ICS 67.180.20 QB 分类号：X69 备案号：41611-2013 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4485-2013 普鲁兰多糖 Pullulan 2013-07-22发布 2013-12-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4485-2013 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。 本标准起草单位：山东中科生物科技股份有限公司、山东省食品发酵工业研究设计院、通化安柏生 物科技有限公司、天津实发中科百奥工业生物技术有限公司、中国科学院过程工程研究所、中国生物发 酵产业协会。 本标准主要起草人：杜军、李晓燕、吉武科、严希海、张守军、许勤虎、陈洪章、刘捷、徐勇虎、 王岚、韩慧、刘然、万丽萍、刘方坤。 QB/T4485-2013 普鲁兰多糖 1范围 本标准规定了普鲁兰多糖的要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输、贮存。 本标准适用于以出芽短梗霉（Aureobasidiumpullulans）为产生菌，以蔗糖或葡萄糖等为主要原料， 经特定的生物发酵并经分离提纯、干燥、粉碎而成的工业用普鲁兰多糖。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志（GB/T191-2008，ISO780：1997，MOD） GB/T601 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备（GB/T603一2002，IS06353-1：1982， NEQ) GB/T609 化学试剂总氮量测定通用方法（GB/T609一2006，ISO6353-1：1982，NEQ） GB5009.3 食品安全国家标准食品中水分的测定 GB/T 6678 化工产品采样总则 GB/T 6679 固体化工产品采样通则 GB/T 6682 实验室用水规格和试验方法（GB/T6682一2008，ISO3696：1987，MOD） GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则 GB/T9724化学试剂pH值测定通则（GB/T9724—2007，ISO6353-1：1982，NEQ） GB/T23528-2009低聚果糖 GB28402 食品安全国家标准 食品添加剂 普鲁兰多糖 3分子式、相对分子质量和结构式 分子式：（C6H1oOs）n 相对分子质量：168xn（按2007年国际原子量表），n 聚合度 结构式： HOHS CH,OH OH OH HO OH 4要求 4.1感官要求 应符合表1的规定。 QB/T4485-2013 要 色 白色至微 无味或特殊 粉状 4.2理化要求 应符合表2的规定 目 要 求 多糖含量（以麦芽三糖计） （以于基计） /% 90 黏度（10%水溶液）／（m 15~180 pH（1%水溶液） 5~6.5 干燥失重/% 总氮/% 4.3卫生要求 应符合GB28402的规定 5 试验方法 试验方法中所用水均为去离子水或蒸馏水并符合GB/T6682的规 所用试剂除特殊说明外为分析 纯。标准溶液、制剂的制备应符合GB/T601和GB/T603的要求。 5.1感官检验 取样品约5g， 置于清洁、干燥的白色瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和组织状态，并嗅其味。 5.2鉴别 样品应同时满足以下两个鉴别试验。 5.2.1溶解性试验 在搅拌情况下将10 g普鲁兰多糖以少量加入的方式溶解于100mL水中，获得一种有黏性的溶液。 5.2.2与聚乙烯醇60 0的沉淀反应试验 向10ml 或2%）的普鲁兰多糖溶液中加入2mL聚乙烯醇600，立即形成白色沉淀。 （1:50 5.3多糖含量 （以麦） 芽三糖计） 5.3.1仪器 5.3.1.1 高 液相色谱 斤光检测器或蒸发光散射检测器和柱恒温系统）。 仪 流动 5.3.1.2 相真空抽滤脱气装置及0.2μm或0.45um微孔膜 5.3.1.3 色谱柱 基柱。 5.3.1.4 分析天平 感量0.0001g 5.3.1.5 微量进样器：0μL。 5.3.2试剂 5.3.2.1 水：二次蒸馏水或超纯水（过0.45um水系微孔滤膜） 5.3.2.2 乙腈：色谱纯。 2 QB/T4485-2013 5.3.2.3流动相：乙睛：水（体积比） =75:25（比例可根据实际情况调节） 5.3.2.4样品溶液制备：称取0.20g~0.30g普鲁兰多糖样品，加水溶解定容至50mL，经0.45um滤膜过 滤备用。称取0.20g~0.30g普鲁兰多糖样品，加水溶解，加入普鲁兰酶0.05mL（酶活力不小于1680u/mL）， 加水定容至50mL。在60℃ 冷却至室温，经0.45μm ～62℃条件下水解4h后，85℃保持10min，灭酶， 滤膜过滤备用。 5.3.2.5麦芽三糖标准溶液制备：称取0.b200g麦芽三糖标准品，加水溶解定容至10mL。