ICS 67.050 SN CCS X 04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1628—2024 代替SN/T1628—2005 出口动物源食品中氯氰碘柳胺 残留量的测定 n foodstuffs of animal origin for export 2024-12-31发布 2025-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T 1628—2024 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替SN/T1628一2005《进出口肉及肉制品中氯氰碘柳胺残留量测定方法 高效液相色谱 法》，与SN/T1628一2005相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： 更改了文件名称为《出口动物源食品中氯氰碘柳胺残留量的测定》； 更改了范围，检测基质由原来的2种增加到11种。包括牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、牛奶、羊 肌肉、羊脂肪、羊肝、羊肾、羊奶和火腿肠（见第1章；2005年版的第1章）； -增加了液相色谱-质谱/质谱确证方法，降低了方法的定量限（见8.4）； 更改了提取方法（见8.1；2005年版的2.4.1）； 更改了净化方式（见8.2；2005年版的2.4.2）。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国石家庄海关。 本文件主要起草人：于趁、刘蓓蕾、马育松、艾连峰、贾海涛、窦彩云、姚春毅、陈瑞春、郭春海、 杨亚君。 本文件于2005年首次发布为SN/T1628 5，本次为第一次修订。 以正式出版 SN/T 1628—2024 出口动物源食品中氯氰碘柳胺 残留量的测定 1范围 本文件描述了出口动物源食品中氯氰碘柳胺残留量测定的高效液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱 确证方法。 本文件适用于牛奶、牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、羊奶、羊肌肉、羊脂肪、羊肝、羊肾和火腿肠中氯氰 碘柳胺残留量的测定和确证。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方氵 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定 4方法提要 正式出版文本 样品中的分析物用正已烷饱和的乙腈提取，提取液经混合型强阴离子固相萃取柱净化，氮吹近干后 用乙睛定容，供液相色谱测定及液相色谱-质谱/质谱确证，外标法定量。 5 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.12 乙睛：色谱纯。 5.2 正已烷：色谱纯。 5.3 甲醇：色谱纯。 5.4 三乙胺：色谱纯。 5.5 甲酸：色谱纯。 5.6 磷酸：优级纯。 5.7 无水硫酸钠：650℃烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 5.8 氯化钠。 5.9 乙腈（5.1），用正已烷（5.2）饱和。 5.10 标准品：氯氰碘柳胺（closantel,C22H14Cl2I2N2O2，CAS号：57808-65-8），纯度大于或等于98.0%。 5.11 标准储备液：精确称取适量标准品，用乙（5.1）配制成质量浓度为0.5mg/mL的标准储备液， 1 SN/T 1628—2024 1℃～4℃下保存，保存期为1年。 5.12标准中间工作液：取标准储备液（5.11)1.00mL至50mL容量瓶中，用乙腈（5.1）定容至刻度，配 制成标准中间工作液，质量浓度为10.0ug/mL，1℃～4℃下保存，保存期为3个月。 5.13标准工作溶液：根据试验需要吸取适量的标准中间工作液（5.12），用乙睛（5.1)稀释成适当质量浓 度的一系列标准工作溶液，现用现配。 5.14混合型强阴离子固相萃取柱（MAX固相萃取柱）：60mg，3mL；或相当者。 5.15微孔滤膜：0.22um，有机相型。 6仪器和设备 6.1 液相色谱仪：配有荧光检测器， 6.2液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 6.3 电子天平：感量为0.0001g和0.01g。 6.4离心机：最高转速不低于10000r/min。 6.5均质器：最高转速不低于10000r/min。 6.6氮吹仪。 6.7[ 固相萃取装置。 6.8 聚丙烯离心管：50mL，具塞。 6.9 10mL玻璃刻度试管。 7试样制备与保存 7.1讨 试样制备 出版文本为准 牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、羊肌肉、羊脂 肪 方、羊肝、羊肾和火腿肠放入刀式研磨仪均质，充分混匀： 均分成2份，分别装人清洁容器内，并标明标记 7.2 试样保存 牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、羊肌肉、羊脂肪、羊肝、羊肾及火腿肠试样于一18℃以下保存；牛奶、羊 奶试样置于0℃～4℃保存。