2 0 2 5 0 1 0 9 发 布 － － 2 0 2 5 0 5 0 1 － － 实 施 小 麦 全 蚀 病 抗 性 鉴 定 技 术 规 程 0 4 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 0 2 0 . 0 1 C C S B 4 4 6 2 — 2 0 2 5 T e c h n i q u a l c o d e o f p r a c t i c e f o r r e s i s t a n c e e v a l u a t i o n o f w h e a t t o t a k e - a l l d i s e a s e Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４４６２—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草.　 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口. 本文件起草单位:中国农业科学院植物保护研究所. 本文件主要起草人:刘太国、张昊、刘博、高利、陈万权. ⅠNY/T４４６２—２０２５ 小麦全蚀病抗性鉴定技术规程 １　１　范围 本文件规定了小麦全蚀病抗性鉴定的鉴定程序、接种体制备、抗病性鉴定、病情调查、抗性评价、等技 术要求. 本文件适用于普通小麦(包括选育品种/系、地方品种、特殊遗传材料、近等基因系、重组自交系、DH 群体)、杂交小麦、其他栽培小麦种、野生小麦、小麦野生近缘种对小麦全蚀病抗性的田间鉴定和评价. ２　规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件. ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 小麦全蚀病　wheattakeＧall 由Gaeumannomycesgraminis(Sacc􀆰)Arx&Oliver引起的典型小麦根部病害,病原菌有３个变种, 禾顶囊壳小麦变种G􀆰graminisvar􀆰tritici、禾顶囊壳禾谷变种G􀆰graminisvar􀆰graminis和禾顶囊壳燕 麦变种G􀆰graminisvar􀆰avenae.在小麦品种抗全蚀病鉴定与评价中通常选用禾顶囊壳小麦变种 G􀆰graminisvar􀆰tritici进行接种. ３􀆰２ 变种　pathovar 病原在“种”下类群中在形态特征、对不同寄主的致病性、生理生化及某些遗传特征上有差异的群体. ４　鉴定程序 小麦全蚀病抗性鉴定程序包括接种体制备、鉴定选择、接种方法、严重度记载及标准、苗期或成株期抗 性评价和抗性评价阶段.程序流程如图１所示. ５　接种体制备 ５􀆰１　病原物分离 通常采用组织分离法从小麦全蚀病发病部位分离病原物.从发病小麦根部或茎基部切取病组织,用 １％的硝酸银溶液表面消毒３０s,置半量马铃薯葡萄糖琼脂(potatodextroseagar,PDA)培养基平板上 １９℃、１２h光周期条件下进行培养(３d~１６d),分离物经形态学特征鉴定,确定为小麦全蚀病菌后,进行 分离物纯化,经致病性测定后,转至PDA斜面培养基,直接保存或用石蜡封存于４℃条件下备用. ５􀆰２　病原物接种体的制备 将鉴定为G􀆰graminisvar􀆰tritici的菌株按附录A中A􀆰２的方法制成接种体备用. ６　抗病性鉴定 ６􀆰１　苗期鉴定 ６􀆰１􀆰１　小麦幼苗培养 选择籽粒饱满健康的待测小麦种子,２％次氯酸钠溶液中表面漂洗消毒２min,蒸馏水中漂洗３次,置 于培养皿中吸足水的３层滤纸上室温(２５±３)℃萌发２４h~４８h,备用. １NY/T４４６２—２０２５ 图１　小麦全蚀病抗性鉴定程序流程 ６􀆰１􀆰２　接种方法 ６􀆰１􀆰２􀆰１　试管法 取尖底、透明、容量１５mL塑料离心管,长１１５mm,直径１５mm,底部有排水孔,用棉球堵住排水孔, 装蛭石至９mL处,接入在PDA上培养２周~３周、菌落边缘处选取的菌饼(直径为１３mm),再加２cm~ ２􀆰５cm蛭石,将萌发４８h的待测品种种植于管内,每管３粒,再覆盖１cm蛭石,将试管捆好、固定于直立 试管架上,灌水,１８℃培养,每周每管浇入１０mL(体积比１∶３)的霍格兰氏大量元素溶液,２８d后,清洗植 株根部,去除蛭石,调查发病情况.鉴定试验设３次~４次重复,每个重复３０株. ６􀆰１􀆰２􀆰２　盆栽法 取方底或圆底、底部渐细、容量８００mL的塑料盆,装入体积比２∶１的营养土:蛭石混合物４００mL. 