ICS65.020.01 CCSB30DB50 重庆市地方标准 DB50/T1825—2025 段木灵芝菌种生产技术规程 2025-07-07发布 2025-10-07实施 重庆市市场监督管理局发布DB50/T1825—2025 I前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第１部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由重庆市药物种植研究所提出。 本文件由重庆市农业农村委员会归口并组织实施。 本文件起草单位：重庆市药物种植研究所、重庆市康泽科技开发有限责任公司、重庆市中药研究院、 重庆维近生态农业发展股份有限公司、重庆天同生态农业有限公司。 本文件主要起草人：雷美艳、赵小红、肖波、胡开治、蒲潇、韩量、杨小玉、贺宗毅、高维琼、夏 闳缤。DB50/T1825—2025 1段木灵芝菌种生产技术规程 1范围 本文件规定了段木灵芝菌种生产条件、设施设备、生产技术、档案管理的要求。 本文件适用于段木灵芝菌种生产。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T528食用菌菌种生产技术规程 NY/T1742食用菌菌种通用技术要求 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4生产条件 应符合NY/T528的规定。 5设施设备 5.1基本设施 具备配料室、装袋室、灭菌室、接种室、培养室、贮藏室等设施。 5.2基本设备 粉碎机、磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台、空调、除湿机、培养架、 恒温培养箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装袋机。 6生产技术 6.1母种生产 6.1.1PDA培养基制备 称取200g马铃薯切成小块加1000mL水煮沸20min～30min，纱布过滤，取滤液加入20g葡 萄糖和20g琼脂粉，琼脂完全融化后定容至1000mL，pH自然。DB50/T1825—2025 26.1.2分装和灭菌 将配制好的PDA培养基分装至200mL组培瓶，每瓶30mL～40mL，分装后进行高压蒸汽灭菌， 121℃保持25min～30min。 6.1.3无菌检测 随机抽取3%～5%的组培瓶(每批抽样量不得少于10瓶)，在（28±2）℃下培养3d～5d，检 查有无微生物菌落，无菌落的为合格。 6.1.4接种 在无菌室或超净工作台中严格按照无菌操作规程接种，接种完成后及时标记菌种信息。 6.1.5培养 母种置于（26±1）℃，空气湿度50%～60%的恒温恒湿培养箱中避光培养至菌丝长满培养基平面。 分别于接种后第3d和第7d进行逐个检查，挑出未活、污染和生长不良的不合格培养瓶。 6.1.6母种质量标准 母种感官质量要求见表1。 表1母种质量要求 项目 要求 容器 无损、洁净 培养瓶盖体 干燥、洁净、无损、能透气和滤菌 培养基装入量 30mL～40mL 菌 种 外 观菌丝生长量 长满培养基平面 菌丝体特征 菌丝洁白、绒毛状、生长致密、均匀、健壮 菌丝体表面 均匀、舒展、平整 菌丝体分泌物 无 菌落边缘 整齐 杂菌菌落 无 培养瓶底部外观 培养基不干缩、无积水、无暗斑 6.1.7母种保藏 在4℃～6℃下避光保存，保藏期不超过90d。 6.2原种生产 6.2.1培养料 杂木屑78%、麦麸15%、玉米粉5%、过磷酸钙1%、石膏0.5%、石灰0.5%，要求原料新鲜、洁净、 干燥、无虫、无霉、无异味。 6.2.2拌料 准确称取培养料，充分拌匀，含水量控制在60%～65%。DB50/T1825—2025 36.2.3分装 宜采用规格为650mL玻璃菌种瓶分装。菌种瓶要求洁净、无损。 6.2.4灭菌 高压蒸汽灭菌，121℃～124℃，保持1.5h～2.0h。 6.2.5接种 培养料冷却至28℃以下，严格按照无菌操作规程接种母种，每瓶接种1cm×1cm菌块1块～ 2块。并及时标记菌种名称、接种日期等信息。 6.2.6培养 培养温度（26±2）℃、空气湿度50%～60%，培养环境洁净、通风、避光。 6.2.7培养期检查 培养3d后开始检查，及时清理污染、生长不良等不合格培养瓶。 6.2.8原种质量标准 原种感官质量要求见表2。 表2原种质量要求 项目 要求 容器 无损、洁净 培养瓶盖体 干燥、洁净、无损、能透气和滤菌 培养基上表面距瓶口的距离 （50±5）mm 菌 种 外 观菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 菌丝体白、生长健壮、致密 培养物表面菌丝体 菌丝体浓密、粗壮，生长均匀，无高温抑制线 培养基及菌丝体 紧贴瓶壁、无干缩 菌丝分泌物 允许少量无色至棕黄色水珠 杂菌 无 子实体原基 无 6.2.9原种保存 菌丝长满后及时使用或置于4℃～12℃保存备用。 6.3栽培种生产 6.3.1段木准备 在栽培种生产季节，选择直径10cm以上的青冈、栎、栲等阔叶树，在30d内将树干及树枝截成 20cm的段木，将过大的段木劈成大小均匀的扇形木块，装袋前用1%的石灰水预湿12h～24h。 6.3.2填充料准备 按照6.2.1、6.2.2配料和拌料。DB50/T1825—2025 46.3.3装袋 采用规格为（18cm～20cm）×（40cm～42cm）×0.008cm的低压聚乙烯或高压聚丙烯塑料袋。 在袋底装入2cm～3cm的填充料，将木块紧密摆放，上端填充2cm～3cm的填充料，用套环加无棉 盖体封口。 6.3.4灭菌 121℃～124℃高压蒸汽灭菌2.0h～2.5h或常压蒸汽灭菌18.0h～24.0h。 6.3.6接种 将原种严格按照无菌操作规程接种在栽培袋内，每袋接种量30g～50g。 6.3.7培养及检查 同6.2.6和6.2.7，菌丝长满后及时移出培养室。 6.3.8栽培种质量标准 栽培种感官质量要求见表3。 表3栽培种质量要求 菌种外观 要求 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 生长均匀、色泽正常、无高温抑制线 培养基及菌丝体 紧贴袋壁、无干缩 杂菌 无 7档案管理 档案应保存2年。 _________________________________