以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 工业单羧脂肪酸含量的测定   气相色谱法 Determination of industrial monocarboxylic fatty acids — Gas chromatographic method 2023 -12-29发布 2024 -07-01 实施ICS 71.080.01 CCS G 17 中华人民共和国海关总署 发 布SN/T 5681 —2023以正式出版文本为准以正式出版文本为准 SN/T 5681—2023I前  言 本文件按照 GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中华人民共和国青岛海关、青岛博信达科技有限公司。本文件主要起草人：牛增元、张雪琰、陈春光、叶曦雯、王妍婷、周龙龙、刘靖雨、刘泉、孙 志广、孙妮妮。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 5681—2023工业单羧脂肪酸含量的测定    气相色谱法 警告——使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问 题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。 1   范围 本文件描述了工业单羧脂肪酸及其盐和酯含量的气相色谱测定方法。 本文件适用于工业单羧脂肪酸及其盐和酯含量的测定，相关产品可参照执行。 2   规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3   术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4   方法概要 将样品通过甲醇和浓硫酸衍生化为相应的甲酯，经异辛烷提取后，与多种脂肪酸甲酯混合标 准溶液同时经气相色谱法分析，根据保留时间和出峰顺序定性分析，经外标法定量，计算各碳数脂肪酸的含量；经归一化法定量，计算各碳数脂肪酸含量分布。 5   试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的三级水。 5.1   甲醇：色谱纯。 5.2   浓硫酸：密度约为 1.84 g/mL。 5.3   异辛烷：色谱纯。 5.4   37 种混合脂肪酸甲酯标准溶液，各组分浓度≥ 99.3%，化合物信息见附录 A 中表 A.1。 5.5   脂肪酸酯标准品，纯度≥ 97.0%，化合物信息见表 A.2。 5.6   标准工作溶液：根据需要用异辛烷稀释成适当浓度的标准工作溶液，现用现配。以正式出版文本为准2 SN/T 5681—20236 仪器设备 6.1 气相色谱仪：配有火焰离子化检测器（FID） 。 6.2 分析天平：感量 0.1 mg。 6.3 恒温培养箱：60 ℃±2 ℃。 6.4 涡旋混合器。 6.5 有机系微孔滤膜：0.45 μm。 7   分析步骤 7.1   试样前处理 7.1.1   脂肪酸、脂肪酸盐和脂肪酸酯 取 0.1 g（外标法精确至 0.0001 g）试样于 25 mL 具塞玻璃管中，加入 5 mL 甲醇（5.1） ，溶 解后，滴加 0.1 mL 浓硫酸（5.2） ，充分混匀，60 ℃±2℃恒温反应 30 min 后加入 5 mL 蒸馏水， 2 mL 异辛烷（5.3） ，剧烈摇动萃取，静置分层，取上层有机相过滤膜上机分析。 7.1.2   脂肪酸酯 取 0.1 g（外标法精确至 0.0001 g）试样于 25 mL 容量瓶中，加入异辛烷（5.3）使其溶解并 定容至刻度，取适量混匀溶液过滤膜上机分析。7.2   气相色谱分析 7.2.1 日常检测气相色谱参考条件如下： a） 毛细管色谱柱：键合聚乙二醇强极性固定相，柱长 30 m，内径 0.25 mm，膜厚 0.25 μm， 或相当者； b） 柱温：初始温度 40 ℃，保持 0 min，以 15 ℃/min 速率升温至 240 ℃，保持 15 min ； c） 进样口温度：260 ℃； d） 进样体积：1 μL； e） 载气：氢气，流速为 1.0 mL/min ； f） 分流比：100 : 1 ； g） 检测器温度：280 ℃； h） 燃气：氢气，流速为 30 mL/min ； I） 助燃气：空气，流速为 400 mL/min。 