̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э I C S6 7.0 5 0 C C SX0 4 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N/T4 5 4 4.3—2 0 2 3 商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法三 C o mm e r c i a l K i t M e t h o d—A e r o b i c C o u n t—T e s t m e t h o d Ⅲ 2 0 2 3-1 1-0 1发布 2 0 2 4-0 5-0 1实施 中华人民共和国海关总署 发 布̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T 4544《商品化试剂盒检测方法 菌落总数》的第3部分。SN/T 4544已经发布了 以下部分: ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法一。 ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法二。 ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法三。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:中国海关科学技术研究中心,北京美正生物科技有限公司。 本文件主要起草人:付溥博、曾静、汪琦、徐蕾蕊、陶文靖、马丹、李丹、曲连海。 ⅠSN/T4544.3—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 引 言 菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,可以用来预测 食品耐存放程度或期限,通过观察细菌在食品中繁殖的动态,可为对被检样品进行卫生学评价提供 依据。 SN/T 4544拟由以下3个部分构成。 ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法一。 ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法二。 ———商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法三。 ⅢSN/T4544.3—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э ̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法三 1 范围 本文件规定了食品中菌落总数检验测试片1)的检测方法。 本文件适用于食品中菌落总数的测定。 1) 本文件所用试剂盒为北京美正生物科技有限公司生产的菌落总数检验测试片(MicroFast􀆿 AC)。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 27405 实验室质量控制规范 食品微生物检测 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 技术概要 菌落总数检验测试片是一种预先制备好的培养基系统,含有标准的培养基和氧化三苯四氮唑 (TTC)指示剂,菌落在测试片上呈红色,这样可增强菌落计数效果。 5 仪器和设备 除微生物实验室常规灭菌和设备外,其他设备和材料如下。 5.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃、30 ℃±1 ℃。 5.2 冰箱:2 ℃~5 ℃。 5.3 天平:感量0.1 g。 5.4 振荡器。 5.5 均质器。 5.6 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL刻度)、10 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。 5.7 无菌锥形瓶或等量容器:500 mL、250 mL。 5.8 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 5.9 放大镜或(和)菌落计数器。 1SN/T4544.3—2023̾ൣयѢྟ஠ఴ˝э 6 试剂和材料 6.1 菌落总数测试片 菌落总数测试片,参照SN/T 2775和SN/T 3266进行评价,具体评价结果见附录A。 6.2 磷酸盐缓冲稀释液(PBS) 贮存液:称取34.0 g的磷酸二氢钾溶于500 mL蒸馏水中,用大约175 mL的1 mol/L氢氧化钠溶 液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1 000 mL后贮存于冰箱。 稀释液:取贮存液1.25 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL,分装于适宜容器中,121 ℃高压灭菌 15 min。 6.3 1 mol/L NaOH 称取40 g NaOH溶于1 000 mL蒸馏水中。 6.4 1 mol/L HCl 移取浓盐酸90 mL,用蒸馏水稀释到1 000 mL。 7 检验程序 菌落总数检验测试片检测方法程序见图1。 2SN/T4544.3—2023