、CAS号、结构式 化学名称：［(1-→4)-O-β-D葡萄糖醛酸-(1→3)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D葡萄糖］n INCI名称：SodiumHyaluronate 中文名称：透明质酸钠 分子式：（C14H20NNaO1）n CAS号：9067-32-7 结构式： OH ONa HO HC 4要求 4.1外观 本品为白色至淡黄色粉末或颗粒。 4.2鉴别反应 4.2.1本品的红外光吸收图谱（4000cml600cm")应与透明质酸钠红外光吸收对照图谱一致。 4.2.2本品在无色火焰中燃烧，火焰应显鲜黄色。 4.3理化卫生 透明质酸钠的理化卫生应符合表1的规定。 QB/T4416-2012 表 1 理化卫生 要求 项 目 含量/% ≥ 92:0 平均相对分子质量 实测值（标示量的80.0%~120.0%） 0.25 吸光度（5mg/mL，水溶液，280nm波长） 溶液的透光率/% ≥ 99.0 干燥失重/% ≤ 10.0 5.0~8.5 pH(5mg/mL，水溶液，25℃) 重金属/（以铅（Pb）计，mg/kg） ≤ 20 菌落总数/（CFU/g） ≤ 100: 霉菌和酵母菌/（CFU/g） ≤ 50 金黄色葡萄球菌/g 不应检出 铜绿假单胞菌/g 不应检出 5试验方法 本标准所用试剂，除另有说明外，均为分析纯（AR），试剂溶液未指明用何种溶剂配制时，均指用 纯水配制。本标准所用水，除另有说明外，均指纯水，包括卫监督发[2007]1号《化妆品卫生规范》中 规定的蒸馏水或去离子水等。 5.1外观 在光线明亮但非阳光直射下目测观察。 5.2鉴别反应 5.2.1鉴别（1） 取干燥失重下的本品2mg~3mg和干燥的溴化钾细粉200mg~300mg，置于玛瑙研钵中，混匀研细， 压片，作为供试片，同法制备空白片。对比供试片的红外光吸收图谱（4000cm～600cm"）与附录A 中图A.1是否一致。 5.2.2鉴别(2） 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取本品，在无色火焰中燃烧，观察火焰是否显鲜黄色， 5.3含量 5.3.1仪器和设备 5.3.1.1 分光光度计：带有1cm吸收池。 ：电子天平：精度为0.1mg。 5.3.1.2 5.3.2试剂和溶液 5.3.2.1硼砂硫酸溶液：称取四硼酸钠4.77g，溶于500mL浓硫酸中。 5.3.2.2味唑试液：称取咔唑0.125g，溶于100mL无水乙醇中，置于棕色瓶中保存。 5.3.2.3葡萄糖醛酸标准溶液的制备：精密称取经105℃真空干燥至恒重的葡萄糖醛酸标准品约50mg， 放入100mL容量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀，再稀释10倍得约50μg/mL，的标准溶液。 5.3.2.4供试液的制备：取本品（w）.约80mg，精确至.0.001g，置于100mL量瓶中，加水溶解，并 稀释至刻度，摇匀，储备液备用；称取储备液（W2）约5.0g（密度约为1.00g/mL，即相当于5.0mL）， 置于50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得供试液。 2 QB/T4416--2012 5.3.3测定步骤 标准曲线的制备：精密量取标准溶液（5.3.2.3)0mL、0.2mL0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL， 5.3.3.1 分别置于25mL具塞试管中，各加水至1.0mL，混匀，冰浴中冷却，缓缓加入已置冰浴中冷却的硼砂硫 酸溶液（5.3.2.1)5.0mL，密塞，混匀，沸水浴加热10min，冰浴中冷却至室温。精密加入咔唑试液（5.3.2.2） 0.2mL，混匀，沸水浴加热i5min，冰浴中冷却至室温。按紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版 二部附录IV的A），在530nm波长处测定吸光度，以葡萄糖醛酸的浓度对相应的吸光度计算回归方程 （回归相关系数大于0.990）。 