加入病麦粒或病谷粒(粉碎成０􀆰２mm~０􀆰５mm颗粒)与蛭石混合物(体积比≥０􀆰５％)１cm或２cm (４０mL/盆或８０mL/盆),再加入前述营养土蛭石混合物至７００mL,灌水至７５％土壤含水量,将５粒~１０ 粒萌发种子分散播种,覆土１５mm,将花盆置于１８℃培养２８d,每５~７d灌水１次.２８d后小心取出植 株,清洗根部,去除泥土或蛭石,调查发病情况.鉴定试验设３次~４次重复,每个重复３０株. ６􀆰２　成株期人工病圃设置和接种方法 病圃小区畦宽１５０cm,每鉴定材料种植１行,行长１００cm,行距３３cm,每隔２０个品种设１个感病对 照(小偃６号或其他本地高感品种),随机排列,重复３次.开沟后,先均匀播撒玉米砂培养基培养的１５g 接种体,然后播种３g~５g小麦种子覆土,正常田间管理.鉴定圃内不施用任何杀菌剂. ２NY/T４４６２—２０２５ ７　病情调查 ７􀆰１　调查时间 盆栽鉴定在播种４周后、病圃鉴定在灌浆期至乳熟期调查发病情况. ７􀆰２　调查方法 鉴定每份材料的发病状况,根据病害症状描述,以鉴定材料为单元逐株进行调查,记载严重度,调查样 本每份材料每次重复不得小于１５茎. ７􀆰３　病情分级 ７􀆰３􀆰１　苗期病情分级 苗期病情调查小麦根系,其严重度分级及对应的症状描述见表１. 表１　小麦全蚀病苗期严重度分级及其症状描述 严重度分级 症　状　描　述 ０ 　根部无症状 １ 　０＜黑根占总根＜２５％ ２ 　２５％≤黑根占总根＜５０％ ３ 　５０％≤黑根占总根＜７５％ ４ 　黑根占总根≥７５％ ５ 　所有根部及茎基变黑、变干 ７􀆰３􀆰２　成株期病情分级 田间病情调查小麦根系,其严重度分级及对应的症状描述见表２. 表２　小麦全蚀病成株期严重度分级及其症状描述 严重度分级 症　状　描　述 ０ 　根部无症状 １ 　０＜黑根占总根＜１０％ ２ 　１０％≤黑根占总根＜２５％ ３ 　２５％≤黑根占总根＜５０％ ４ 　黑根占总根≥５０％ ５ 　所有根均有病斑且病斑在茎基部表现 ６ 　所有根均有病斑,且病斑在茎基部、茎部均表现 ７ 　植株褪绿或严重矮化 ８ 　植株死亡或接近死亡 ７􀆰４　发病率和病情指数的计算与记载 根据６􀆰３描述的分级标准记载病情,按公式(１)计算病情指数(DI). DI＝∑(s×n) N×S×１００ (１) 式中: DI———病情指数; s———各病情级别的代表数值; n———各病情级别有植株(叶片)的数值,单位为株(片); N———调查总株(叶片)的数值,单位为株(片); S———最高级病情级别的代表数值. ８　抗性评价 ８􀆰１　鉴定有效性判别 ３NY/T４４６２—２０２５ 当鉴定圃中的感病或高感对照材料达到其相应感病程度(５级或６级)时,该批次鉴定视为有效. ８􀆰２　抗性评价标准 ８􀆰２􀆰１　苗期抗性评价 苗期根据鉴定材料的平均病情级别确定期对全蚀病的抗性水平,划分标准见表３. 表３　小麦全蚀病苗期抗性评价标准 平均严重度 抗性评价 平均严重度＝０ 　高抗(Highlyresistant,HR) ０＜平均严重度≤１ 　抗病(Resistant,R) １＜平均严重度≤２ 　中抗(Moderatelyresistant,MR) ２＜平均严重度≤３ 　中感(Moderatelysusceptible,MS) ３＜平均严重度≤４ 　感病(Susceptible,S) ４＜平均严重度≤５ 　高感(Highlysusceptible,HS) ８􀆰２􀆰２　成株期抗性评价 依据鉴定材料发病程度(病情指数)计算相对病情指数(DI/DIM),确定其对全蚀病的成株期抗性水 平,划分标准见表４. 表４　小麦全蚀病成株期抗性评价标准 相对病情指数 抗性评价 DI/DIM＝０ 　高抗(Highlyresistant,HR) ０＜DI/DIM≤０􀆰２ 　抗病(Resistant,R) ０􀆰２＜DI/DIM≤０􀆰４ 　中抗(Moderatelyresistant,MR) ０􀆰４＜DI/DIM≤０􀆰６ 　中感(Moderatelysusceptible,MS) DI/DIM＞０􀆰６ 　高感(Highlysusceptible,HS) 　　注:DIM:发病最重品种的病情指数. ８􀆰３　重复鉴定 初次鉴定中表现为高抗、中抗的材料,翌年用相同的病原菌进行重复鉴定. ８􀆰４　抗性评价 根据２年抗性鉴定结果对鉴定材料进行抗病性评价,抗性以统计的最高病情指数为准. ８􀆰５　鉴定记载表格 小麦全蚀病抗性鉴定结果记载表见５. 表５　 年小麦全蚀病抗性鉴定结果记载表 编号品种名称来源发病株数,株 ０级１级２级３级４级５级６级７级８级病情指数抗性评价 　　注１:鉴定地点 注２:接种病原菌分离物编号 注３:接种日期 　调查日期 鉴定技术负责人(签字): ４NY/T４４６２—２０２５ 附　录　A (资料性) 病原物鉴定和接种体制备 　 A􀆰１　病原物形态 禾顶囊壳小麦变种(Gaeumannomycesgraminisvar􀆰tritici),属真菌界(F