麦芽三糖 含量0.2g/100mL； 5.3.3分析步骤 5.3.3.1测定 分别取样品液和标准液各10μL（或相同体积）， 操作条件与GB/T23528-2009相同， 以其标准溶 液峰的保留时间为依据 进行定性 以其峰面积求出样液中被测物质的含量。 5.3.3.2结果计算 未经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量按公式 1）进行计算。 CXA X x100 · (1) V 式中： 未经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量，%： Xi 试样溶液浓度，单位为克每毫升（g/mL）； c A1 未经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖峰面积； 称取的未经普鲁兰酶水解的试样质量，单位为克（g)； 未经普鲁兰酶水解的试样定容体积，单位为毫升 Vi 麦芽三糖标准溶液峰面积。 Ao 经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量按公式（2）进行计算： CXA2 X, x100.... ....(2) m, / V,× Ao 式中： 经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量，%； X2 试样溶液浓度，单位为克每毫升（g/mL）； c 经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖峰面积： A2 称取的经普鲁兰酶水解的试样质量，单位为克（g）； m2 V2 经普鲁 兰酶水解的试样定容体积，单位为毫升（mL）： 麦芽三糖标准溶液峰面积 Ao 试样中多糖（以麦芽一糖计）（以干基计）的百分含量按公式（3）进行计算： ...(3) 100-N 式中： 试样中多糖（以麦芽三糖计）（以干基计）的百分含量，%： X- 经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量； 一未经普鲁兰酶水解的试样中麦芽三糖的百分含量； Xi 一普鲁兰多糖试样中水分的百分含量。 3 QB/T4485-2013 5.3.3.3允许差 试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。平行测定结果的绝对差值不应超过0.2%。 5.4黏度 按附录A规定的方法进行测定。 5.5 pH 按GB/T9724规定的方法进行测定。 5.6干燥失重 按GB5009.3规定的方法进行测定。 5.7总氮 按GB/T609规定的方法进行测定。 6检验规则 6.1组批与抽样 按GB/T6678确定取样单元数，取样按GB/T6679的规定执行。 6.2检验分类 检验分出厂检验和型式检验。 6.3出厂检验 6.3.1每批产品应经企业质检部门检验合格并附合格证后方可出厂。 6.3.2出厂检验项目为：感官、多糖含量（以麦芽三糖计）、黏度、pH、干燥失重、总氮。 6.4型式检验 6.4.1下列情况之一时，应进行型式检验； a）正常生产半年1次； b）停产3个月以上恢复生产； c）主要原料及工艺有重大改变时； d）国家质量监督机构监督提出或客户要求时； e）出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时。 6.4.2型式检验的检验项目包括本标准的全部技术要求。 6.5判定规则 检验结果中若有1～2项指标不符合本标准要求，应重新双倍取样进行复检，复检结果只要有1项不 符合本标准，则整批产品判为不合格。 7标志、包装、运输、贮存 7.1标志 7.1.1标签应符合GB7718的规定。包装容器外面标签应注明：产品名称、生产厂厂名、厂址、净含 量、生产日期、批号、保质期、执行的标准编号。 7.1.2包装储运标志应符合GB/T191的规定。 7.2包装 包装物和容器应整洁、卫生、无破损。 7.3运输 运输过程中应有遮盖物，避免雨淋日晒；不应与有毒物质混放、混运。 7.4贮存 产品应贮存在阴凉、洁净、干燥的地方，不应与有害、有毒及有腐蚀性等物质混存。 4 QB/T4485-2013 附录A （规范性附录） 黏度的测定 A.1仪器 A. 1. 1 平氏玻璃毛细管黏度计：内径2mm。 A.1.2分析天平。 A.1.3电动搅拌器：800r/min。 A.2分析步骤 A.2.1样品溶液的制备 量取100mL蒸馏水于搅拌杯中，置于搅拌器上，开启搅拌。精确称取10.0g经105℃干燥2.5h的 普鲁兰多糖，缓慢加入到搅拌杯中，于800r/min下搅拌至全溶解，再静置1h。 A.2.2测定 用10mL吸管吸取10mL样品溶液，注入黏度计中，将黏度计垂直放入（25士0.1）℃保温箱中，保 温20min，用吸耳球将黏度计中液体吸至双球间第一刻度线上5mm处，让样品自由流动，待液体下流至 第一刻度线时，按下秒表计时，到达第二刻度线时，计时停止，下流时间以秒计，计算黏度。 A.2.3结果计算 样品黏度n按公式（A.1）计算： 1xD=l (A.1) 式中： 样品黏度，