ICS 07.140 CCS C06 SF 中 华 人 民 共 和 国 司 法 行 政 行 业 标 准 SF/T 0171—2024 代替 SF/Z JD0107009 —2010 生物检材中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱 的液相色谱 -质谱定性定量 检验方法 Qualitative and quantitative determination of aconitine, mesaconitine, and hypaconitine in biological samples by liquid chromatography -mass spectrometry 2024 - 12 - 30发布 2025 - 06 - 01实施 中华人民共和国司法部 发布 SF/T 0171 —2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 原理 ................................ ................................ ............... 1 5 试剂、仪器和设备 ................................ ................................ ... 1 6 定性分析 ................................ ................................ ........... 2 7 定量分析 ................................ ................................ ........... 3 8 分析结果评价 ................................ ................................ ....... 4 附录A（资料性） 乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的相关资料 ................................ . 6 附录B（资料性） 目标物的相关信息及方法线性范围、检出限与定量限 ....................... 7 SF/T 0171 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替 SF/Z JD0107009 —2010《生物检材中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的测定 液相色谱 - 串联质谱法》 ，与SF/Z JD0107009 —2010相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： a) 增加了“乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的相关资料”（见附录 A）； b) 增加了目标物的“ CAS号”（见附录 B）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 司法鉴定科学研究院 提出。 本文件由 司法部信息中心 归口。 本文件起草单位： 司法鉴定科学研究院 、上海市公安局物证鉴定中心、山西医科大学 。 本文件主要起草人：陈航、 刘伟、沈敏、向平、严慧、卓先义、沈保华、王鑫、吴何坚 、梁晨、贠 克明。 本文件及 其所代替文件的历次版本发布情况为： —— 2010年首次发布为 SF/Z JD0107009 —2010； —— 本次为第一次修订 。 SF/T 0171 —2024 1 生物检材中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱 的液相色谱 -质谱定性定量 检验方法 1 范围 本文件描述了生物检材（血液、尿液和组织等）中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的液相色谱 -串联 质谱检验方法，包括原理，试剂、仪器和设备，定性分析 ，定量分析 以及分析结果评价。 本文件适用于生物检材（血液、尿液和组织等）中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的 定性分析和定量 分析。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 生物检材 在碱性条件下经乙醚 液液提取 后，采用液相色谱 -串联质谱 仪进行检测，经与平行操作的 空白样品和添加样品作对照，以保留时间 、质谱特征离子 对峰和离子对丰度比进行 定性分析；以定量离 子对峰面积为依据，采用 外标法进行定量分析。 5 试剂、仪器和 设备 试剂 试验用水应为符合GB/T 6682 规定的一级水。所用试剂 及要求如下 。 a) 乙腈：色谱纯。 b) 甲醇：色谱纯。 c) 盐酸：分析纯 。 d) 乙酸铵： 色谱纯。 e) 甲酸：含量≥98%，色谱纯。 f) 乙醚：分析纯 。 g) 硼砂溶液 ：pH值为9.2。 h) 含0.1%甲酸的20 mmol/L乙酸铵缓冲溶液：分别取乙酸铵 1.54 g和甲酸1 mL，置于1000 mL 容量瓶中，加水 溶解并定容 至刻度，摇匀备用， pH值约为4。 i) 标准物质溶液 ： 1) 标准物质储备溶液：分别精密称取乌头碱、新乌头碱 和次乌头碱（纯度均 ≥98%）标准物 质各适量，用含 0.05%盐酸的甲醇溶液配成 1.0 mg/mL的标准物质储备溶液。密封，置于 冰箱中冷冻保存，有效期 12个月，或采用市售标准溶液 ； 2) 标准物质工作溶液：试验中所用其他浓度的标准物质工作溶液均由符合 5.1 i）1）的标 准物质储备溶液 用含0.05%盐酸的甲醇溶液稀释 得到。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效 期3个月。 SF/T 0171 —2024 2 仪器和设备 仪器和设备及要求如下。 a) 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源 （ESI）。 b) 电子天平：分度值≤0.1 mg。 c) 旋涡混合器。 d) 离心机。 e) 恒温水浴锅。 f) 移液器。 6 定性分析 样品前处理 6.1.1 检材样品 6.1.1.1 体液样品 取血液（或尿液）0.5 mL，加入硼砂溶液 1 mL，涡旋混匀，再加入乙醚 3 mL，涡旋混匀， 2500 r/min 离心3 min，取有机层于60 ℃水浴中挥干， 残留物用乙腈 ∶含0.1%甲酸的20 mmol/L乙酸铵缓冲 溶液 （体 积比7∶3）200 μL复溶，供液相色谱 -串联质谱 仪分析。 6.1.1.2 组织样品 称取剪碎（或匀浆后）组织 0.5 g，加入硼砂溶液 1 mL，浸泡半小时，按 6.1.1.1的方法操作。 6.1.2 空白样品 移取（或称取）空白血液（或尿液） 0.5 mL（或相似空白组织 0.5 g）作为空白样品，按 6.1.1.1（或 6.1.1.2）的方法，与检材样品平行操作。 6.1.3 添加样品 移取（或称取）空白血液（或尿液） 0.5 mL（或相似空白组织 0.5 g），添加标准物质工作溶液， 配制成1 ng/mL（或1 ng/g）的添加样品，然后按 6.1.1.1（或6.1.1.2）的方法，与检材样品平行操作。 仪器检测 6.2.1 仪器条件 6.2.1.1 液相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器等实际情况进行调整 。 a) 色谱柱： C18柱（250 mm×2.0 mm，5 µm）或其他等效柱。 b) 流动相： 流动相A为含0.1%甲酸的20 mmol/L 乙酸铵缓冲溶液，流动相 B为乙腈；采用等度 洗脱方法，流动相 A∶流动相 B＝30∶70。 c) 流速：0.2 mL/min。 d) 柱温：室温 。 e) 进样量： 5 µL。 6.2.1.2 质谱条件 6.2.1.2.1 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器等实际情况进行调整。 a) 离子源：电喷雾电离 -正离子模式 （ESI+）。 b) 检测方式：多反应监测 （MRM）。 c) 离子源电压： 5500 V。 d) 碰撞气、气帘气、雾化气 和辅助气均为高纯氮气，使用前调节各气流流量以使质谱灵敏度达到 检测要求 。 SF/T 0171 —2024 3 e) 去簇电压 和碰撞能量优化至最佳灵敏度 。 6.2.1.2.2 在符合6.2.1.1和6.2.1.2液相色谱条件和质谱条件下，目标物的质谱