ICS67.040 CCSC53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5449—2022 出口植物源性食品中消螨多残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of meptyldinocap residues in Plant-origin foodstuffs for export— LC-MS/MS 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署发布 以正式出版文本为准以正式出版文本为准前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:中华人民共和国深圳海关、中国检验检疫科学研究院、深圳市检验检疫科学研 究院。 本文件主要起草人:吴凤琪、李荷丽、韩世鹤、沈金灿、洪小柳、侯乐锡、付立赢、李立。 ⅠSN/T5449—2022 以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源性食品中消螨多残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本文件规定了出口植物源食品中消螨多的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于苹果、黄瓜、生菜、橙、葡萄、西葫芦、草莓、大米中消螨多残留量的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语与定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 试样中的消螨多用乙酸乙酯提取后,进行碱水解转化为2,4-二硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚(2,4- DNOP),采用LC-MS/MS进行定性定量分析。外标法定量。 5 试剂和材料 除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1 乙酸乙酯:色谱纯。 5.2 甲醇:色谱纯。 5.3 甲醇水溶液(6+4,体积比):分别量取60 mL甲醇和40 mL纯净水定容至100 mL。 5.4 1%甲酸溶液:量取1 mL甲酸,用甲醇水溶液(5.3)定容至100 mL。 5.5 1%乙醇胺溶液:量取1 mL乙醇胺,用甲醇水溶液(5.3)定容至100 mL。 5.6 消螨多(Meptyldinocap):分子式:C18H24N2O6,CAS号131-72-6; 纯度大于或等于99.0%;2,4-二 硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚(Meptyldinocap-Phenol):分子式:C14H20N2O5,CAS号3687-22-7; 纯度大于 或等于99.0%。 5.7 标准储备溶液:准确称取10 mg消螨多(2,4-DNOPC)(精确到0.1 mg)于10 mL容量瓶中,用甲 醇溶解并定容至刻度,配置成浓度为1 mg/mL的标准储备液,于-18 ℃备用,有效期3个月。 5.8 消螨多标准工作溶液:吸取适量的上述标准溶液,加至空白样品基质中,配置0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L、0.200 mg/L消螨多标准工作曲线,按8.1和8.2同步进行前处理。 5.9 微孔滤膜:0.22 μm,有机系。 1SN/T5449—2022 以正式出版文本为准6 仪器与设备 6.1 液相色谱串联质谱仪:配有ESI源; 6.2 分析天平:感量分别为0.000 1 g和0.01 g; 6.3 均质器; 6.4 离心机:转速不低于4 500 r/min; 6.5 涡旋混合器; 6.6 氮吹仪。 7 试样制备与保存 7.1 水果蔬菜等含水量高的样品 取有代表性样品500 g,用组织捣碎机将样品加工成浆状,混匀,均分2份后装入洁净的盛样容器 内,防止样品受到污染或发生残留物含量的变化,密封并标明标记,于-18 ℃以下冷冻保存。 7.2 大米等含水量低的样品 取有代表性样品500 g,用粉碎机充分粉碎,混匀,均分2份后装入洁净的盛样容器内,防止样品受 到污染或发生残留物含量的变化,密封并标明标记,常温保存。 8 测定步骤 8.1 提取 称取试样10.0 g(精确至0.01 g),置于50 mL离心管中,加入10 mL乙酸乙酯、5 g氯化钠、 15 000 r/min均质2 min,4500 r/min离心5 min,静置。 8.2 水解、净化 取2 mL上清液,35 ℃氮吹至近干,加入1 mL 1%乙醇胺溶液(5.5),超声15 min,4 500 r/min离 心5 min。取0.5 mL上清液,用1%甲酸溶液(5.4)调pH值至中性(经pH计测量)、用甲醇水溶液 (5.3)定容至1 mL,4 500 r/min离心5 min,过0.22 μm滤膜(5.9),上机。 8.3 测定 8.3.1 液相色谱/质谱条件 8.3.1.1 色谱柱:C18,150 mm×2.1 mm(内径),3.5 μm,或性能相当者。 8.3.1.2 柱温:室温。 8.3.1.3 进样量:5 μL。 8.3.1.4 流动相:水(0.1%甲酸):甲醇=1∶9。 8.3.1.5 流速:0.3 mL/min。 8.3.1.6 质谱条件:参见附录A。 2SN/T5449—2022 以正式出版文本为准8.3.2 液相色谱 质谱/质谱测定 8.3.2.1 定性测定 按照液相色谱 质谱/质谱条件测定样品和基质标准工作溶液,如果检测的质量色谱峰保留时间和 标准品保留时间相差不超过±2.5%,定性离子对的相对丰度(是用相对于最强离子丰度的强度百分比 表示)与浓度相对于基质标准工作溶液的相对丰度一致,相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围,则 可判断样品中存在相应的被测物。 表1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.3.2.2 定量测定 根据试样中被测物含量情况,选取响应值相近的基质标准工作液一起进行色谱分析。基质标准工 作液和待测液中2,4-DNOP的响应值应在仪器的线性响应范围内。在上述色谱条件下2,4-DNOP的 参考保留时间为5.45 min。采用峰面积进行定量,监测离子对和定量离子对见表2。 表2 2,4-DNOP的监测离子对和定量离子对 化合物中英文名称参考保 留时间/ min母离子/ (m/z)子离子/ (m/z)碰撞能量 (CE)/eV 2,4-二硝基-6-(1-甲基庚基)苯酚 2,4-DNOP5.45295.3 134.2* -25 295.3 193.1 -35 * 表示定量离子对。 8.3.2.3 空白试验 除不加试样外,均按上述操作步骤进行。 8.4 结果计算和表述 按数据处理软件处理或式(1)计算试样中消螨多的残留量: Xi=ci×V m×1 000 1 000…………………………( 1 ) 式中: Xi———试样中待测组分的含量,单位为微克每千克(μg/kg); Ci———从基质标准曲线上得到的样液中分析物的含量,单位为微克每升(μg/L); V———样品定容体积,单位为毫升(mL); m———最终样液代表的试样量,单位为克(g); 注: 计算结果应扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留两位有效数字。 3SN/T5449—2022 以正式出版文本为准8.5 定量限、回收率 8.5.1 定量限 本方法对蔬菜、水果等中消螨多残留量的定量限均为0.010 mg/kg。 8.6.2 回收率 植物源食品中消螨多回收率见表3。 表3 植物源食品中消螨多回收率 化合物 基质添加水平/ (mg/kg)回收范围/ %相对标准偏差/% 消螨多大米0.01 75.4~90.2 7.1 0.02 78.7~83.1 2 0.1 73.7~84.7 4.8 生菜0.01 71.4~90.1 9.7 0.02 71.5~86.1 6.8 0.1 73.2~82.8 5.2 黄瓜0.01 73.6~80.4 9 0.02 77.8~97.5 7.2 0.1 72.1~84 9.8 橙0.01 77.0~90.4 11.4 0.02 72.0~85.6 6.7 0.1 76.7~85.2 3.7 葡萄0.01 65.3~89.7 9.3 0.02 86.5~91.5 4.2 0.1 75.4~90.6 6.5 0.5 95.4~106.5 2.1 1 95.8~115.7 7.5 西红柿0.01 77.1~92.0 6.6 0.02 76.5~97.7 8.7 0.1 85.5~89.7 2.2 草莓0.1 73.2~88.5 6.4 1 88.5~94.8 2.7 3 104.0~114.3 3 4SN/T5449—2022 以正式出版文本为准