̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ICS67.050 CCSX04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5644.6—2023 出口食品中农用化学物质的快速检测方法 拉曼光谱法 第6部分:腈菌唑 Rapid determination of agricultural chemicals in export food— Raman spectroscopy—Part 6: Myclobutanil 2023-12-29发布 2024-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T 5644《出口食品中农用化学物质的快速检测方法 拉曼光谱法》的第6部分。 SN/T 5644已经发布了以下部分: ———第1部分:总则; ———第2部分:孔雀石绿和结晶紫; ———第3部分:恩诺沙星和环丙沙星; ———第4部分:多菌灵; ———第5部分:噻菌灵; ———第6部分:腈菌唑; ———第7部分:毒死蜱; ———第8部分:三唑磷; ———第9部分:地虫硫磷; ———第10部分:亚胺硫磷。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:合肥海关技术中心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、上海体育学院、杭 州海关技术中心、上海如海光电科技有限公司。 本文件主要起草人:宋伟、王钰、韩芳、陈莉君、罗纪军、周典兵、伊雄海、黄超群、于永爱、邓晓军。 ⅠSN/T5644.6—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 引 言 出口食品中农用化学物质的快速检测方法是为进一步确保出口食品质量安全,为农用化学物质的 风险研判提供现场监测技术手段的方法。建立出口食品中农用化学物质的快速检测标准方法体系是出 口食品监管机构的重要任务。本系列标准SN/T 5644《出口食品中农用化学物质的快速检测方法 拉曼 光谱法》旨在建立基于拉曼光谱法的出口食品中农用化学物质的快速定性筛查方法,拟由10个部分 组成。 ———第1部分:总则。目的在于为出口食品中农用化学物质的拉曼光谱快速检测方法的建立提供 通用要求。 ———第2部分:孔雀石绿和结晶紫。目的在于为出口水产品中的孔雀石绿和结晶紫提供快速定性 筛查方法。 ———第3部分:恩诺沙星和环丙沙星。目的在于为出口动物源性食品中的恩诺沙星和环丙沙星提 供快速定性筛查方法。 ———第4部分:多菌灵。目的在于为出口水果、蔬菜中的多菌灵提供快速定性筛查方法。 ———第5部分:噻菌灵。目的在于为出口水果、蔬菜中的噻菌灵提供快速定性筛查方法。 ———第6部分:腈菌唑。目的在于为出口植物源性食品中的腈菌唑提供快速定性筛查方法。 ———第7部分:毒死蜱。目的在于为出口植物源性食品中的毒死蜱提供快速定性筛查方法。 ———第8部分:三唑磷。目的在于为出口植物源性食品中的三唑磷提供快速定性筛查方法。 ———第9部分:地虫硫磷。目的在于为出口水果中的地虫硫磷提供快速定性筛查方法。 ———第10部分:亚胺硫磷。目的在于为出口水果中的亚胺硫磷提供快速定性筛查方法。 ⅡSN/T5644.6—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 出口食品中农用化学物质的快速检测方法 拉曼光谱法 第6部分:腈菌唑 1 范围 本文件规定了植物源性食品中腈菌唑的拉曼光谱快速检测方法。 本文件适用于苹果、葡萄、番茄、辣椒、香蕉、橘子、黄瓜、豇豆、生姜、葡萄干、干辣椒等植物源性食品 中腈菌唑的筛查。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 23200.46 食品安全国家标准 食品中嘧霉胺、嘧菌胺、腈菌唑、嘧菌酯残留量的测定 气相 色谱-质谱法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 不同物质具有与其分子结构相对应的特征拉曼光谱。样品经5%乙醇水溶液提取,石油醚反萃,取 上清液氮气吹干复溶后加表面增强试剂对信号增强,进行拉曼光谱扫描。与标准谱图库中的腈菌唑特 征拉曼位移(632 cm-1±10 cm-1、739 cm-1±10 cm-1、1 092 cm-1±10cm-1)进行匹配识别,对样品中 的腈菌唑进行阴性阳性的初筛结果判定。 5 试剂和材料 除另有规定外,本文件所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。 5.1 石油醚(沸程30 ℃~60 ℃)。 