ICS 65.020.20 B 23 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 1603—2017 木薯种质资源离体保存技术规程 Technical regulations fo r invitro conservation of cassava germplasm 2017 - 09 - 15 发布 2017 - 10 - 15 实施 广西壮族自治区质量技术监督局 发布 DB45/T 1603 — 2017 I 前 言 本标准依据GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。 本标准起草单位：广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室。 本标准主要起草人：曾文丹、严华兵、陆柳英、谢向誉、曹升、尚小红、肖亮、周慧文、赖大欣。 DB45/T 1603 —2017 1 木薯种质资源离体保存技术规程 1 范围 本标准规定了木薯种质资源离体保存的有关术语和定义、 基本要求、 常温保存、 低温保存、 技术指 标和检验方法等要求。 本规程适用于广西壮族自治区境内木薯种质资源离体保存。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1520 木薯 SN/T 1616 非洲木薯花叶病毒检测方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 离体保存 通过离体培养的试管苗， 保存在使其限制、 延缓或停止其生长的环境， 需要时可恢复其生长， 并再 生植株的方法。 4 基本要求 4.1 用于种质资源离体保存的材料应保证品种纯正，来源可靠，且未发生变异。每隔 8～10 年种质资 源更新换代一次。 4.2 应详细登记材料情况（参见附录 A）。 5 常温保存 5.1 保存材料 经组织培养获得的试管苗用作木薯离体保存的材料。 5.2 保存容器 采用口径规格为6 cm～7 cm、高度为9 cm～10 cm的玻璃瓶，用塑料盖封口。 DB45/T 1603 — 2017 2 5.3 保存条件 保存温度（25±1） ℃，光照强度1 500 lx～2 000 lx，光照时间10 h/d～12 h/d，培养基为MS + NAA 0.02 mg/L＋PP 333 0.02 mg/L + 蔗糖3 5 g/L＋6. 4 g/L 琼脂 ，（ pH 5.8～6.0）。每瓶 添加 培养基 3 0 mL～ 3 5 mL。 5.4 保存数量 每 份 种质保存5瓶 以上 ，每瓶 3 ～ 4个 小植株。 5.5 继代时间 每6～8 个月继 代1次。 6 低温保存 6.1 保存材料 按 5.1的规定 执行 。 6.2 保存容器 按 5.2的规定 执行 。 6.3 保存条件 保存温度（18±1） ℃，光照强度1 500 lx～2 000 lx，光照时间10 h/d～12 h/d，培养基为MS + NAA 0.02 mg/L＋PP 333 0.02 mg/L + 蔗糖3 5 g/L＋6. 4 g/L 琼脂 ，（ pH 5.8～6.0）。每瓶 添加 培养基 3 0 mL～ 3 5 mL。 6.4 继代时间 每12～15 个月继 代1次。 7 技术指标 7.1 常温保存 变异 率≤ 2 ％ ， 无 木薯花叶病毒。 7.2 低温保存 变异 率≤ 2 ％ ， 无 木薯花叶病毒。 8 检验方法 8.1 抽样 方法 按 照NY/T 1520 进行 。 8.2 病毒检测 按 照SN/T 1616 进行 。 DB45/T 1603 —2017 3 A A 附 录 A （资料性附录） 木薯种质资源离体保存登记表 木薯种质资源离体保存登记表见表A.1。 表A.1 木薯种质资源离体保存登记表 种质名 品系名 地方名 原产地 来源地 原保存单位 原保存单位编号 引种人 引种时间 引种号 国家统一编号 采集号 保存号 保存方法 保存材料 保存者 继代次数 继代时间 保存数量 操作人 ______________________ 中华人民共和国广西地方标准 木薯种质资源离体保存技术规程 DB45/T 1603 ― 2017 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究