̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ICS67.050 CCS X04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5643.2—2023 出口食品中化学污染物的快速检测方法 第2部分:碱性嫩黄O的测定 拉曼光谱法 Methods for rapid detection of chemical contaminants in food for export— Part 2: determination of Auramine O Raman spectroscopy 2023-11-01发布 2024-05-01实施 中华人民共和国海关总署发布̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 中华人民共和国出入境检验检疫 行 业 标 准 出口食品中化学污染物的快速检测方法 第2部分:碱性嫩黄O的测定 拉曼光谱法 SN/T 5643.2—2023 * 中国海关出版社有限公司出版发行 北京市朝阳区东四环南路甲1号(100023) 编辑部:(010)65194242-7530 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75 字数19千字 2024年4月第一版 2024年4月第一次印刷 印数 1—500 * 书号: 155175·1017 定价16.00元̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T 5643《出口食品中化学污染物的快速检测方法》的第2部分。SN/T 5643已经发 布了以下部分: ———第1部分:砷、镉、汞、铅含量的测定 X射线荧光光谱法; ———第2部分:碱性嫩黄O的测定 拉曼光谱法; ———第3部分:苋菜红的测定 拉曼光谱法; ———第4部分:西布曲明的测定 拉曼光谱法; ———第5部分:4种真菌毒素含量的测定 生物芯片试剂盒法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:合肥海关技术中心、南京海关动植物与食品检测中心、上海海关动植物与食品检 验检疫技术中心、上海体育学院、上海安谱实验科技股份有限公司。 本文件起草人:韩芳、宋伟、林宏、雷雨甜、周典兵、王钰、陈磊、赵超敏、邓晓军、张翘楚。 ⅠSN/T5643.2—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 引 言 出口食品中化学污染物检测是为了提高出口食品的整体质量 ,降低因技术贸易壁垒导致的出口食 品被拒的风险 。为了保证出口食品的安全 ,促进出口食品的快速通关 ,建立出口食品中化学污染物的快 速检测标准方法体系已经成为出口食品监管机构的重要任务 。在这方面 ,我国已经建立了支撑出口食 品中化学污染物快速检测的标准方法体系 。在该标准方法体系中 ,S N/ /T 5 6 4 3《出口食品中化学污染 物的快速检测方法 》旨在建立适用于出口食品中化学污染物快速检测的 X射线荧光法 、拉曼光谱法 、生 物芯片试剂盒法 ,拟由五个部分构成 。 — — —第1部分:砷、镉、汞、铅的X射线荧光光谱法 。目的在于为出口食品中的重金属污染物提供 可快速定量的检测方法 。 — — —第2部分:碱性嫩黄 O的拉曼光谱法 。目的在于为出口饮料中的碱性嫩黄 O提供快速定性筛 查方法。 — — —第3部分:苋菜红的拉曼光谱法 。目的在于为出口饮料中的苋菜红提供快速定性筛查方法 。 — — —第4部分:西布曲明的拉曼光谱法 。目的在于为出口减肥茶中的西布曲明提供快速定性筛查 方法。 — — —第5部分:4种真菌毒素的生物芯片试剂盒法 。目的在于为出口食品中的真菌毒素提供可快 速定量跨类筛查方法 。 各部分之间的关系参见图 1。 图1 S N/T 5 6 4 3各部分之间关系 ⅢS N/T5 6 4 3.2—2 0 2 3̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 出口食品中化学污染物的快速检测方法 第2部分:碱性嫩黄O的测定 拉曼光谱法 1 范围 本文件规定了出口饮料中碱性嫩黄O的拉曼光谱快速测定方法。 本文件适用于果蔬汁饮料、复合果蔬汁饮料、水果饮料、果汁型碳酸饮料、果味型碳酸饮料、可乐型 碳酸饮料、电解质饮料、运动饮料、调味茶饮料、碳酸茶饮料、原味茶饮料、营养素饮料等饮料中碱性嫩黄 O的快速筛查。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 SN/T 3863 出口食品中水溶性碱性着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法原理 不同物质具有与其分子结构相对应的特征拉曼光谱。