5.2 乙醇。 5.3 甲醇。 5.4 盐酸(质量浓度37%)。 5.5 氯金酸。 5.6 柠檬酸三钠。 5.7 0.01% 氯金酸溶液:称取0.01 g氯金酸并加水定容至100 mL。 5.8 1%柠檬酸三钠溶液:称取1 g柠檬酸三钠并加水定容至100mL。 1SN/T5644.6—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 5.9 5%乙醇溶液:准确移取5.0 mL乙醇于100 mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀后备用。 5.10 20%甲醇溶液:准确移取2.0 mL甲醇于10 mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀后备用。 5.11 表面增强试剂:金纳米粒子溶胶,或相当者。在100 mL圆底烧瓶中加入聚四氟乙烯磁力搅拌子 和50 mL的0.01%氯金酸溶液,将圆底烧瓶中溶液加热至沸腾后迅速加入0.4 mL的1%柠檬酸三钠 水溶液,保持沸腾状态,加热回流30 min即可制得金纳米粒子,反应结束后冰浴冷却,装入棕色试剂瓶 中,0 ℃~4 ℃冷藏保存,有效期6个月。 注: 本文件所述纳米表面增强试剂及促凝剂信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便,在使用本文件时不做限 定。方法使用者在使用替代试剂或操作步骤前,对其进行考察,满足本文件规定的各项性能指标。 5.12 促凝剂:1 mol/L盐酸溶液。称取9.0mL盐酸于试剂瓶中,加入100 mL水,混匀后备用。 5.13 腈菌唑标准品:C15H17ClN4,CAS号88671-89-0,纯度≥99%。 5.14 腈菌唑标准储备溶液:1 000 μg/mL。精密称取100 mg(精确至0.1mg)腈菌唑标准品,用水溶解 后于100 mL容量瓶用水定容至刻度,摇匀,制成浓度为1 000 μg/mL的标准储备液,0 ℃~4 ℃条件下 保存。 5.15 腈菌唑标准工作液:10.0 μg/mL。吸取0.1 mL腈菌唑储备溶液于10 mL容量瓶中,用乙醇定 容至刻度,混匀,0 ℃~4 ℃条件下保存。 6 仪器和设备 6.1 便携式拉曼光谱仪 稳频激光光源:发射波长为785 nm ± 1 nm,线宽<0.1 nm,能量≥250 mW;光谱分辨率≤15 cm-1;光谱响应范围200 cm-1~3 200 cm-1,或大于该响应范围。 6.2 移液器:100 μL、200 μL、500 μL、1 mL和5 mL。 6.3 涡旋振荡器。 6.4 氮气吹干装置。 6.5 超声波水浴装置。 6.6 离心机:转速≥4 000 r/min。 6.7 电子天平:感量为0.01 g、0.0001g。 6.8 塑料具塞离心管:2 mL、15 mL。 7 试样制备 7.1 试样制备 取代表性样品约500 g,将其可食用部分(不可用水洗)切碎,混匀,转入洁净容器,密封,标明标记。 7.2 试样保存 水果干制品试样于0 ℃~4 ℃保存;其他类试样于-18 ℃以下冷冻保存。 在制样的操作过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 8 分析步骤 8.1 提取 取1.0 g样品于15 mL离心管中,加入3 mL 5%乙醇水溶液,超声振荡3 min,4 000 r/min离心 3 min。取0.5 mL上清液,待净化。 2SN/T5644.6—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 8.2 净化 上述净化液(见8.1)中加入0.5 mL石油醚,涡旋振荡2 min,4 000 r/min离心2 min后,取所有上 清液氮气吹干,加入0.2 mL 20%甲醇水复溶,即为待测液。 8.3 测定步骤 8.3.1 拉曼光谱仪器参考条件 拉曼光谱仪器条件如下: a) 激光能量≥250 mW; b) 数据采集时间≥1 s; c) 平均次数2次。 8.3.2 测定 在仪器样品池中依次加入20 μL 待测液(见8.2),30 μL促凝剂(5.12),最后加入200 μL表面增强 试剂(5.11),快速摇晃均匀,等待20 s检测(检测需在样品加入后1 min内完成)。 8.4 质控试验 8.4.1 阴性对照 称取空白试样,按照8.1、8.2和8.3步骤操作。 8.4.2 加标质控试验 准确称取空白试样1.0 g置于15 mL具塞离心管中,加入一定量腈菌唑标准工作液(10.0 μg/mL) (5.15),使质控样腈菌唑浓度相当于检出限,按照8.1、8.2和8.3步骤操作。 9 结果判定要求 9.1 定性判定 仪器软件将测试结果与标准谱图库中的腈菌唑进行匹配