ICS67.050 CCSX 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5448—2022 出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其 代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法 Determination of nitrapyrin pesticide and metabolites residues in foods of plant origin for export Gas chromatography-tandem mass spectrometry method 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署发布 以正式出版文本为准以正式出版文本为准前 言 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。 本 文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 》的 规定起草 。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口 。 本文件起草单位 :中华人民共和国广州海关 。 本文件主要起草人 :韩世鹤、陈捷、杨洋、孙灵慧、李立、庄嘉、何曼莉。 ⅠS N/T5 4 4 8—2 0 2 2 以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其 代谢物的测定 气相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本文件规定了出口植物源性食品中三氯甲基吡啶及其代谢物6-氯吡啶-2-羧酸的气相色谱-质谱/ 质谱测定方法。 本文件适用于小麦、高粱、大米、玉米、生菜、柑橘、甜玉米、开心果仁和爆谷中三氯甲基吡啶及其代 谢物6-氯吡啶-2-羧酸的定性定量测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中的残留物采用酸性乙腈提取,QuEChERS方法净化后经甲酯化衍生,气相色谱-质谱/质谱 仪测定,基质匹配内标法定量。 5 试剂和材料 所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为GB/T 6682—2008规定的一级水。 5.1 乙腈:色谱纯。 5.2 乙酸乙酯:色谱纯。 5.3 甲醇:色谱纯。 5.4 海砂:颗粒度0.5 mm~1 mm。 5.5 氯化钠。 5.6 无水硫酸镁。 5.7 无水硫酸钠:经650 ℃烧灼4 h,在干燥器内冷却至室温后储于密封容器中备用。 5.8 浓硫酸。 5.9 甲酸。 5.10 饱和氯化钠溶液:称取36 g氯化钠,溶于100 mL水中。 5.11 2%硫酸钠溶液:称取2 g硫酸钠,溶于100 mL水中。 1SN/T5448—2022 以正式出版文本为准5.12 标准物质: 5.12.1 三氯甲基吡啶(Nitrapyrin),CAS号1929-82-4,分子式:C6H3Cl4N,纯度大于或等于99%, 6-氯吡啶-2-羧酸(6-Chloro-2-pyridinecarboxylic Acid),CAS号4684-94-0,分子式:C6H4ClNO2,纯度大 于或等于99%。 5.12.2 内标物:2-吡啶甲酸甲酯(Methyl picolinate),CAS号2459-07-6,分子式:C7H7NO2,纯度大于 或等于98%。 5.13 空白基质溶液:用不含三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸残留的样品,除不加内标外,按照8.1、 8.2和8.3中规定进行操作制备空白基质溶液。 5.14 标准溶液 5.14.1 标准储备液(1 000 mg/L):分别准确称取10 mg(精确到0.1 mg)三氯甲基吡啶和6-氯吡啶- 2-羧酸标准物质,用甲醇溶解并定容至10 mL,避光-18 ℃冰箱内保存。 5.14.2 中间标准储备液(40 mg/L):分别准确吸取适量标准储备液,用甲醇稀释配制成40 mg/L的中 间标准储备液,避光-18 ℃冰箱内保存。 5.14.3 衍生混合标准使用液(20 mg/L):分别准确移取0.50 mL三氯甲基吡啶和6-氯吡啶-2-羧酸 (5.14.2)于具塞比色管中,除不加内标外,按照8.3步骤衍生,用空白基质液(5.13)定容至1.0 mL,此 衍生混合标准浓度为20 mg/L,现用现配。 