ICS 67.080 CCS A 017 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0396—2025 枸杞中氟吡呋喃酮残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 Determination of Fluorofuranone Residues in Lycium Barbarum By HPLC-MS/MS 2025-07- 07发布 2025-07- 30实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全） ）、宁夏药品检验研究院 、宁夏计量质量检验检测研究院 、宁夏职业技术学院 、 宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人 ：张瑶、郭阳、王泽岚、姚博伟、张芦燕、陈盼盼、张赫宇、李强、刘竞泽、 吴明、吕毅、马桂娟、张小飞。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0396—2025 1枸杞中氟吡呋喃酮残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 1范围 本文件规定了枸杞中氟吡呋喃酮残留量的液相色谱 -串联质谱检测方法。 本文件适用枸杞中氟吡呋喃酮残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经乙腈提取，分散固相萃取法净化，反相色谱柱分离，供液相色谱 -串联质谱仪测定，基 质匹配外标法定量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1试剂 5.1.1甲酸：色谱纯。 5.1.2乙腈：色谱纯。 5.1.3无水硫酸镁：分析纯。 5.1.4 N-丙基乙二胺（ N-primary secondary amine,PSA ）：粒径 50μm。 5.1.5 十八烷基键合硅胶吸附剂（ C18）：粒径 50μm。 5.1.6石墨化炭黑（ GCB）：粒径 50μm。 5.1.7 0.1%甲酸水溶液：取甲酸（ 5.1.1）1.0mL，用水定容到 1000mL，混匀。 5.2标准品 氟吡呋喃酮标准品（ CAS号： 951659-40-8 ），纯度不低于 99.0%。 5.3标准溶液配制 5.3.1标准储备液（ 100.0μg/mL ）：准确称取氟吡呋喃酮标准物质 1.00mg，用乙腈（ 5.1.2）溶解并 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0396—2025 2定容至 10.0mL中，于 -18℃冰箱中避光保存，保存期限为 3个月。 5.3.2标准中间液（ 1.0μg/mL ）：移取氟吡呋喃酮标准储备液（ 5.3.1）100μL，用乙腈（ 5.1.1）定容 至10.0mL，于 -18℃避光贮存，有效期 1个月。 5.3.3标准工作液：移取适当体积的标准中间液（ 5.3.3），用空白样品基质溶液配制成质量浓度为 0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL的标准工作液 ， 临用现配。 6仪器和设备 6.1液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源。 6.2天平：感量 0.01m g和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4高速离心机： 最大转速 9000r/min 。 6.5氮吹仪。 6.6有机微孔滤膜， 孔径 0.22μm，或相当者。 7分析步骤 7.1制备与保存 枸杞干果样本取可食用部分，混合均匀，搅拌破碎，装入密闭洁净容器，冷冻保存。 7.2提取与净化 7.2.1提取 称取 5g（精确至 0.01g）枸杞样品置于 50mL具塞离心管中， 加入 10mL乙腈（ 5.1.2），涡旋 提取 10min，6000r/min 离心 5min，取上清液；残渣再加乙腈（ 5.1.2）10mL重复提取一次，合并上 清液，待净化。 7.2.2净化 准确移取2.0mL上清液加入 QuEChERS 试剂（含150mg MgSO 4、20mg PSA、20mg GCB、50mg C18），涡旋 2min，9000r/min 离心 5min。取1.0mL上清液氮吹至 0.5mL以下，用乙腈 -水（ 10∶90， V/V）定容至 1.0mL，过0.22μ m滤膜（ 6.6）至进样小瓶中， 供HPLC-MS/MS 分析。 7.3仪器参考条件 7.3.1液相色谱参考条件 a）色谱柱： C18，2.1mm×150mm ，粒径 3.5μm或性能相当。 b）柱温： 40℃。 c）流动相： A：0.1%的甲酸水溶液 （5.1.7），B：乙腈溶液 （5.1.2）,梯度洗脱条件见表 1。 d）流速： 0.3mL/min 。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0396—2025 3e）进样量： 5μL。 表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 /min 流速 /（mL/min） 流动相 A/% 流动相 B/% 0.00 0.3 90 10 2.00 0.3 45 55 5.00 0.3 10 90 6.00 0.3 10 90 6.10 0.3 60 40 8.00 0.3 90 10 7.3.2质谱参考条件 a）电离方式：电喷雾离子源（ ESI）。 b）扫描方式：正离子扫描。 c）检测方式：多反应监测（ MRM）。 d）鞘气温度： 325℃。 e）鞘气流速： 10.0L/min 。 f）雾化器压力： 310.23kPa 。 g）喷嘴电压： 500V。 h）毛细管电压： 3500V。 i）定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞能量等参数参见 附录 A。 7.4定性确证 7.4.1保留时间 被测物质色谱峰保留时间与标准物质色谱峰保留时间相比较，相对误差应在 ±2.5%以内。 7.4.2离子丰度比 相同实验条件下进行样品测定时 ，如果检出色谱峰的保留时间与标准样品相一致 ，并且在扣除 背景后的样品质谱图中 ，所选择的离子均出现 。而且样品化合物的离子丰度比与质量浓度相当的标 准溶液相比，相似度的允许偏差不超过 表2规定的范围，则可判定样品中存在目标组分。 表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50% ＞20%至50% ＞10%至20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.5定量测定 将基质标准溶液与试液依次注入液相色谱 -串联质谱仪中 ，采用基质标准溶液校准曲线外标法定 量，待测试液中目标物的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内 ，超过线性范围时应进行适当倍 数稀释后再进行分析 。在上述液相色谱质谱条件下 ，氟吡呋喃酮标准溶液的特征离子质量色谱图见 附录 B。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0396—2025 47.6空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。 8结果与表达 试样中氟吡呋喃酮残留量按式（ 1）进行计算： )1(10001000   fmV CX 式中： X ──试样中化合物含量，单位为微克每千克（ μg/kg）； C ──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为 纳克每毫升（ ng/mL）； V ──试样的最终定容体积，单位为毫升（ mL）； m ──试样质量，单位为克（ g）； f ──稀释倍数。