2 0 2 5 0 1 0 9 发 布 － － 2 0 2 5 0 5 0 1 － － 实 施 玉 米 抗 旱 性 鉴 定 评 价 技 术 规 程 0 5 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 0 2 0 . 2 0 C C S B 4 4 7 3 — 2 0 2 5 T e c h n i c a l c o d e o f p r a c t i c e f o r c h a r a c t e r i z a t i o n a n d e v a l u a t i o n o f d r o u g h t t o l e r a n c e i n m a i z e Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４４７３—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口. 本文件起草单位:中国农业科学院作物科学研究所、新疆农业科学院粮食作物研究所. 本文件主要起草人:黎裕、孙宝成、王天宇、刘成、李春辉、王阳、唐怀君、李永祥、张登峰、谢小清、石云 素、宋燕春、张磊、刘旭洋. ⅠNY/T４４７３—２０２５ 玉米抗旱性鉴定评价技术规程 １　范围 本文件确立了玉米(ZeamayL􀆰)抗旱性鉴定评价程序,规定了玉米在种子萌发期、芽苗期、苗期、开花 期、灌浆期、全生育期等不同阶段的抗旱性鉴定评价操作指示,描述了过程记录、试验方法等证实方法. 本文件适用于玉米品种、育种材料和种质资源的抗旱性鉴定评价. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB４４０４􀆰１　粮食作物种子　第１部分:禾谷类 NY/T１１２１􀆰２２　土壤检测　第２２部分:土壤田间持水量的测定　环刀法 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 抗旱性　droughttolerance 在干旱胁迫环境下,玉米维持生长发育或形成产量的能力. ３􀆰２ 种子萌发期　germinationstage 种子吸水膨胀,至胚芽长度达到种子长度的一半或种子根长度与种子长度相等的阶段. ３􀆰３ 芽苗期　theperiodfromgerminationtoseedling 种子吸水膨胀开始萌发至三叶一心的阶段. ３􀆰４ 苗期　seedlingstage 种子发芽出土至生殖生长期开始的阶段. ３􀆰５ 开花期　floweringstage 从散粉或吐丝开始到散粉或吐丝结束的阶段. ３􀆰６ 灌浆期　grainfillingstage 玉米受精后,通过同化作用将淀粉、蛋白质和其他有机物质等储存在籽粒里的阶段. ３􀆰７ 全生育期　theperiodfromgerminationtomaturity 玉米种子发芽后,历经生长发育,形成下一代成熟种子的阶段. ４　玉米抗旱性鉴定评价程序 本文件针对玉米不同生育时期,规定了种子萌发期、芽苗期、苗期、开花期、灌浆期抗旱性鉴定评价操 作指示,每部分包括了干旱胁迫和对照处理方法、性状鉴定评价方法和相应抗旱指数计算方法.可根据不 １NY/T４４７３—２０２５ 同鉴定目的或需求,开展针对特定时期的玉米抗旱性鉴定. ５　玉米抗旱性鉴定评价 ５􀆰１　种子萌发期抗旱性鉴定评价 ５􀆰１􀆰１　种子准备 试验种子质量应符合GB４４０４􀆰１的要求.待测种子先用７５％(V/V)酒精溶液浸泡５min,用灭菌蒸 馏水冲洗２遍,再用２％次氯酸钠溶液消毒１０min,之后用灭菌蒸馏水冲洗３遍,用滤纸吸干附着水. ５􀆰１􀆰２　胁迫溶液配制 ２５℃环境下,将１５１􀆰４g的PEGＧ６０００溶解定容至１０００mL无离子水中,即获得－０􀆰３MPaPEGＧ ６０００水溶液;将１７８􀆰３g的聚乙二醇Ｇ６０００(PEGＧ６０００)溶解在１０００mL无离子水中,即获得－０􀆰４MPa PEGＧ６０００水溶液.－０􀆰４MPaPEGＧ６０００水溶液适用于玉米品种抗旱性鉴定,－０􀆰３MPa水溶液适用于 玉米种质资源和育种材料抗旱性鉴定. ５􀆰１􀆰３　胁迫与对照处理 种子放在有双层滤纸的灭菌玻璃培养皿中,加入适量的－０􀆰３MPa或－０􀆰４MPaPEGＧ６０００水溶液 (每个培养皿中加入相同量溶液),加盖,避免水分蒸发.在２５℃黑暗条件下进行萌发.３次重复,每个重 复１００粒.在对照处理中,采用以上类似方法,但用无离子水代替－０􀆰３MPa或－０􀆰４MPaPEGＧ６０００水 溶液. ５􀆰１􀆰４　种子萌发期抗旱指数计算 种子放入培养皿后第４８h、第９６h、第１４４h、第１９２h时调查萌发种子数.