ICS 07.140 CCS C06 SF 中 华 人 民 共 和 国 司 法 行 政 行 业 标 准 SF/T 0166—2024 毛发中安非拉酮等 7种减肥药的液相色谱 - 质谱检验方法 Determination of seven weight -loss drugs including amfepramone in hair by liquid chromatography -mass spectrometry 2024 - 12 - 30发布 2025 - 06 - 01实施 中华人民共和国司法部 发布 SF/T 0166 —2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 原理 ................................ ................................ ............... 1 5 试剂、仪器和设备 ................................ ................................ ... 1 6 定性分析 ................................ ................................ ........... 2 7 定量分析 ................................ ................................ ........... 4 8 分析结果评价 ................................ ................................ ....... 5 附录A（资料性） 目标物的相关信息及方法线性范围、检出限与定量限 ....................... 7 SF/T 0166 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 司法鉴定科学研究 院提出。 本文件由 司法部信息中心归口。 本文件起草单位： 司法鉴定科学研究 院、中国药科大学、 福建警察学院。 本文件主要起草人： 王鑫、吴何坚、陈航、向平、沈敏、刘伟、严慧、沈保华、施妍、卓先义、狄 斌、苏梦翔、 孟梁。 SF/T 0166 —2024 1 毛发中安非拉酮 等7种减肥药的液相色谱 -质谱检验方法 1 范围 本文件描述 了毛发中安非拉酮 、苯甲曲秦 、芬氟拉明 、芬美曲秦 、芬特明、马吲哚和西布曲明 的液 相色谱-串联质谱 检验方法，包括 原理，试剂、仪器和设备，定性分析，定量分析以及分析结果评价。 本文件适用于毛发中安非拉酮 、苯甲曲秦 、芬氟拉明 、芬美曲秦 、芬特明、马吲哚和西布曲明的 定 性分析和定量分析。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 毛发样品经清洗和冷冻湿法研磨后，以超声法提取， 采用液相色谱 -串联质谱 仪进行检测，经与平 行操作的空白样品和添加样品作对照，以保留时间 、质谱特征离子 对峰和离子对丰度比进行 定性分析； 以定量离子对 峰面积或峰面积比值 为依据，采用 外标法或 内标法进行定量分析。 5 试剂、仪器和 设备 试剂 试验用水应为符合 GB/T 6682 规定的一级水。所用试剂及 要求如下 。 a) 甲醇：色谱纯。 b) 乙腈：色谱纯。 c) 甲酸：含量≥98%，色谱纯。 d) 乙酸铵：色谱纯。 e) 甲酸铵：色谱纯。 f) 丙酮：分析纯。 g) 溶液配制： 1) 含8%乙腈的2 mmol/L 甲酸铵缓冲溶液：称取甲酸铵 0.063 g，置于500 mL容量瓶中， 加水溶解， 然后加入 1%甲酸溶液 115 μL和乙腈40 mL， 最后加水定容至刻度， 摇匀备用， pH约为5.3； 2) 提取溶液：取甲醇、乙腈 、符合5.1 g）1）的含8%乙腈的2 mmol/L 甲酸铵缓冲溶液适量 配制体积比为 25∶25∶50的提取溶液 ； 3) 含0.1%甲酸的20 mmol/L 乙酸铵缓冲 溶液：分别取乙酸铵 1.54 g和甲酸1 mL，置于1000 mL容量瓶中，加水 溶解并定容至刻度，摇匀备用， pH约为4。 h) 标准物质溶液 ： 1) 标准物质 储备溶液 ：根据安非拉酮 、苯甲曲秦、芬美曲秦、芬特明、芬氟拉明 、马吲哚和 西布曲明 标准物质的纯度和盐型换算后，分别精密称取适量，用甲醇配制成质量浓度为SF/T 0166 —2024 2 1.0 mg/mL的标准物质储备溶液。 密封，置于冰箱中冷冻保存， 有效期12个月，或采用 市售标准溶液 ； 2) 标准物质工作溶液：试验中所用其 他浓度的标准 物质工作溶液均由 符合5.1 h）1）的标 准物质储备溶液用甲醇稀释 得到。密封，置于冰箱中冷藏保存， 有效期3个月。 i) 内标溶液 ： 1) 内标储备溶液： 精密称取地西泮 -d5（或其他合适内标物）适量， 用甲醇配制成 1.0 mg/mL 的内标储备溶液。 密封，置 于冰箱中冷冻保存， 有效期12个月，或采用市售标准溶液 ； 2) 内标工作溶液： 1 ng/mL的内标工作溶液 由符合5.1 i）1）的内标储备溶液用符合 5.1 g） 2）的提取溶液 稀释得到。密封，置于冰箱中冷藏保存， 有效期3个月。 仪器和设备 仪器和设备及要求如下 。 a) 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源 （ESI）。 b) 电子天平：分度值 ≤0.1 mg。 c) 离心机。 d) 超声波清洗仪 。 e) 研磨管。 f) 聚四氟乙烯滤膜： 0.22 μm。 g) 冷冻研磨仪 。 h) 移液器。 6 定性分析 样品前处理 6.1.1 检材样品 依次用适量的水和丙酮将毛发样品振荡洗涤两次，晾干后剪成约 1 mm段，称取毛发样品 20 mg于2 mL研磨管中，加研磨珠适量，再加 1 ng/mL内标工作溶液 1 mL，置冷冻研磨仪中粉碎，冰浴超声 30 min， 12000 r/min 离心3 min，取上清 液，经滤膜过滤，滤液供 液相色谱 -串联质谱 仪分析。 6.1.2 空白样品 称取空白毛发样品 20 mg作为空白样品， 按6.1.1的方法，与 检材样品平行操作。 6.1.3 添加样品 称取空白毛发样品 20 mg，添加100 ng/mL的标准物质工作溶液 10 μL， 配制成0.05 ng/mg 添加样品， 然后按6.1.1的方法，与检材样品平行操作。 仪器检测 6.2.1 仪器条件 6.2.1.1 液相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器等实际情况进行调整 。 a) 色谱柱： 五氟苯基 柱（100 mm×2.1 mm，5 μm）或其他等效柱 。 b) 流动相：流动相 A为含0.1%甲酸的20 mmol/L 乙酸铵缓冲溶液，流动相 B为乙腈；采用梯度 洗脱方法，梯度洗脱程序 见表1。 c) 柱温：室温 。 d) 进样量： 5 µL。 SF/T 0166 —2024 3 表1 流动相梯度洗脱程序 时间 min 流速 mL/min 流动相A 流动相B 0 0.25 60% 40% 2.0 0.25 60% 40% 5.5 0.60 10% 90% 13.0 0.60 10% 90% 13.5 0.25 60% 40% 14.0 0.25 60% 40% 6.2.1.2 质谱条件 6.2.1.2.1 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器等实际情况进行调整 。 a) 离子源：电喷雾电离 -正离子模式 （ESI+）。 b) 检测方式：多反应监测 （MRM）。 c) 离子源电压： 5500 V。 d) 碰撞气、气帘气、雾化气、辅助气 均为高纯氮气，使用前调节各气流流量以使质谱灵敏度达到 检测要求 。 e) 去簇电压、碰撞能量 优化至最