2 0 2 5 0 1 0 9 发 布 － － 2 0 2 5 0 5 0 1 － － 实 施 S - 诱 抗 素 原 药 2 5 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 1 0 0 C C S G 4 5 5 0 — 2 0 2 5 S - A b s c i s i c a c i d t e c h n i c a l m a t e r i a l Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４５５０—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部种植业管理司提出. 本文件由全国农药标准化技术委员会(SAC/TC１３３)归口. 本文件起草单位:四川龙蟒福生科技有限责任公司、江西新瑞丰生化股份有限公司、四川金珠生态农 业科技有限公司、浙江世佳科技股份有限公司、河南三浦百草生物工程有限公司、陕西麦可罗生物科技有 限公司、沈阳沈化院测试技术有限公司. 本文件主要起草人:张嘉月、王敏、聂波、周昌辉、徐丽娟、杜巍、张楠、张丕龙、熊仁科. ⅠNY/T４５５０—２０２５ SＧ诱抗素原药 １　范围 本文件规定了SＧ诱抗素原药的技术要求、检验规则、验收和质量保证期以及标志、标签、包装、储运, 描述了SＧ诱抗素原药的试验方法. 本文件适用于SＧ诱抗素原药产品的质量控制. 注:SＧ诱抗素的其他名称、结构式和基本物化参数见附录A. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T１６００—２０２１　农药水分测定方法 GB/T１６０１　农药pH值的测定方法 GB/T１６０４　商品农药验收规则 GB/T１６０５—２００１　商品农药采样方法 GB３７９６　农药包装通则 GB/T８１７０—２００８　数值修约规则与极限数值的表示和判定 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 诱抗素　Abscisicacid SＧ诱抗素与RＧ对映体的总和. ４　技术要求 ４􀆰１　外观 白色至淡黄色粉末. ４􀆰２　技术指标 SＧ诱抗素原药应符合表１的要求. 表１　SＧ诱抗素原药技术指标 项　　目 指　　标 SＧ诱抗素质量分数,％ ≥９０􀆰０ 水分,％ ≤１􀆰０ 乙醇不溶物,％ ≤０􀆰５ pH ２􀆰０~５􀆰０ ５　试验方法 警示:使用本文件的人员应有实验室工作的实践经验.本文件并未指出所有的安全问题.使用者有 １NY/T４５５０—２０２５ 责任采取适当的安全和健康措施. ５􀆰１　一般规定 本文件所用试剂和水在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和蒸馏水. ５􀆰２　取样 按GB/T１６０５—２００１中５􀆰３􀆰１的规定执行.用随机数表法确定取样的包装件,最终取样量应不少于 １００g. ５􀆰３　鉴别试验 ５􀆰３􀆰１　红外光谱法 SＧ诱抗素原药与SＧ诱抗素标样在４０００cm－１~４００cm－１范围的红外吸收光谱图应没有明显区别.SＧ 诱抗素标样的红外光谱图见图１. 图１　SＧ诱抗素标样的红外光谱图 ５􀆰３􀆰２　高效液相色谱法 本鉴别试验可与SＧ诱抗素比例的测定同时进行.在相同的色谱操作条件下,试样溶液中某色谱峰的 保留时间与标样溶液中SＧ诱抗素的色谱峰的保留时间,其相对差应在１􀆰５％以内. ５􀆰４　外观 采用目测法测定. ５􀆰５　SＧ诱抗素质量分数 ５􀆰５􀆰１　诱抗素质量分数 ５􀆰５􀆰１􀆰１　方法提要 试样用流动相溶解,以甲醇＋磷酸水溶液为流动相,使用以C１８为填料的不锈钢柱和紫外检测器,在 波长２６０nm下,对试样中的诱抗素进行高效液相色谱分离,外标法定量. ５􀆰５􀆰１􀆰２　试剂和溶液 ５􀆰５􀆰１􀆰２􀆰１　甲醇:色谱级. ５􀆰５􀆰１􀆰２􀆰２　磷酸. ５􀆰５􀆰１􀆰２􀆰３　水:新蒸二次蒸馏水或超纯水. ５􀆰５􀆰１􀆰２􀆰４　磷酸水溶液:ψ(磷酸∶水)＝１∶１０００. ５􀆰５􀆰１􀆰２􀆰５　SＧ诱抗素标样:已知诱抗素质量分数,w≥９８􀆰０％. ５􀆰５􀆰１􀆰３　仪器 ２NY/T４５５０—２０２５ ５􀆰５􀆰１􀆰３􀆰１　高效液相色谱仪:具有可变波长紫外检测器. ５􀆰５􀆰１􀆰３􀆰２　色谱柱:２５０mm×４􀆰６mm(内径)不锈钢柱,内装C１８、５μm填充物(或具同等效果的色谱 柱). ５􀆰５􀆰１􀆰３􀆰３　超声波清洗器. ５􀆰５􀆰１􀆰３􀆰４　过滤器:滤膜孔径约０􀆰４５μm. ５􀆰５􀆰１􀆰４　高效液相色谱操作条件 ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰１　流动相:ψ(甲醇∶磷酸水溶液)＝４５∶５５. ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰２　流速:１􀆰２mL/min. ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰３　柱温:室温(温度变化应不大于２℃). ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰４　检测波长:２６０nm. ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰５　进样体积:５μL. ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰６　保留时间:诱抗素约１０􀆰３min. ５􀆰５􀆰１􀆰４􀆰７　上述操作参数是典型的,可根据不同仪器特点,对给定的操作参数作适当调整,以期获得最佳 效果.典型的SＧ诱抗素原药的高效液相色谱图见图２. 标引序号说明: １———诱抗素. 图２　SＧ诱抗素原药的高效液相色谱图 ５􀆰５􀆰１􀆰５　测定步骤 ５􀆰５􀆰１􀆰５􀆰１　标样溶液的制备 称取０􀆰０５g(精确至０􀆰０００１g)SＧ诱抗素标样,置于１００mL容量瓶中,加入４０mL流动相,超声波振 荡５min,冷却至室温,用流动相稀释至刻度,摇匀.用移液管移取上述溶液１０mL至５０mL容量瓶中, 用流动相稀释至刻度,摇匀. ５􀆰５􀆰１􀆰５􀆰２　试样溶液的制备 称取含SＧ诱抗素０􀆰０５g(精确至０􀆰０００１g)的试样,置于１００mL容量瓶中,加入４０mL流动相,超声 波振荡５min,冷却至室温,用流动相稀释至刻度,摇匀.用移液管移取上述溶液１０mL至５０mL容量瓶 中,用流动相稀释至刻度,摇匀. ５􀆰５􀆰１􀆰５􀆰３　测定 在上述操作条件下,待仪器稳定后,连续注入数针标样溶液,直至相邻两针诱抗素峰面积相对变化小 于１􀆰５％后,按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定. ５􀆰５􀆰１􀆰６　计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中诱抗素峰面积分别进行平均.试样中诱抗素的 质量分数按公式(１)计算. w１＝A２×m１×w A１×m２(１) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: w１———试样中诱抗素质量分数的数值,单位为百分号(％); ３NY/T４５５０—２０２５ A２———试样溶液中诱抗素峰面积的平均值; m１———SＧ诱抗素标样质量的数值,单位为克(g); w———标样中诱抗素质量分数的数值,单位为百分号(％); A１———标样溶液中诱抗素峰面积的平均值; m２———试样质量的数值,单位为克(g). ５􀆰５􀆰１􀆰７　允许差 ２次平行测定结果之差应不大于１􀆰２％,取其算术平均值作为测定结果. ５􀆰５􀆰２　SＧ诱抗素比例(在工艺发生变化时需进行重新测定) ５􀆰５􀆰２􀆰１　方法提要 试样用异丙醇溶解,使用手性柱对试样中的SＧ诱抗素和RＧ对映体进行正相高效液相色谱手性分离, 测定SＧ诱抗素比例. ５􀆰５􀆰２􀆰２　试剂和溶液 ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰１　正己烷:色谱级. ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰２　异丙醇:色谱级. ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰３　三氟乙酸. ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰４　三氟乙酸异丙醇溶液:ψ(三氟乙酸∶异丙醇)＝５∶１０００. ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰５　三氟乙酸乙醇溶液:ψ(三氟乙酸∶乙醇)＝５∶１０００. ５􀆰５􀆰２􀆰２􀆰６　诱抗素消旋体标样:已知质量分数,w≥９５􀆰０％. ５􀆰５􀆰２􀆰３　仪器 ５􀆰５􀆰２􀆰３􀆰１　高效液相色谱仪:具有可变波长紫外检测器. ５􀆰５􀆰２􀆰３􀆰２　超声波清洗器. ５􀆰５􀆰２􀆰３􀆰３　过滤器:滤膜孔径约０􀆰４５μm. ５􀆰５􀆰２􀆰４　高效液相色谱操作条件 ５􀆰５􀆰２􀆰４􀆰１　检测波长:２６０nm. ５􀆰５􀆰２􀆰４􀆰２　流速:１􀆰０mL/min. ５􀆰５􀆰２􀆰４􀆰３　进样体积:１０μL. ５􀆰５􀆰２􀆰４􀆰４　色谱柱、流动相、柱温及保留时间见表２. 表２　色谱柱、流动相、柱温及保留时间 方法 色谱柱 流动相 柱温,℃保留时间,min １２５０mm×４􀆰６mm(内径)不锈钢柱, 内装CHIRALPAKIC、５μm填充物ψ(正己烷∶三氟乙酸异丙醇溶液)＝８０∶２０３０±２RＧ对映体约５􀆰２ SＧ诱抗素约６􀆰２ ２２５０mm×４􀆰６mm(内径)不锈钢柱, 内装YMCCHIRALARTCelluloseＧSC、５μm填充物ψ(正己烷∶三氟乙酸乙醇溶液)＝９５∶５４０±２RＧ对映体约１５􀆰７ SＧ诱抗素约１８􀆰６ ３２５０mm×４􀆰６mm(内径)不锈钢柱, 内装CHIRALLPAKADＧH、５μm填充物ψ(正己烷∶异丙醇)＝９５∶５ ３０±２SＧ对映体约２７􀆰８ RＧ诱抗素约２８􀆰９ ４２５０mm×４􀆰６mm(内径)不锈钢柱, 内装CHIRALCELODＧH、５μm填充物ψ(正己烷∶三氟乙酸异丙醇溶液)＝９５∶５３０±２SＧ诱抗素约５􀆰９ RＧ对映体约７􀆰８ ５􀆰５􀆰２􀆰４􀆰４　上述操作参数是典型的,可根据不同仪器特点,对给定的操作参数作适当调整,以期获得最佳 效果.典型的诱抗素消旋体标样和SＧ诱抗素原药的正相手性高效液相色谱图见图３~图１０. ４NY/T４５５０—２０２５ 　　　　标引序号