̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ICS67.050 CCS X04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5643.5—2023 出口食品中化学污染物的快速检测方法 第5部分:4种真菌毒素含量的测定 生物芯片试剂盒法 Methods for rapid detection of chemical contanminats in food for export— Part 5: determination of 4 biotoxins Biochip kit method 2023-11-01发布 2024-05-01实施 中华人民共和国海关总署发布̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T 5643《出口食品中化学污染物的快速检测方法》的第5部分。SN/T 5643已经发 布了以下部分: ———第1部分:砷、镉、汞、铅含量的测定 X射线荧光光谱法; ———第2部分:碱性嫩黄O的测定 拉曼光谱法; ———第3部分:苋菜红的测定 拉曼光谱法; ———第4部分:西布曲明的测定 拉曼光谱法; ———第5部分:4种真菌毒素含量的测定 生物芯片试剂盒法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:中华人民共和国南京海关、上海体育学院、南京祥中生物科技有限公司、中华人民 共和国合肥海关、中华人民共和国南通海关。 本文件起草人:陆慧媛、丁涛、张晓燕、邓晓军、许丹科、韩芳、金珂、张文国、郭桂萍、黄键、汤迪朋、朱 静怡。 ⅠSN/T5643.5—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 引 言 出口食品中化学污染物检测是为了提高出口食品的整体质量 ,降低因技术贸易壁垒导致的出口食 品被拒的风险 。为了保证出口食品的安全 ,促进出口食品的快速通关 ,建立出口食品中化学污染物的快 速检测标准方法体系已经成为出口食品监管机构的重要任务 。在这方面 ,我国已经建立了支撑出口食 品中化学污染物快速检测的标准方法体系 。在该标准方法体系中 ,S N/ /T 5 6 4 3《出口食品中化学污染 物的快速检测方法 》旨在建立适用于出口食品中化学污染物快速检测的 X射线荧光法 、拉曼光谱法 、生 物芯片试剂盒法 ,拟由五个部分构成 。 — — —第1部分:砷、镉、汞、铅的X射线荧光光谱法 。目的在于为出口食品中的重金属污染物提供 可快速定量的检测方法 。 — — —第2部分:碱性嫩黄 O的拉曼光谱法 。目的在于为出口饮料中的碱性嫩黄 O提供快速定性筛 查方法。 — — —第3部分:苋菜红的拉曼光谱法 。目的在于为出口饮料中的苋菜红提供快速定性筛查方法 。 — — —第4部分:西布曲明的拉曼光谱法 。目的在于为出口减肥茶中的西布曲明提供快速定性筛查 方法。 — — —第5部分:4种真菌毒素的生物芯片试剂盒法 。目的在于为出口食品中的真菌毒素提供可快 速定量跨类筛查方法 。 各部分之间的关系参见图 1。 图1 S N/T 5 6 4 3各部分之间关系 ⅢS N/T5 6 4 3.5—2 0 2 3̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 出口食品中化学污染物的快速检测方法 第5部分:4种真菌毒素含量的测定 生物芯片试剂盒法 1 范围 本文件规定了出口食品中真菌毒素的生物芯片试剂盒检测方法。 本文件适用于小麦、糙米、玉米、花生、玉米油、花生油、芝麻油等食品中赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯 酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和黄曲霉毒素B1含量的快速测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 真菌毒素的生物芯片试剂盒采用竞争免疫法检测样本中真菌毒素,试样中目标物经提取后,与芯片 上固定的人工抗原阵列点竞争结合用纳米标记的抗体,反应完毕后,加入纳米催化试剂,在芯片表面形 成肉眼可见的黑色斑点,用芯片分析仪检测各斑点灰度值,外标法定量。 5 材料和试剂 所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 正己烷。 5.1.2 石油醚。 5.2 真菌毒素芯片检测试剂盒 试剂盒的保存方式、运输条件等按试剂盒相关规定执行,具体组成如下: a) 96孔生物芯片微孔板:12条×8孔(固定偶联真菌毒素抗原阵列点); b) 真菌毒素标准溶液×7瓶,1 mL/瓶,具体浓度见表1; 1SN/T5643.5—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э c) 纳米标记抗体工作液,7 mL; d) 样品提取液,500 mL; e) 样品稀释液,100 mL; f) 浓缩洗涤液,25 mL:临用时用水稀释20倍,作为洗涤工作液,现用现配; g) 显色液:底物 A液和底物 B液各4 mL,临用时1∶1混合。 注: 试剂盒的评价参考 SN/T 2775,评价结果见附录 A。 表1 真菌毒素标准溶液 单位为微克每千克 类型 赭曲霉毒素A 玉米赤霉烯酮 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 黄曲霉毒素B1 标准溶液1 0 0 0 0 标准溶液2 0.04 0.6 8 0.06 标准溶液3 0.08 1.2 16 0.12 标准溶液4 0.16 2.4 32 0.24 标准溶液5 0.32 4.8 64 0.48 标准溶液6 0.64 9.6 128 0.96 高浓度标准溶液 100 1 000 10 000 100 6 仪器与设备 6.1 微阵列芯片影像扫描仪:Q-Array 2000,或其他等效产品。 6.2 微孔板恒温震荡仪。 6.3 微量移液器:20 μL~200 μL、100 μL ~1 000 μL和1 mL ~5 mL。 6.4 涡旋振荡器。 6.5 匀浆机。 6.6 高速粉碎机。 6.7 离心机:转速≥5 000 r/min。 6.8 电子天平:感量0.001 g。 6.9 具塞聚丙烯离心管:1.5 mL,15 mL。 6.10 分样筛:筛孔2.0 mm。 7 试样的制备与提取 7.1 试样的制备 7.1.1 液体样品(植物油等) 采样量需大于1 L,对于袋装、瓶装等包装样品需至少采集3个包装(同一批次或号),在同一容器 中混匀后,取其中任意的100 g(mL)样品进行检测。 7.1.2 固体样本(谷物及其制品等) 采样量应大于1 kg,用高速粉碎机(6.6)将其粉碎、过分样筛(6.10),混合均匀后缩分至100 g,储 存于样品袋中,密封保存,供检测用。 2SN/T5643.5—2023