5.3.3.2测定：精密量取供试液1.0mL置于具塞试管中，按标准曲线制备（5.3.3.1)自“冰浴中冷却” 起依法操作，测定吸光度，油回归方程计算出供试液中葡萄糖醛酸浓度c1。 5.3.3.3计算： 含量X，按式（1）计算： 1 ×50×100×100×10×401.3 ×100% (1) w, ×(100-h)×w 194.1 式中： 回归方程计算出供试液中葡萄糖醛酸浓度，单位为微克每毫升（ug/mL)； 本品质量，单位为克（.）" 第二步稀释供试液的称取量，单位为克（g）； 干燥失重，%； 透明质酸钠双糖单位的相对分子质量； 401.3 194.1 葡萄糖醛酸的相对分子质量。 5.4平均相对分子质量 5.4.1 仪器和设备 5.4.1.1 垂熔玻璃滤器：G3。 5.4.1.2 乌式黏度计：内径0.5-mim~0.6mm。 5. 4.1.3 电子天平：精度为0.1mg。 5.4.2试剂和溶液 5.4.2.1/0.2mol/L/氯化钠溶液：称取11.69g氯化钠，-加久1000mL容量瓶中，加永溶解稀释至刻度， 摇匀，即得。 5.4.2:2供试液的制备：精密称取本品约0.1g于100mL容量瓶中，用0.2mol/L氯化钠溶液溶解，稀 释至刻度，摇匀，作为初试液。测定初试液的流出时间，根据流出时间对初试液进行稀释后作为供试液。 5.4.3测定步骤 将0.2mol/L氯化钠溶液经垂熔玻璃滤器滤过，弃去初滤液10mL，取续滤液，在（25土0.1）℃下用 乌式黏度计，测定流出时间，重复测定两次，两次测定值应相同，为溶剂的流出时间To）。将供试液 经垂熔玻璃滤器滤过、同法操作，测定流出时间，重复测定至少两次，两次测定值相差不应超过0.2s， 取两次的平均值为供试液的流出时间（T）。 应符合以不两个条件： a）To大于100 s; b）T/To在1.3~1.5之间。 5.4.4计算 按式（2）计算特性黏度[n]： 3 QB/T4416-2012 T: T 2[ ln To T. 特性黏度[n] (2) C2 式中： 供试液浓度，g/100mL（以干品计)； C2 溶剂的流出时间，单位为秒（s）； To - 一供试液的流出时间，单位为秒（s）。 Ti - 按式（3）计算出本品的平均相对分子质量： 平均相对分子质量 (3) 36 5.5吸光度 5.5.1仪器和设备 5.5.1.1紫外可见分光光度计。 5.5.1.2电子天平：精度为0.01g。 5.5.2测定步骤 称取本品适量，加水溶解成每1mL中含5mg的溶液，必要时置于冰箱2℃～8℃下过夜，作为供试 液。以水为空白对照，用1cm的石英吸收池，在280nm波长处测定供试液的吸光度。 5.6溶液的透光率 取5.5.2下的供试液，以水为空白对照，用1cm的石英吸收池，在550nm波长处测定透光率。 5.7干燥失重 5.7.1仪器和设备 5.7.1.1扁形称量瓶。 5.7.1.2烘箱（精度±1℃）。 5.7.1.3电子天平：精度为0.1mg。 5.7.2测定步骤 称取本品（w3）约0.5g，置于已在105℃烘箱中干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定（w4），于 烘箱中在105℃干燥6h。干燥时，将瓶盖取下，置称量瓶旁或将瓶盖半开；取出时，应将称量瓶盖好。 干燥后置干燥器中放冷至室温，称定质量（ws），由减失的质量和取样量计算供试品的干燥失重。 5.7.3结果的计算 以质量百分数表示的干燥失重h按式（4）计算： (4) W3 式中： ，干燥前本品和称量瓶的质量，单位为克（g）； W4 干燥后本品和称量瓶的质量，单位为克（g)； Ws 本品质量，单位为克（g）。 W3 5.8 pH 5.8.1仪器和设备 精密酸度计：精度不低于0.02。 4 QB/T4416-2012 5.8.2测定步骤 称取本品0.5g置于100mL锥形瓶中，加新沸放冷的水100mL，密封，置磁力搅拌器上搅拌使其溶解， 混匀，约需6h，用酸度计按卫监督发[2007]1号《化妆品卫生规范》规定的方法进行测定。 5.9重金属 5.9.1仪器和设备 电子天平：精度为0.1mg。 5.9.1.1日 5.9.1.2电炉、电阻炉、纳氏比色管、锅。 5.9.2试剂及溶液 5