5.15 内标溶液(10 mg/L):准确称取10 mg(精确至0.1 mg)2-吡啶甲酸甲酯,用乙酸乙酯溶解并至 10 mL,混匀为内标储备液。内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至10 mg/L为内标溶液。 5.16 材料 5.16.1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA):40μm~60μm。 5.16.2 十八烷基硅烷键合硅胶(C18):40μm~60μm。 5.16.3 石墨化炭黑(GCB):40μm~120μm。 5.16.4 微孔滤膜:13 mm×0.22 μm,有机相。 6 仪器和设备 6.1 气相色谱-三重四极杆质谱联用仪:配有电子轰击源(EI)。 6.2 分析天平:感量分别为0.000 1 g和0.01 g。 6.3 离心机:转速不低于4 500 r/min。 6.4 组织捣碎机。 6.5 水平振荡器:振荡频次不低于400 r/min。 6.6 旋涡混匀器。 6.7 加热水浴摇床。 6.8 氮吹仪:可控温。 7 试样制备与保存 7.1 试样的制备 7.1.1 生菜、柑橘、甜玉米(鲜食玉米)、爆谷(爆米花)、开心果仁 取代表性样品约500 g,放入组织捣碎机中捣碎,装入聚乙烯瓶或袋中,密封并标明标记。 7.1.2 小麦、高粱、大米、玉米(干) 取代表性样品约500 g,粉碎后使其全部可通过425 μm的标准网筛,放入聚乙烯瓶或袋中,密封并 2SN/T5448—2022 以正式出版文本为准标明标记。 7.2 试样的保存 将试样按照测试和备用分别存放。于-18 ℃条件下保存。在抽样及制样的操作过程中,应防止样 品受到污染或发生残留物含量的变化。 8 测定步骤 8.1 提取 8.1.1 生菜、柑橘、甜玉米(鲜食玉米) 称取样品10 g(精确至0.01 g)至50 mL离心管中,加入10 mL乙腈、0.1 mL甲酸,涡旋1 min,于 振荡器(震荡频次约300 r/min)震摇提取15 min,加入3 g氯化钠,再震摇5 min后,4 500 r/min离心 5 min,取上清液4 mL,待净化。 8.1.2 小麦、高粱、大米、玉米(干)、爆谷(爆米花)、开心果仁 称取样品5 g(精确至0.01 g)至50 mL离心管中,加入15 g海砂、5 mL水涡旋混匀,静置30 min, 加入10 mL乙腈、0.1 mL甲酸,涡旋1 min,于振荡器震摇提取15 min,加入3 g氯化钠后再震摇5 min 后,4 500 r/min离心5 min,取上清液4 mL,待净化。 8.2 净化 将4 mL待净化样液加入到内含50 mg PSA,100 mg C18,100 mg GCB,MgSO4 200 mg的10 mL 塑料离心管中,涡旋混匀1 min,4 500 r/min离心5 min,准确吸取2 mL净化液于10 mL试管中,于 40 ℃水浴中氮气吹干后迅速加入1 mL甲醇震荡溶解残渣,待衍生。 8.3 衍生 将1 mL待衍生液(8.2)置于冰水浴中,缓慢加入200 μL浓硫酸,55 ℃下衍生30 min,衍生溶液在 50 ℃水浴吹氮至近干,加5 mL饱和氯化钠溶液(5.10)振荡溶解,转移至50 mL离心管中;衍生试管再 用5 mL乙酸乙酯进行洗涤后倒入同一离心管中振荡提取3 min,于4 500 r/min离心5 min,取上清液 置于干净的50 mL另一离心管中,用乙酸乙酯再重复提取两次,每次加乙酸乙酯3 mL,合并提取液后 用2 mL 2%硫酸钠溶液洗涤,静置分层。取乙酸乙酯层过装有无水硫酸钠的漏斗,收集全部滤液。在 40±2 ℃下氮吹浓缩至约1 mL,转移至2 mL刻度试管,加入40 μL内标溶液(5.15)(相当于2-吡啶甲 酸甲酯400 ng),用乙酸乙酯溶解并定容至2 mL,过0.2 μm微孔滤膜,待GC-MS/MS分析。 8.4 测定 8.4.1 仪器参考条件 8.4.1.1 色谱柱:35%-苯基-聚硅氧烷石英毛细管柱;30 m×0.25 mm×0.25 μm,或相当者。 8.4.1.2 升温程序:70 ℃保持1.5 min,然后以20 ℃/min程序升温至180 ℃,再以5 ℃/min升温至 210 ℃,再以25 ℃/min升温至280 ℃,保持5 min。 8.4.1.3 载气:氦气,纯度≥99.999%,流速1.2 mL/min。 8.4.1.4 进样口温度:250 ℃。 8.4.1.5 进样量:1 μL。 3SN/T5448—2022 以正式出版文本为准8.4.1.6 进样方式:不分流进样,2 min后开阀。 8.4.1.7 电子轰击源:70 eV。 8.4.1.8 离子源温度:230 ℃。 8.4.1.9 传输线温度:280 ℃。 8.4.1.10 溶剂延迟:3 min。 8.4