ICS 65.020.20 B 21 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 1587 — 2017 重瓣大岩桐组培快繁技术规程 Technical regulations fo r tissue culture and r apid propagation of Sinningia speciosa 2017 - 09 - 15 发布 2017 - 10 - 15 实施 广西壮族自治区质量技术监督局 发布 DB45/T 1587 — 2017 I 目 次 前 言 ............................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 组织培养方法 ...................................................................... 1 5 组培苗移栽 ........................................................................ 2 6 质量要求 .......................................................................... 3 7 包装、标签和运输 .................................................................. 3 附录 A（资料性附录） 培养基配方 ...................................................... 4 DB45/T 1587 — 2017 II DB45/T 1587 — 2017 III 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。 本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院花卉研究所。 本标准主要起草人：闫海霞、卜朝阳，王晓国、邓杰玲、黄昌艳、何荆洲、张自斌、李秀玲。 DB45/T 1587 —2017 1 重瓣大岩桐组培快繁技术规程 1 范围 本标准规定了重瓣大岩桐组培快繁技术的术语和定义、 组织培养方法、 组培苗移栽、 质量要求以及 包装、标签和运输。 本标准适用于广西境内重瓣大岩桐种苗的组培快繁。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 NY/T 2306界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 重瓣大岩桐 Sinningia speciosa 大岩桐中具有重瓣花的园艺商品种的统称，是苦苣苔科大岩桐属的多年生球根花卉。 4 组织培养方法 4.1 培养基 各培养基参见附录A。 4.2 灭菌和接种 取生长健壮、 无病虫害的重瓣大岩桐植株成熟叶片或茎段， 用中性洗涤剂浸泡5 min～10 min， 然后 在自来水下流水冲洗30 min， 并用软毛刷轻轻刷洗叶片或茎段。 在超净工作台上， 用75％酒精浸泡5 s～ 10 s，用无菌水冲洗3～5遍。再用0.1％氯化汞溶液浸泡4 min～6 min，用无菌水冲洗3～5遍。将叶片切 成2.0 cm×2.0 cm或茎段切成长1.5 cm～3.0 cm，接种在初代培养基上，初代培养基配方参见附录A中的 A.1。 4.3 初代培养 培养基参见附录A中A . 1的要求，培养时间为1 0 d～1 5 d，培养 温度 为2 4 ℃ ～2 6 ℃ ， 光 照 强度为 5 000 lx，光周 期10 h～12 h。 DB45/T 1587 — 2017 2 4.4 诱导培养 4.4.1 愈伤组织诱导 将初代培养 获得 的无菌叶片切成1.0 cm×1.0 cm，按叶 面 朝上， 平放 在初代培养基上 进行愈伤 组织 诱导 培养。培养时间为25 d～30 d，培养 温度 为24 ℃ ～26 ℃ ， 避光 培养。 4.4.2 愈伤组织分化 将 愈伤 组织切成1.0 cm×1.0 cm，接 入愈伤 组织分化培养基中。培养时间为25 d～30 d，培养 温度 为 24 ℃ ～26 ℃ ， 光 照 强度 为2 000 lx ， 光周 期10 h ～12 h 。 4.4.3 不定芽的增殖培养 将 通过 茎段 获得 的不定 芽 切成单 芽 ， 接 入增殖 培养基中， 培养时间为20 d～25 d， 培养 温度 为24 ℃ ～ 26 ℃ ， 光 照 强度 为2 000 lx ， 光周 期12 h ～15 h 。 4.5 生根培养 切取生长健壮、 叶片 舒展 的不定 芽 ，接 入 生根培养基中， 培养时间为15 d～25 d， 培养 温度 为24 ℃ ～ 26 ℃ ， 光 照 强度 为1 000 lx ， 光周 期10 h ～12 h 。 4.6 炼苗 植株 完整 ，根 、茎 、叶 俱全 ，株 高 3.0 cm～5.0 cm， 叶片3～4片， 根 数 5条 以上， 根长2.5 cm～4.0 cm。 叶 色正常 ，无 微 生 物污染 。将组培苗 带瓶放置温室 中5 d～7 d， 光 照 强度 应 控制 为5 000 lx ～10 000 lx ， 环 境 温度控制 为15 ℃ ～30 ℃ ，然后 除去瓶盖继续放置 1 d～2 d。 炼 苗 过 程中 污染 的生根组培苗应 废弃 。 5 组培苗移栽 5.1 基质 泥炭 、 珍珠 岩按 体积比 2: 1配 制 。在移苗前1 d～2 d用0.3％～0.5％ 高锰酸钾 溶液 淋透消毒 。 5.2 容器 50 孔 或72 孔 的 育 苗 穴盘 。 5.3 移栽 将组培苗取出，洗 去 根部培养基，用50％多菌 灵 可 湿 性 粉 剂1 000 倍 溶液浸泡10 min～15 min。 每穴 种植1株，基质以 刚盖过 组培苗基部为 宜 ， 浇透 定根水。 5.4 移栽后管理 5.4.1 环 境 温度 为2 0 ℃ ～25 ℃ 。 环 境 相 对 湿度保持 在 60％～85％， 保持 基质 湿润 。移栽初期用 遮光 率 为 70％的 遮 阳 网遮阴 5 d～7 d。 5.4.2 移栽后 30 d后 用 复 合 肥 （N -P 2O 5-K 2O= 15 - 15 - 15）1 000～2 000 倍 液 淋施 ， 每 7 d 施 用1 次 。 5.4.3 每 7 d用7 5％ 百 菌 清 可 湿 性 粉 剂1 000～1 500 倍 液或 50％多菌 灵 可 湿 性 粉 剂 800～1 000 倍 液药 液 喷雾预防 病害。病虫害的化学 防 治方法应 符 合G B / T 8321（所有部分）的规定。