ICS 67.200 CCS C 133 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0394—2025 食用油中三种抗氧化剂的测定 气相色谱法 Determination of Three Antioxidants in Edible Oils by Gas Chromatography Method 2025-07- 07发布 2025-07- 30实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全））、宁夏回族自治区纤维质量监测中心、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人 ：张瑶、郭阳、汤丽华、王泽岚、蒋媛、马波、王琛、李强、刘竞泽、吴明、 吕毅、马桂娟、张小飞。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0394—2025 1食用油中三种抗氧化剂的测定 气相色谱法 1范围 本文件规定了 食用油中三种抗氧化剂 （叔丁基对苯二酚 (TBHQ)、叔丁基对羟基茴香醚 (BHA)、 2,6-二叔丁基对甲基苯酚 (BHT)）的气相色谱检测法。 本文件适用食用油中三种抗氧化剂的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法。 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 样品中的抗氧化剂经有机溶剂提取 ,用气相色谱氢火焰离子化检测器检测 ,采用保留时间定性 , 外标法定量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为色谱纯。 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1环己烷：色谱纯。 5.1.2正己烷：色谱纯。 5.1.3乙酸乙酯：色谱纯。 5.1.4乙腈：色谱纯。 5.1.5乙腈饱和的正己烷溶液：正己烷中加入乙腈至饱和。 5.1.6正已烷饱和的乙腈溶液：乙腈中加入正己烷至饱和。 5.1.7乙酸乙酯和环己烷混合溶液（ 1+1）：量取50mL乙酸乙酯和 50mL环己烷混匀。 5.2标准品 三种抗氧化剂标准品名称、化学分子式、 CAS号和纯度见附表 A。 5.3标准溶液配制 5.3.1标准储备液（ 1.0mg/mL ）：分别准确称取三种抗氧化剂标准物质适量，用乙酸乙酯和环己烷 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0394—2025 2混合溶液（ 5.1.4）溶解并定容至 50.0mL容量瓶中，于 -20℃避光保存，保存期限为 3个月。 5.3.2混合标准工作溶液： 分别吸取标准储备液 0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、 5.0mL于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯和环己烷混合溶液（ 5.1.4）定容， 此标准工作溶液的浓度为 10.0μg/mL 、50.0μg/mL 、100.0μg/mL 、200.0μg/mL 、300.0μg/mL 、400.0μg/mL 、500.0μg/mL ，临用 现配。 6仪器和设备 6.1气相色谱仪 (GC)：配氢火焰离子化检测器 (FID)。 6.2天平：感量 0.01m g和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4高速冷冻离心机： 转速 9000r/min 。 6.5氮吹仪：可控温。 7分析步骤 7.1试样制备 液体样品混合均匀，取有代表性试样，密封保存 。 7.2测定步骤 称取 1.0g（精确至 0.01g）样品于 50mL具塞离心管中， 加入 3mL乙腈饱和的正己烷 （5.1.5） 溶解样品 ，涡旋混合 1min，加入 4mL正己烷饱和的乙腈溶液 （5.1.6）涡旋提取 2min，9000r/min 离 心5min，收集乙腈层于另一试管中， 再重复使用 3mL正己烷饱和的乙腈溶液 （5.1.6）提取 2次， 合并 3次提取液，氮吹至近干， 用2.0mL乙酸乙酯和环己烷混合溶液（ 5.1.7）定容，供气相色谱测 定。BHA、BHT、TBHQ混合基质工作曲线的空白基质加标样品按上述相同步骤处理 ，供气相色谱 测定。 7.3仪器参考条件 a）色谱柱： 5%苯基 -甲基聚硅氧烷毛细管柱， 0.25mm×30m ，或性能相当。 b）进样口温度： 220℃。 c）进样量： 1μL，不分流进样。 d）载气流速： 1 mL/min。 e）检测器温度： 250℃。 f）程序升温： 初始柱温 80℃，保持 1min，以10℃/min升温至 220℃，保持 2min，以40℃/min升 温至 260℃，保持 5min。 7.4标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中 ，测定相应的抗氧化剂 ，以标准工作液的浓度为横坐 标，以响应值（峰面积 ）为纵坐标，绘制标准曲线， BHA、BHT、TBHQ三种抗氧化剂的标准溶液 气相色谱图见附录 B。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0394—2025 3 57.5试样溶液的测定 将试样溶液注入气相色谱仪中 ，测得峰面积 ，以保留时间定性 。根据标准曲线得到待测液中各 目标化合物的浓度。 8结果与表述 试样中 BHA、BHT、TBHQ含量按式（ 1）进行计算： 式中： X ──试样中各种化合物含量，单位为毫克每千克（ mg/kg）； c ──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为微克每毫升（ μg/mL）； V ──样液最终定容体积 ，单位为毫升（ mL）； m ──试样质量，单位为克（ g）。 计算结果保留三位有效数字。 9精密度 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。 10其他 当称样量为 1.0g，定容体积 2.0mL时，叔丁基对苯二酚 (TBHQ)、叔丁基对羟基茴香醚 (BHA)、 2,6-二叔丁基对甲基苯酚 (BHT)定量限均为 5mg/kg。 )1(mV cX 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台