在抽样和制样操作中，应防止样品受到污染或发生含量变化，以保证试验 样品能代表总体样本。 8测定步骤 8.1提取 8.1.1牛奶和羊奶 称取试样约10g（精确至0.01g）于50mL离心管（6.8）中，加人3g氯化钠（5.8），20mL提取溶剂 （5.9），涡旋提取1min，10000r/min离心5min，取上清液，待净化 8.1.2牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、羊肌肉、羊脂肪、羊肝、羊肾和火腿肠 称取试样约5g（精确至0.01g）于50mL离心管（6.8）中，加20mL提取溶剂（5.9），5g无水硫酸钠 （5.7），10000r/min均质提取2min，10000r/min离心5min，将上清液转移至另一离心管（6.8）中，残 渣用10mL提取溶剂（5.9）重复以上提取过程，合并两次提取液于同一离心管中，待净化 2 SN/T 1628—2024 8.2净化 然后将样品提取液通过固相萃取柱，用3mL水和3mL甲醇（5.3)分别淋洗，弃去全部流出液，吹干，再 用6mL甲酸-乙睛（V：V=5：95）溶液洗脱，控制流速为1mL/min～2mL/min，收集全部流出液，于 50℃氮气吹至近干。用乙（5.1)定容至1.0mL，涡旋混匀后过0.22um有机相微孔滤膜，供液相色谱 测定和液相色谱-质谱/质谱确证。 8.3液相色谱测定 8.3.1 液相色谱参考条件 8.3.1.11 色谱柱：C18柱，应能适用于pH为2.5的流动相，150mmX4.6mm（内径），填料颗粒直径为 5 μm,或相当者。 8.3.1.2柱温：35℃。 8.3.1.3 流动相：取750mL乙腈（5.1）与250mL水混合，再加人0.5） ），混匀，脱气，用磷 酸（5.6)调节pH至2.5。 8.3.1.4流动相流速：1.0 mL/min。 8.3.1.5 荧光检测器波长：EX为335nm，EM为510nr 8.3.1.6 进样量：20μL。 8.3.2 定量测定 仪器的线性范围内，若其响应值超过线性范围，用乙腈（5.1)稀释到合适质量浓度后分析。将系列标准 工作溶液和待测溶液分别注入高效液相色谱仪中。上述色谱条件下，氯氰碘柳胺的参考保留时间约为 15.8min，液相色谱图见图A.1。 8.4 8.4.1 液相色谱条件 8.4.1.1 液相条件色谱柱：Cis柱，2.1mm×150mm（内径），粒径5μm，或相当者 8.4.1.2 进样量:5 uL 8.4.1.3 流动相：A为1mmol/L乙酸铵溶液，B为乙，梯度洗脱条件见表1。 表1液相色谱的梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 流速/(mL/min) 0.00 70 30 0.3 3.00 10 90 0.3 8.00 10 90 0.3 8.01 70 30 0.3 15.00 70 30 0.3 8.4.2质谱条件 质谱条件见附录B。 3 SN/T1628—2024 8.4.3液相色谱-质谱/质谱确证 按照上述色谱和质谱条件进行测定，待测样品中化合物色谱峰的保留时间与标准溶液相比变化范 围应在土2.5%之间，并且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子均出现；同时所选择离子的丰度比 与标准样品相关离子的相对丰度一致，最大偏差不超过表2规定的范围，且定性离子对的信噪比均3， 则可判定样品中存在对应的被测物。氯氰碘柳胺标准物质的液相色谱-质谱/质谱图及主要参考质谱参 数见图A.2和附录B。 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许误差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对误差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.5 空白试验 除不加试样外，按上述测定条件和步骤进行样品空白试验。 9结果计算和表述 气碘柳胺的残留量，计算结果应扣除空 白值： 000 ..(1) 1000 式中： X 试样中氯氰碘柳胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c 从标准工作曲线上得到的氯氰碘柳胺质量浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）； 样液溶液的定容体积，单位为毫升（mL） 1 000- 换算系数； m 最终定容体积试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。 10检出限、定量限和回收率 10.1 定量限和检出限 本文件中液相色谱法对牛肌肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、羊肌肉、羊脂肪、羊肝、羊肾和火腿肠的检出限 为20μg/kg，定量限为40μg/kg；牛奶和羊奶的检出限为10μg/kg，定量限为20μg/kg；液相色谱-质 谱/质谱确证法中各基质的检出限为5μg/kg。 10.2回收率 不同基质、不同添加水平的回收率范围见附录C。 4 SN/T1628—2024 附录A （资料性） 氯氰碘柳胺标准品色谱图 氯氰碘柳胺标准品色谱图见图A.1和图A.2。 强度/mV 0. 20