2 0 2 2 1 1 1 1 发 布 － － 2 0 2 3 0 3 0 1 － － 实 施 化 学 农 药 水 - 沉 积 物 系 统 代 谢 试 验 准 则 1 7 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 0 2 0 C C S B 4 1 9 2 — 2 0 2 2 C h e m i c a l p e s t i c i d e — — — G u i d e l i n e f o r a q u a t i c s e d i m e n t s y s t e m m e t a b o l i s m t e s t Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４１９２—２０２２ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口. 本文件起草单位:农业农村部农药检定所. 本文件主要起草人:周艳明、单炜力、袁善奎、陈朗、周欣欣、蓝帅. ⅠNY/T４１９２—２０２２ 化学农药　水Ｇ沉积物系统代谢试验准则 １　范围 本文件规定了化学农药水Ｇ沉积物系统代谢试验的试验方法.本文件适用于挥发性较小或不具有挥 发性的农药,不适用于在试验条件下不能保持在水或沉积物中的极易挥发的农药. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T３２７２３　土壤微生物生物量的测定　底物诱导呼吸法 GB/T３９２２８　土壤微生物生物量的测定　熏蒸提取法 LY/T１２２５　森林土壤颗粒组成(机械组成)的测定 NY/T１１２１􀆰２　土壤检测　第２部分:土壤pH的测定 NY/T１１２１􀆰６　土壤检测　第６部分:土壤有机质的测定 NY/T３１５０　农药登记　环境降解动力学评估及计算指南 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 主要代谢物　majormetabolite 在水Ｇ沉积物系统代谢试验中,在任何一次检测时间点中摩尔分数或放射性强度比例大于１０％的代 谢物. ３􀆰２ 结合残留　boundresidues 用不改变其化学结构或沉积物基质结构的方法不能提取出的残留物. ３􀆰３ 已提取残留　extractedresidues 已从沉积物中提取出的残留物. ３􀆰４ 未提取残留　unextractedresidues 未从沉积物中提取出的残留物. ３􀆰５ 矿化　mineralisation 有机物在好氧条件下完全降解为二氧化碳和水或在厌氧条件下完全降解为甲烷、二氧化碳和水的过 程.本文件中,当使用１４C标记的被试物时,矿化指被标记碳原子被氧化并释放出二氧化碳或被还原并释 放出甲烷的过程. ４　试验概述 将被试物添加至水Ｇ沉积物系统中,在恒定的温度条件下避光培养,用适当的吸收装置收集挥发性产 物.定期取样检测水、沉积物、吸收装置和容器中的母体和代谢物,明确矿化率、结合残留和质量平衡回收 １NY/T４１９２—２０２２ 率,确定主要代谢物、计算母体和主要代谢物的５０％降解时间(DT５０)和９０％降解时间(DT９０). ５　仪器与试剂 ５􀆰１　仪器 ５􀆰１􀆰１　气体流动式培养装置构成见附录A. ５􀆰１􀆰２　定性定量分析仪器,如气相色谱仪、高效液相色谱仪、质谱仪、气相色谱Ｇ质谱联用仪、高效液相色 谱Ｇ质谱联用仪、核磁共振仪等. ５􀆰１􀆰３　液体闪烁计数仪. ５􀆰１􀆰４　氧化燃烧仪. ５􀆰１􀆰５　离心机. ５􀆰１􀆰６　提取、浓缩设备. ５􀆰２　试剂 除另有规定外,所有试剂均为分析纯. ５􀆰２􀆰１　氢氧化钠(NaOH,１３１０Ｇ７３Ｇ２),１mol/L. ５􀆰２􀆰２　氢氧化钾(KOH,１３１０Ｇ５８Ｇ３),１mol/L. ５􀆰２􀆰３　乙二醇[(CH２OH)２,１０７Ｇ２１Ｇ１]. ５􀆰２􀆰４　２Ｇ羟基乙胺[HO(CH２)２NH２,１４１Ｇ４３Ｇ５]. ５􀆰２􀆰５　硫酸(H２SO４,７６６４Ｇ９３Ｇ９),０􀆰０５mol/L. ６　被试物与参照物 ６􀆰１　被试物 ６􀆰１􀆰１　应使用同位素标记的被试物,宜使用１４C标记.标记的位置应在化合物的最稳定部分.对含有一 个环状结构的化合物,标记位点应选择在该环状结构;对含有多个环状结构的化合物,应在化合物不同环 状位置分别标记、分别开展试验.