7.2.2 阳性确证气相色谱参考条件如下： a） 毛细管色谱柱：聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相，柱长 100 m，内径 0.25 mm，膜厚 0.2 μm， 或相当者； b） 柱温：初始温度 60 ℃，保持 1 min，以 10 ℃/min 速率升温至 240 ℃，保持 20 min ； c） 进样口温度：270 ℃； d） 进样体积：1 μL； e） 载气：氢气，流速为 1.0 mL/min ； f） 分流比：100 : 1 ； g） 检测器温度：280 ℃； h） 燃气：氢气，流速为 30 mL/min ； I） 助燃气：空气，流速为 400 mL/min。以正式出版文本为准3 SN/T 5681—20237.3 定性分析 各碳数脂肪酸色谱峰达到良好分离，对比脂肪酸酯标准溶液和样品的色谱保留时间及出峰顺 序，进行定性分析。脂肪酸酯标准溶液典型参考图谱见附录 B，脂肪酸甲酯的保留时间和定量限 见附录 C。 7.4   定量分析 7.4.1   外标法定量 将脂肪酸酯标准溶液和待测液逐级稀释至仪器线性范围内，采用外标法进行定量。试样中目 标物的含量按公式（1）计算，结果保留三位有效数字。 ……………………………（1） 式中： Xi ——试样中目标物含量，单位为克每百克（g/100 g） ； ci ——从标准工作曲线得到的试样溶液中目标物对应脂肪酸酯的浓度，单位为微克每毫升 （ μg/mL） ； V ——样品溶液定容体积，单位为毫升（mL） ； CF ——目标物与其对应脂肪酸酯之间的换算系数； m ——试样的质量，单位为克（g） ； 100——将含量转换为每 100 g 试样中含量的系数。 换算系数（ CF） ，按公式（2）计算： ……………………………（2）式中： CF ——目标物与其对应脂肪酸酯之间的换算系数； Mi ——目标物的分子质量； MFAE——目标物对应脂肪酸酯的分子质量。 7.4.2   归一化法定量（脂肪酸分布） 样品中各碳数脂肪酸色谱峰达到良好分离，采用面积归一化法定量分析。 试样中某脂肪酸（ Yi）占总脂肪酸的百分含量，按公式（3）计算，结果保留三位有效数字。 ……………………………（3） 式中： Yi ——试样中某脂肪酸占总脂肪酸的百分含量，% ； Ai ——试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积； ∑Ai——试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积之和。 8   精密度 在重复性条件下，两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的 10%。以正式出版文本为准4 SN/T 5681—2023附 录  A （规范性） 脂肪酸标准品的分子式及 CAS 号 37 种脂肪酸甲酯标准品的分子式及 CAS 号见表 A.1。 表 A.1   37种脂肪酸甲酯标准品的分子式及 CAS 号 序号 脂肪酸甲酯 脂肪酸简称 分子式 CAS 号 1 丁酸甲酯 C4:0 C5H10O2 623-42-7 2 己酸甲酯 C6:0 C7H14O2 106-70-7 3 辛酸甲酯 C8:0 C9H18O2 111-11-5 4 葵酸甲酯 C10:0 C11H22O2 110-42-9 5 十一碳酸甲酯 C11:0 C12H24O2 1731-86-8 6 十二碳酸甲酯 C12:0 C13H26O2 111-82-0 7 十三碳酸甲酯 C13:0 C14H28O2 1731-88-0 8 十四碳酸甲酯 C14:0 C15H30O2 124-10-7 9 顺 -9- 十四碳一烯酸甲酯 C14:1 C15H28O2 56219-06-8 10 十五碳酸甲酯 C15:0 C16H32O2 7132-64-1 11 顺 -10- 十五碳一烯酸甲酯 C15:1 C16H30O2 90176-52-6 12 十六碳酸甲酯 C16:0 C17H34O2 112-39-0 13 顺 -9- 十六碳一烯酸甲酯 C16:1 C17H32O2 1120-25-8 14 十七碳酸甲酯 C17:0 C18H36O2 1731-92-6 15 顺 -10- 十七碳一烯酸甲酯 C17:1 C18H34O2 75190-82-8 16 十八碳酸甲酯 C18:0 C19H38O2 112-61-8 17 反 -9- 十八碳一烯酸甲酯 C18:1n9t C19H36O2 1937-62-8 18 顺 -9- 十八碳一烯酸甲酯 C18:1n9c C19H36O2 112-62-9 19 反 , 反 -9,12- 十八碳二烯酸甲酯 C18:2n6t C19H34O2 2566-97-4 20 顺 , 顺 -9,12- 十八碳二烯酸甲酯 C18:2n6c C19H34O2 112-63-0 21 二十碳酸甲酯 C20:0 C21H42O2