胚芽长度达到种子长度的 １/２,种子根长度约与种子长度相等,计为有效萌发.每次记录萌发种子数后,取走已计数的萌发种子,下 次不再重复计数.种子萌发期抗旱指数按公式(１)计算.种子萌发指数按公式(２)计算. DTIG＝PIS/PIC (１) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: DTIG———种子萌发期抗旱指数; PIS———胁迫条件下种子萌发指数; PIC———对照条件下种子萌发指数. PI＝(１􀆰００×nd２＋０􀆰７５×nd４＋０􀆰５０×nd６＋０􀆰２５×nd８)/N (２) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: PI　　　　　　　　———种子萌发指数; nd２、nd４、nd６和nd８———为种子放入培养皿后第４８h、９６h、１４４h、１９２h时统计的新增萌发种子数; １􀆰００、０􀆰７５、０􀆰５、０􀆰２５———换算系数; N ———种子总数. 计算出的抗旱指数保留２位小数. ５􀆰１􀆰５　种子萌发期抗旱性评价 种子萌发期的抗旱级别按种子萌发期抗旱指数(DTIG)进行评价,评价指标要求见表１. 表１　玉米种子萌发期的抗旱性评价指标 种子萌发期抗旱指数(DTIG) 抗旱性级别 ＞０􀆰９０ １(极强) ０􀆰７０~０􀆰９０ ２(强) ０􀆰３０~０􀆰６９ ３(中等) ０􀆰１０~０􀆰２９ ４(弱) ＜０􀆰１０ ５(极弱) ５􀆰２　芽苗期抗旱性鉴定评价 ５􀆰２􀆰１　种子与土壤准备 ２NY/T４４７３—２０２５ 试验种子质量应符合GB４４０４􀆰１的要求.按照１∶１比例进行营养土与石英砂或河沙(２０目~３０ 目)混配,要求配制的土壤土质疏松、无大颗粒、不含种子、无毒无菌、pH为６􀆰０~７􀆰５.按NY/T１１２１􀆰２２ 的规定测定土壤田间最大持水量(X,g/kg). ５􀆰２􀆰２　胁迫与对照处理 称取净重量为Ws的土壤(kg),加入重量为０􀆰４０×(X×Ws)的水(g),混匀,即相对含水量为最大持 水量４０％的胁迫用土壤,置于干旱胁迫处理组箱体(５２cm×３４cm×１５cm)中.称取净重量为Ws的 土壤(kg),加入重量为０􀆰７０×(X×Ws)的水(g),混匀,即相对含水量为最大持水量７０％的正常水分土 壤,置于正常水分对照组箱体中. ５􀆰２􀆰３　播种与幼苗培养 两组箱体同时播种.分排逐粒精细播种,３次重复.每个重复中每份材料播种５０粒,行距７cm,株距 ５cm,土壤厚度为１０cm,播种深度３cm,播后覆土覆膜.环境温度２５℃左右,避免强光照射和昼夜温差 过大的影响.待５０％种子发芽出土后揭膜. ５􀆰２􀆰４　芽苗期抗旱指数计算 在正常水分对照组有植株开始出现四叶一心时,同时统计对照组和干旱胁迫处理组材料达到三叶一 心时期的总植株数.基于成苗指数的芽苗期抗旱指数按公式(３)计算,成苗指数(EI)按公式(４)计算. DTIGS＝EIS/EIC (３) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: DTIGS———芽苗期抗旱指数; EIS———为胁迫条件下成苗指数; EIC———为对照条件下成苗指数. EI＝n/N (４) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: n———达到三叶期的植株数; N———播种种子总数. 计算保留２位小数. ５􀆰２􀆰５　芽苗期抗旱性评价 芽苗期的抗旱级别按芽苗期抗旱指数(DTIGS)进行评价,评价指标要求见表２. 表２　玉米芽苗期的抗旱性评价指标 芽苗期抗旱指数(DTIGS) 抗旱性级别 ＞０􀆰９０ １(极强) ０􀆰７０~０􀆰９０ ２(强) ０􀆰３０~０􀆰６９ ３(中等) ０􀆰１０~０􀆰２９ ４(弱) ＜０􀆰１０ ５(极弱) ５􀆰３　苗期抗旱性鉴定评价 ５􀆰３􀆰１　种子与土壤准备 试验种子质量应符合GB４４０４􀆰１的要求.按照１∶１比例进行营养土与石英砂或河沙(２０目~３０ 目)混配,要求配制的土壤土质疏松、无大颗粒、不含种子、无毒无菌、pH为６􀆰０~７􀆰５.按NY/T１１２１􀆰２２ 的规定测定土壤田间最大持水量(X,g/kg). ５􀆰３􀆰２　胁迫处理 称取净重量为Ws的土壤(kg),加入重量为０􀆰７０×(X×Ws)的水(g),混匀,即相对含水量为最大持 水量７０％的试验用土壤,置于箱体中.每一塑料箱中播种一种材料,３次重复.分排单粒播种,播种深度 ３cm,播后覆土覆膜.环境温度２５℃左右,避免强光照射和昼夜温差过大的影响.待５０％种子发芽出土 后揭膜,全部出苗后定留苗５０株.播种后停止灌水,至土壤含水量下降到田间最大持水量３０％,７２h后 ３NY/T４４７３—２０２５ 复水至土壤含水量达到最大持水量的７０％,终止胁迫.