一般样品经稀释,复杂样品经液液萃取,加表 面增强试剂对信号增强,进行拉曼光谱扫描。与标准谱图库中的碱性嫩黄O特征拉曼位移(774 cm-1 ±10 cm-1、943 cm-1±10 cm-1、1 598 cm-1±10 cm-1)进行匹配识别,对样品中的碱性嫩黄O进行定 性判定。 5 材料和试剂 所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1 氯化钠(NaCl)。 5.2 氯金酸(AuCl3·HCl·4H2O)。 5.3 柠檬酸三钠(Na3C6H5O7)。 5.4 乙酸乙酯(C4H8O2)。 5.5 乙醇(CH3CH2OH)。 5.6 20%乙醇水溶液:量取20 mL乙醇并加水定容至100 mL。 5.7 0.01%氯金酸溶液:称取0.01 g氯金酸并加水定容至100 mL。 5.8 1%柠檬酸三钠溶液:称取1 g柠檬酸三钠并加水定容至100 mL。 1SN/T5643.2—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 5.9 表面增强试剂:金纳米粒子溶胶,或相当者。避光,4℃~20℃保存,有效期6个月。 注: 表面增强试剂的参考配制方法:金纳米粒子参考Frens法合成,具体步骤如下:在100 mL圆底烧瓶中加入聚四 氟乙烯磁力搅拌子和50 mL的0.01%氯金酸溶液(准确称取1 g氯金酸,加水定容至100 mL;移取1.0 mL,加 水定容至100 mL),将圆底烧瓶中溶液加热至沸腾后迅速加入0.4 mL的1%柠檬酸三钠水溶液(准确称取1 g 柠檬酸三钠,加水定容至100 mL),保持沸腾状态,加热回流30 min即可制得金纳米粒子,反应结束后冰浴冷 却,装入棕色试剂瓶中保存待用。本文件所述纳米表面增强试剂信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便, 在使用本文件时不做限定。方法使用者在使用替代试剂或操作步骤前,对其进行考察,应满足本文件规定的各 项性能指标。 5.10 促凝剂:称取5.85 g氯化钠,溶于100 mL水中,摇匀,备用,或配制成其他相当的无机盐溶液。 注: 本文件所述促凝剂信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便,在使用本文件时不做限定。方法使用者在使 用替代试剂或操作步骤前,对其进行考察,满足本文件规定的各项性能指标。 5.11 碱性嫩黄O标准品:C17H22N3Cl,CAS号:2465-27-2,纯度≥99%。 5.12 碱性嫩黄O标准储备溶液:精密称取碱性嫩黄O标准品100 mg(精确至0.1 mg),置于100 mL 容量瓶中,用乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1 000 μg/mL的标准储备液。于0 ℃~4 ℃条 件下避光保存,保存期为6个月。 5.13 碱性嫩黄O标准工作溶液:吸取1.0 mL碱性嫩黄O标准储备溶液于100 mL容量瓶中,用水定 容至刻度,混匀,使用时配制。 6 仪器设备 6.1 便携式拉曼光谱仪:具有稳频激光光源:发射波长为785 nm±1 nm,线宽<0.1 nm,能量 ≥250 mW;光谱分辨率≤15 cm-1;光谱响应范围应至少包括300 cm-1~1 800 cm-1;带荧光背景扣除 功能。 6.2 移液器:20 μL、100 μL、200 μL、1 mL、2 mL和5 mL。 6.3 涡旋振荡器。 6.4 离心机:转速≥8 000 r/min。 6.5 电子天平:感量为0.01 g和感量为0.000 1 g。 6.6 容量瓶:10 mL。 7 测定步骤 7.1 提取 7.1.1 一般饮料 称取1 g(精确至0.01 g)样品于10 mL容量瓶中,加水定容至10 mL,经涡旋混匀后,取全部液体 于离心管中,以8 000 r/min转速离心10 min,取上清液备用。 7.1.2 可乐型碳酸饮料、调味茶饮料、原味茶饮料、果蔬汁含量高于30%的饮料 称取1 g(精确至0.01 g)样品于15 mL离心管中,加入1.5 mL乙酸乙酯(5.4),2 g左右氯化钠 (5.1)(氯化钠加入量与样品质量比例为2∶1),涡旋1 min,4 000 r/min离心2 min。离心后取上层 0.5 mL,加入0.5 mL 20%乙醇水溶液(5.6),上下振摇30次(或涡旋30 s),静置分层(或4 000 r/min 离心30 s),取下层清液待测。 7.2 测定 2SN/T5643.2—2023