2 0 2 5 0 1 0 9 发 布 － － 2 0 2 5 0 5 0 1 － － 实 施 犬 发 情 鉴 定 技 术 规 程 4 1 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 1 1 . 2 2 0 C C S B 4 6 6 6 — 2 0 2 5 T e c h n i c a l c o d e o f p r a c t i c e f o r t h e d e t e c t i o n o f b i t c h e s e s t r u s Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４６６６—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出. 本文件由全国伴侣动物(宠物)标准化技术委员会(SAC/TC５４１)归口. 本文件起草单位:公安部南昌警犬基地、北京市动物疫病预防控制中心、北京小动物诊疗行业协会、北 京市标准化研究院、公安部昆明警犬基地、北京希诺谷生物科技有限公司. 本文件主要起草人:李川武、熊前、叶俊华、吴衍、韦海涛、刘朗、谢翔燕、余盼、王春亮、李涛、潘彩霞、李 强、杨前勇、万九生、赵建平. ⅠNY/T４６６６—２０２５ 犬发情鉴定技术规程 １　范围 本文件规定了犬发情鉴定的鉴定前准备、鉴定程序、判定规则和记录. 本文件适用于母犬的发情鉴定. ２　规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件. ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 发情　estrus 母犬发育到性成熟时所表现的一种周期性的性活动现象. ３􀆰２ 发情鉴定　estrusdetection 通过对母犬的发情情况进行鉴定,判断犬的发情状况及发情阶段. ３􀆰３ 无核角质化上皮细胞百分比　nucleusＧfreekeratinizedepithelialcells 阴道上皮无核角质化细胞数占总上皮细胞数的百分比. ４　鉴定前准备 ４􀆰１　场所 发情鉴定场所应保持安静,地面防滑并保持清洁卫生. ４􀆰２　犬 犬应自由活动,排空大小便. ４􀆰３　主要仪器和耗材 光学显微镜、载玻片、盖玻片、瑞氏Ｇ姬姆萨染液、医用超薄乳胶手套、医用棉签等,所有器械应经过消 毒处理. ５　鉴定程序 ５􀆰１　问询 ５􀆰１􀆰１　基本情况 基本情况如下: a)　犬的品种、年龄和体重; b)母犬以往发情、配种、受孕、分娩和产仔情况; c)阴道出现血样分泌物持续时间. ５􀆰１􀆰２　近期表现 母犬近一周内的饮食、精神状态和行为表现及大小便情况. ５􀆰２　外阴部检查 ５􀆰２􀆰１　由犬主人牵引母犬,让母犬自然站立. １NY/T４６６６—２０２５ ５􀆰２􀆰２　用温湿毛巾对母犬外阴部进行清洁. ５􀆰２􀆰３　触摸母犬阴唇,判断母犬外阴肿胀及阴唇柔软程度. ５􀆰２􀆰４　用食指和拇指张开阴门,将阴道腹侧壁暴露,观察阴道内壁颜色、毛细血管充血程度,以及阴门分 泌物的量、黏稠度和颜色. ５􀆰２􀆰５　触摸母犬外阴部或按压荐部,观察母犬尾根的偏移情况. ５􀆰３　阴道上皮细胞检测 ５􀆰３􀆰１　一只手托住母犬臀部并用拇指和食指将犬阴门分开,另一只手将浸泡过生理盐水的灭菌棉签斜向 上(约与水平方向呈６０°)插入阴道后,水平插入阴道深处,轻转棉签２圈~３圈,保证棉签头部沾取足量的 阴道上皮细胞. ５􀆰３􀆰２　将棉签头顺着载玻片长轴方向滚动,使棉球上的阴道上皮细胞均匀涂抹在载玻片上制成阴道涂 片,自然风干. ５􀆰３􀆰３　滴加瑞氏Ｇ姬姆萨A液(０􀆰５mL~０􀆰８mL)于风干的载玻片上,让染液覆盖整个标本,染色１min, 再将B液(１􀆰５mL~２mL)滴于A液上面,轻轻晃动载玻片,使两液充分混合,染色５min~１０min.之后 用生理盐水冲洗掉载玻片上的染色液,风干备检. ５􀆰３􀆰４　在光学显微镜下对阴道涂片进行观察,对角质化上皮细胞的边缘形态、核膜界限进行观察并统计, 观察不少于１００个上皮细胞,并对其中无核角质化细胞进行计数. ５􀆰３􀆰５　无核角质化上皮细胞百分比用P表示,按公式(１)计算. P＝n N×１００％ (１) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: P———无核角质化上皮细胞百分比,计算结果保留小数点后两位. n———无核角质化上皮细胞,单位为个. N———上皮细胞数,单位为个. ６　判定规则 ６􀆰１　发情前期 母犬外阴肿胀,触摸阴唇发硬,阴道内壁充血,排出血样分泌物,阴道涂片镜检无核角质化上皮细胞百 分比小于６０％,此期可判定为发情前期. ６􀆰２　发情期 母犬外阴肿胀达到最大,触摸阴唇柔软,阴道内壁泛白发亮,排出分泌物颜色为淡黄色,触摸母犬外阴 部或按压荐部,尾根偏向一侧,阴道涂片镜检无核角质化上皮细胞百分比在６０％～90%,此期可判定为发 情期. 6􀆰3　发情后期 母犬外阴部逐步收缩复原,阴道内偶见少量黑褐色分泌物排出,阴道涂片镜检可见少量有核角质化上 皮细胞,此期可判定为发情后期. ６􀆰４　休情期 母犬外阴无充血、无肿胀,阴道内无分泌物排出,阴道涂片镜检可见大量非角质化有核上皮细胞,此期 可判定为休情期. ７　记录 做好犬发情鉴定的相应记录,记录内容见附录A. ２NY/T４６６６—２０２５ 附　录　A (资料性) 母犬发情鉴定记录表 母犬发情鉴定记录表见表A􀆰１. 表A􀆰１　母犬发情鉴定记录表 鉴定次数 鉴定日期 犬主、联系方式及犬所在单位 阴道出现血样分泌物持续时间 外阴肿胀程度 阴唇柔软程度 阴道内壁颜色 阴道分泌物量 分泌物颜色 尾根偏移情况 无核角质化上皮细胞百分比 发情阶段判定 鉴定人员 备注 ３