被试物的含量和放射化学纯度应≥９５％. ６􀆰１􀆰２　不宜使用制剂作为被试物,但被试物水溶解度低时可使用制剂作为被试物. ６􀆰１􀆰３　试验开始前,应了解被试物的以下信息: ———水中溶解度; ———有机溶剂中的溶解度; ———饱和蒸汽压; ———正辛醇/水分配系数; ———吸附系数; ———水解特性; ———解离常数(对于易质子化或去质子化的被试物); ———土壤微生物毒性(如有); ———快速生物降解性或固有生物降解性(如有); ———在土壤中的代谢(如有); ———被试物及其代谢物的定性和定量分析方法(包括提取和净化方法). ６􀆰２　对照物 农药母体和代谢物的标准物质,不需同位素标记. ７　试验用沉积物 ７􀆰１　沉积物的选择 ７􀆰１􀆰１　应使用２种有机碳含量和质地不同的沉积物系统,其中１种为高有机碳含量(２􀆰５％~７􀆰５％)细质 ２NY/T４１９２—２０２２ 地([黏粒＋粉粒]＞５０％),另１种为低有机碳含量(０􀆰５％~２􀆰５％)粗质地([黏粒＋粉粒]＜５０％).２种 沉积物的有机碳含量差异宜＞２％,黏粒＋粉粒的差异宜＞２０％. 注:[黏粒＋粉粒]指沉积物中粒径＜０􀆰０５mm的矿物组分. ７􀆰１􀆰２　当资料表明被试物在不同pH条件下的土壤代谢或土壤吸附有显著差异时,选择沉积物时应考虑 pH的影响. ７􀆰２　水和沉积物的采集 ４年内受被试物或与被试物结构类似的农药污染的沉积物不应用于试验.宜从距岸边至少１m、水 深至少０􀆰３m处采集水和沉积物.应采集表层５cm~１０cm的沉积物,并同时采集足量水样. ７􀆰３　沉积物的处理 先过滤分离水和沉积物,再用采样地的水将沉积物湿筛至＜２mm,用于湿筛的水不应继续用于试验. ７􀆰４　水和沉积物的保存 宜使用新鲜的水和沉积物开展试验,必须保存时,应将已处理过的沉积物与水一起(水层深度为 ６cm~１０cm)在４℃±２℃、黑暗条件下保存,最长可保存４周.用于好氧代谢试验的水和沉积物,储存时 应保持通风,如可储存于敞口容器中.水和沉积物运输和储存过程中不应冷冻. ７􀆰５　水和沉积物理化性质的测定 至少应按附录B测定试验用水和沉积物的性质,其中: ———沉积物的总有机碳按NY/T１１２１􀆰６测定; ———沉积物的pH按NY/T１１２１􀆰２测定. ———沉积物的粒径分布按LY/T１２２５测定. ———好氧代谢试验中沉积物的微生物生物量宜按GB/T３９２２８测定,也可按GB/T３２７２３或平板菌 落计数法测定; ———厌氧代谢试验中沉积物的微生物生物量宜按GB/T３９２２８测定,也可通过检测甲烷生成率测定. ７􀆰６　水Ｇ沉积物系统预培养 试验开始前,水Ｇ沉积物系统应先进行预培养.将沉积物和水按一定依次加入培养瓶,在与试验条件 相同的环境下预培养.通过测定pH、溶解氧以及水和沉积物的氧化还原电位判断水Ｇ沉积物系统是否已 达到稳定状态.除处理组和对照组外,每种沉积物系统应额外设置１个培养瓶用于预培养期间水和沉积 物理化性质的测定.预培养时间宜为１周~２周,不应超过４周. ８　试验方法 ８􀆰１　培养装置 ８􀆰１􀆰１　培养装置应使用玻璃容器,但正辛醇/水分配系数或土壤吸附等资料表明被试物可吸附在玻璃表 面时,可使用聚四氟乙烯等替代材料,也可采用以下方法处理: ———测定吸附在玻璃器皿表面的被试物和代谢物; ———试验结束时用溶剂清洗玻璃容器并测定放射性; ———以制剂为被试物; ———增加助溶剂的量. ８􀆰１􀆰２　应使O２或N２在水中分布均匀,如可使培养瓶中进气管略低于水面,但应避免扰动沉积物.不应 去除空气中的CO２,以免提高水的pH. ８􀆰１􀆰３　可用NaOH或KOH等吸收CO２,乙二醇或２Ｇ羟基乙胺等吸收挥发性有机物,H２SO４吸收碱性挥 发性物质.厌氧代谢试验中,用分子筛吸收甲烷. ８􀆰２　试验条件 ８􀆰２􀆰１　培养瓶中水和沉积物的体积比为３:１~４:１,沉积物层深度为(２􀆰５±０􀆰５)cm.每个培养瓶中沉积 物干重宜≥５０g. ８􀆰２􀆰２　整个试验周期内,水Ｇ沉积物系统应在黑暗、１０℃~３０℃恒温条件下培养,试验温度宜为(２０±２)℃. ３NY/T４１９２—２０２２ ８􀆰２􀆰３　好氧代谢试验中,应通入空气,并保持溶解氧浓度为７mg/L~１０mg/L;厌氧代谢试验中,应通入 N２,并保持水和沉积物的氧化还原电位(Eh)＜－１００mV. ８􀆰３　添加被试物 ８􀆰３􀆰１　被试物添加量 ８􀆰３􀆰１􀆰１　直接用于水体的农药,根据农药最大推荐用量和培养瓶中水体面积按公式(１)计算被试物添加 量.其他情况根据农药在水体中的预测浓度确定被试物的添加浓度. m＝A×π×φ ２æ èçö ø÷２ ×d D÷１００ (１) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: m　———每个培养瓶中被试物的初始添加量,单位为微克(μg); A———被试物的推荐用量,单位为克每公顷(g/hm２);