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ICS 67.060 CCS X11 团体 标准 T/CGTA 11—2025 大豆转基因成分的快速检测 环介导等温扩增( LAMP)检测法 Rapid detection for genetically modified components in soybeans —— Loop -mediated isothermal amplification detection method 2025 - 08 - 01发布 2025- 08 - 01实施 中国粮食商业协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/CGTA 11 —2025 - 1 - 目次 1 范围 ................................ ................................ ............. - 3 - 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ... - 3 - 3 术语、定义和缩略语 ................................ ............................... - 3 - 3.1 术语和定义 ................................ ................................ ... - 3 - 3.2 缩略语 ................................ ................................ ....... - 3 - 3.2.1 ................................ ................................ ............ - 3 - CP4-EPSPS ................................ ................................ ........ - 3 - 3.2.2 ................................ ................................ ............ - 3 - G2-EPSPS ................................ ................................ ......... - 3 - 3.2.3 ................................ ................................ ............ - 4 - G10evo-EPSPS ................................ ................................ ..... - 4 - 4 原理 ................................ ................................ ............. - 4 - 5 仪器及材料 ................................ ................................ ....... - 4 - 6 试剂 ................................ ................................ ............. - 4 - 6.1 试剂 ................................ ................................ ......... - 4 - 6.2 溶液配制 ................................ ................................ ..... - 6 - 7 样品制备 ................................ ................................ ......... - 6 - 7.1 抽样和制样 ................................ ................................ ... - 6 - 7.2 样品前处理 ................................ ................................ ... - 6 - 8 样品测定 ................................ ................................ ......... - 7 - 8.1 试液配制 ................................ ................................ ..... - 7 - 8.2 核酸扩增 ................................ ................................ ..... - 7 - 8.3 结果判定 ................................ ................................ ..... - 7 - 全国团体标准信息平台 T/CGTA 11 —2025 - 2 - 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的 规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由百沃特(天津)生物技术有限公司提出。 本文件由中国粮食商业协会归口。 本文件起草单位:百沃特(天津)生物技术有限公司、中粮营养健康研究院有限公司、北大荒 粮食集团有限公司、黑龙江象屿农业物产有限公司、通标标准技术服务(青岛)有限公司。 本文件主要起草人:马增彬、钱承敬、仉磊、刘晓萌、王健、李俊、于旭德、韩冀、杨若松、 龚雅云。 全国团体标准信息平台 T/CGTA 11 —2025 - 3 - 大豆转基因成分的快速检测 环介导等温扩增( LAMP)检测法 1 范围 本文件规定了大豆中转基因成分环介导等温扩增快速检测方法的术语和定义、 原理、 仪器与设 备、试剂与材料、样品制备、检测方法和判定规则的要求。 本文件适用于大豆中转基因成分 CP4-EPSPS、G2-EPSPS和G10evo-EPSPS核酸序列的 快速检 测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用 文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本 (包括所有的修改单) 适用于本文件。 GB/T 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 19495.4 转基因产品检测 实时荧光定性聚合酶链式反应( PCR)检测方法 GB/T 19495.7 转基因产品检测 抽样和制样方法 3 术语、定义和缩略语 3.1 术语和定义 GB/T 19495.7 界定的术语和定义适用于本文件。 3.2 缩略语 3.2.1 CP4-EPSPS 土壤农杆菌 CP4蛋白基因和 5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因 Agrobacterium tumefaciens strain CP4 Product: herbicide tolerant form of 5 -enolpyruvulshiikimate -3-phosphate synthase 。 3.2.2 G2-EPSPS 全国团体标准信息平台 T/CGTA 11 —2025 - 4 - 荧光假单胞杆菌 G2蛋白基因和 5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因 Agrobacterium tumefaciens strain CP4 Product: herbicide tolerant form of 5 -enolpyruvulshiikimate -3-phosphate synthase 。 3.2.3 G10evo-EPSPS 耐辐射球菌 G10evo蛋白基因和 5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因 Deinococcus radiodurans CP4G10evo Product: herbicide tolerant form of 5 -enolpyruvulshiikimate -3-phosphate synthase 。 4 原理 根据大豆内源基因、外源基因( CP4-EPSPS、G2-EPSPS和G10evo-epsps)序列设计特异性内 引物和外引物各一对,建立 LAMP反应体系。引物特异性识别目标序列,利用 Bst酶启动循环链置 换反应,在特异性目标序列启动互补链合成,

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